Підготовка зразка є критичним кроком у процесі рідинної хроматографії-мас-мас-мас-маса (LC-MS), що впливає на точність та надійність аналітичних результатів. Основна мета підготовки зразків-витягування, очищення та концентрація аналітиків із складних матриць, гарантуючи, що вони сумісні з аналізом LC-MS. Цей крок має вирішальне значення для усунення потенційних перешкод, які можуть вплинути на якість даних. Правильна підготовка зразків покращує чутливість та специфічність аналізу, що є важливим для застосувань у різних галузях, таких як протеоміка, метаболомія, фармацевтичний аналіз та екологічне тестування.

Ключові цілі підготовки зразків:

Видалення перешкод: усунути речовини, які можуть заважати виявленню цільових аналітиків.

Концентрація аналіти: збільшуйте концентрацію аналітиків для поліпшення меж виявлення.

Сумісність: Підготуйте зразки таким чином, щоб вони могли бути ефективно проаналізовані за допомогою систем LC-MS.

Хочете дізнатися більше про підготовку зразків HPLC, будь ласка, перевірте цю статтю: Рішення для підготовки зразків ВЕРХ для найкращих результатів

Поширені методики підготовки зразків LC-MS

У підготовці зразка LC-MS зазвичай використовуються кілька методик. Кожен метод має свої переваги і вибирається на основі конкретних вимог аналізу.

1. Екстракція твердої фази (SPE)

SPE широко використовується для виділення аналітиків із зразків рідини. Ця методика передбачає проходження зразка через суцільну стаціонарну фазу, яка вибірково зберігає цільові аналітики, дозволяючи іншим компонентам пройти. SPE особливо ефективний для складних матриць, таких як кров або сеча, і пропонує кілька переваг:

Високий показник відновлення: SPE, як правило, дає більш високі показники відновлення порівняно з екстракцією рідини-рідини.

Сумісність автоматизації: метод можна легко автоматизувати, підвищити пропускну здатність та ефективність.

2. Опади білка

Опад білка - це простий, але ефективний метод видалення білків з біологічних зразків. Ця методика особливо важлива при аналізі зразків з високим вмістом білка, наприклад, плазмою або сироваткою. За допомогою осадження білків цей метод спрощує матрицю і зменшує перешкоди в подальших аналізах.

Швидко та ефективно: це дозволяє швидко обробляти зразки, зберігаючи хороші показники відновлення.

3. Екстракція рідини-рідини (LLE)

LLE відокремлює аналіти на основі їх розчинності у двох неверних рідинах - типово водна фаза та органічний розчинник. Ця методика корисна для вилучення неполярних або помірно полярних сполук із складних водних матриць.

Універсальний додаток: LLE може бути адаптований для різних обсягів зразків та типів, що робить його придатним для широкого спектру застосувань.

4. Дериватизація

Дериватизація передбачає хімічно модифікуючу аналіти для підвищення їх виявлення в аналізі LC-MS. Цей процес покращує властивості, такі як мінливість та ефективність іонізації, що робить його особливо корисним для сполук з низькою притаманною виявленням.

Підвищена чутливість: Дериватизація може значно підвищити чутливість та селективність аналізів для конкретних складних класів, таких як амінокислоти або стероїди.

Хочете дізнатися більше про програми флаконів хроматографії, будь ласка, перевірте цю статтю: 15 Застосування флаконів хроматографії в різних галузях

Фактори, що впливають на вибір методу підготовки зразка

Вибір відповідної методики підготовки зразків вимагає врахування декількох факторів:

Хімія аналіту: Розуміння полярності, заряду та стабільності аналітиків має вирішальне значення.

Об'єм та складність зразка: Об'ємні обмеження та складність матриці зразка можуть диктувати, які методи можливі.

Вимоги до чутливості: Різні програми можуть мати різні потреби чутливості, які впливають на вибір методу.

Лабораторні ресурси: Наявність обладнання для автоматизації або ручної обробки може вплинути на вибір техніки.

Найкращі практики ефективної підготовки зразків

Для досягнення оптимальних результатів в аналізі LC-MS дотримання найкращих практик під час підготовки зразків є важливим:

Стандартизація: Розробити стандартизовані протоколи для забезпечення узгодженості в різних аналізах.

Перевірка: регулярно підтверджують методи для підтвердження їх надійності та точності.

Мінімізуйте обробку зразків: зменшити кількість маніпуляцій для запобігання втрат або забрудненню.

Використовуйте якісні реагенти: використовуйте якісні реагенти, щоб уникнути введення домішок у зразки.

Процедури документів: Ведіть детальні записи всіх процедур для полегшення усунення несправностей та оптимізації методів.

Висновок

Ефективна підготовка зразка є основною для успішного аналізу LC-MS. Розуміючи різні методи, такі як SPE, осадження білка, LLE та дериватизація, аналітики можуть вибрати найбільш підходящий метод для їх конкретних вимог. Крім того, дотримання найкращих практик покращить якість даних та забезпечить надійні результати для різних застосувань у дослідженнях та галузях.

На закінчення, освоєння методів підготовки зразків може не тільки покращити аналітичні показники, але й внести вагомий внесок у прогрес у таких сферах, як клінічна діагностика, розробка лікарських засобів та моніторинг навколишнього середовища.

Розблокуйте секрети належної підготовки флакона хроматографії для точного та надійного аналізу лише за 6 простих кроків.Читайте далі, щоб освоїти техніку! 6 кроків для підготовки флаконів хроматографії для аналізу