En iyi sonuçlar için HPLC Örnek Hazırlık Çözümleri

HPLC örnek hazırlığı için dört adım

Adım 1. Sulu çözeltilerin analizi

2. Adım. Standartların hazırlanması

Bileşik tanımlama ve nicelendirme için standartların hazırlanması sıkıcı ve zaman alıcı bir süreç olabilir. Önceden tanımlanmış bir çözücü hacminin kullanılabilmesi için bir katı olarak tartılması zordur ve hataya bağlı atık maliyetli olabilir - özellikle ilaçlarla çalışırken. Sıcaklık gibi diğer faktörler standart hazırlamayı daha da karmaşıklaştırır. Sıcaklık dalgalanmaları çözücü yoğunluğunu değiştirir ve konsantrasyondaki dramatik farklılıklara katkıda bulunur.



Birkaç ondalık basamağa kadar tartım doğruluğu sağlayan ve dengeyi bir çözücü dağıtıcıya bağlayarak işlemi otomatikleştiren bir denge kullanmak en yüksek hassasiyeti garanti eder. YAPP16 dozlama Q-APP gibi yazılımları kullanmak, ölçülen değerlerin otomatik hesaplamaları ve gravimetrik izlenmesini sağlar. Çözücünün sıcaklığını ve yoğunluğunu belgelemek, özellikle sonraki günlerde standartlar hazırlarken oldukça doğru konsantrasyonlar sağlar. YAPP16 Tartım uygulamasından Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Kromatografi Veri Sistemi (CDS) yazılımına doğrudan veri aktarımı, tam veri bütünlüğü ile kağıtsız veri işleme için bir seçenektir.

3. Adım. İyi pipetleme ile temellere geri dönün

Doğru ve hassas pipetlemenin önemi çok sık göz ardı edilir ve kabul edilir. Kullanıcı beceri seviyesi ve deneyiminin HPLC gibi hassas analizler için önemli etkileri olabilir. Doğru pipeti seçmek insan hatasını ve boşa giden çözücülerin ilişkili maliyetlerini azaltabilir.



Hacim kilidine sahip mekanik pipetler, kazara hacim değişikliklerini önlemek için basit bir çözüm sunarken, daha sofistike elektronik pipetler sürekli olarak hassas hacimler sunmak için kullanıcı değişkenliğini ortadan kaldırır. Pipet ucu ayrıca HPLC analizleri için dikkate alınması gereken önemli bir ayrıntıdır. Düşük tutma ipuçları, numune geri kazanımını en üst düzeye çıkardıkları için farklı viskozitlerin çözücüleriyle çalışırken en iyisidir. Pipet ucundan sızma sonucunda numune kontaminasyonu da ortaya çıkabilir. Bu nedenle, yüksek kimyasal dirençli ipuçları örnek bütünlüğünü korur.

4. Adım. Doğruluk ve uzun ömür için filtre

Analizden önce numuneleri filtrelemek için ek özen gösterilmesi güvenilirliği artırır ve tıkanma etkilerini önleyerek HPLC kolonunun ömrünü uzatabilir. Şırınga filtreleri, kolon kromatografisinden önce numuneleri filtreleme için basit ve hızlı bir çözümdür. Pipet uçlarında olduğu gibi, HPLC'de kullanılan çözücüler, sızıntı ve numune kontaminasyonunu önlemek için spesifik filtreler gerektirir.

Selüloz membranlar, dimetil sülfoksite (DMSO), amidlere, ketonlara, ester ve eter bileşiklerine dirençlidir. Özellikle sert çözücüler için, kaplanmamış polietlersülfon (PTFO) membranları liç ve numune kontaminasyonunu önler. Örnek numarası arttığında numune filtrasyonu çok zaman alıcı hale gelir. ClarIstep® filtrasyon sistemi gibi çok örnekli filtrasyon birimleri, kaliteden ödün vermeden numuneleri şırıngalar ve hızlı yol numune hazırlığı olmadan işleyebilir.

Dikkat etmeniz gereken beş problem！

1. Laboratuarların karşılaştığı en büyük örnek hazırlık problemleri nelerdir?

Laboratuvarlar zaman ve maliyet açısından artan baskı altındadır, genellikle sadece çok sayıda örnekle değil, aynı zamanda değişen doğa örnekleriyle de ilgilenir. Örnek hazırlama, numune tipleri veya numune hazırlama yöntemleri ve kullanılan malzemelerin elde edilen sonuçları etkileyebileceği bir alandır. Filtrasyon cihazındaki malzemeler ile çözücü arasındaki uyumluluğun sağlanması sorunları en aza indirebilir; Örneğin, analit tespitine müdahale edebilecek çıkarılabilir bileşik seviyeleri.

2. Örnek hazırlığı yanlış gittiğinde ne olur?

Analitik yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) uygulamalarından önce, numuneler, hepsi sisteme enjekte edilen numuneyi etkileyerek analitik sonuçları etkileme potansiyeline sahip çeşitli yöntemlerle hazırlanır. Etkisiz örnek hazırlama, sütun ömründe bir azalmaya, bileşenler için artan hizmet gereksinimlerine, enstrümantasyonun potansiyel kesinti süresine, kromatografik ayırma verimliliğinde azalmaya ve tekrarlanabilirlik ve diğer birçok probleme yol açabilir.

3. İlk bakışta, filtrasyon basit bir süreç gibi görünüyor ...

Filtrasyon büyük bir iş akışının görünüşte küçük bir parçası olmasına rağmen, belirli bir uygulama için doğru filtreyi seçmenin etkisi önemli olabilir. Örneğin, yeterli partikül maddeyi kaldırmayan yöntemler kolon engellemesine neden olabilir. Örnek hazırlama cihazlarının uygunsuz seçimi, belirli koşullar altında, ekstrakte edilebilir bileşikleri numuneye serbest bırakabilir, ilgi analitlerini bağlayabilir veya örnek kaybı yoluyla hatalar getirebilir - hepsi gözlemlenen sonuçların kalitesini ve tekrarlanabilirliğini etkileyebilir. Filtrasyon sarf malzemelerinizin yeniden işleme veya kök koruma araştırmaları gerektiren hatalara katkıda bulunmadığından eminseniz, paradan tasarruf edecek ve kendinize huzur vereceksiniz.

4. En yaygın örnek hazırlık 'başarısız' nedir?

Yanlış filtre membran seçimi, çok gördüğümüz bir sorundur. Sorunlar, çıkarılabilir analitlerin tespitine müdahale edebilecek çıkarılabilirlerden gelen yabancı zirveler olarak görünebilir. Filtre ortamının kimyasal direnç açısından bir numune veya çözücü ile uyumsuzluğu, sadece filtre ortamı üzerindeki çözünme etkileriyle sınırlı değildir. Çözücüler, tam olarak uyumlu olmadığında polimerik membran malzemelerinin hafif bir şekilde şişmesine neden olabilir, bu da filtrasyon performansını etkileyebilir ve numunelerin etkisiz temizlenmesine yol açar. Bu sorunu ele almanın bir yolu, hem sulu hem de organik çözücülerle geniş ölçüde uyumlu bir membran seçmektir. Tipik HPLC numunesi hazırlama için, rejenere selüloz membranlar içeren şırınga ve şırınga filtreleri, geniş çözücü uyumlulukları nedeniyle iyi bir seçenektir.

Hazırlanan hacim için gerekenden daha büyük bir filtre cihazının kullanılması başka bir yaygın tuzaktır. Çok büyük filtre cihazlarının kullanımı, mümkün olduğunca sınır dışı edilmek üzere önlemler alındıktan sonra bile, küçük miktarlarda numunenin filtrede kalacağı anlamına gelir.

5. Filtrasyon adımını ciddiye almanın avantajları nelerdir?

Analitik testlerde bulunan çoğu laboratuvarın temel amacı, tutarlı sonuçları destekleyen ve tutarlı filtreleme gerektiren tutarlı süreçler geliştirmektir. Doğru gözenek boyutuna ve tutma özelliklerine sahip bir filtrasyon cihazının seçimi, etkili partikül çıkarılmasını sağlamaya yardımcı olurken, filtre ünitesinin uygun boyutu ve tasarımı seçimi örnek kaybını en aza indirmeye yardımcı olabilir. İyi filtrasyon ayrıca sütunun korunmasına yardımcı olur ve hem enjektörün hem de sütunun ömrünü uzatır.

Çözüm

HPLC, doğru, tekrarlanabilir sonuçlar verdiği için yaşam bilimi ve biyofarmasötik araştırmalar için değerli bir tekniktir. Bu doğruluk, HPLC örneğinin bütünlüğüne bağlıdır ve yüksek kaliteli örnekler sağlamanın en iyi yolu en iyi araçlarla başlamaktır. Ultraür su, standart hazırlık, pipetler, uçlar ve filtreler için çözümlerle HPLC numune hazırlama hattı her ayrıntı için hesaplar. Otomatik çözümler ve yazılımlar ayrıca temiz sonuçlar için temiz örnekler sunmak için örnek hazırlamayı kolaylaştırmaya yardımcı olur.

HPLC örnek hazırlama çözümleri hakkında daha fazla tartışma memnuniyetle karşılanmaktadır!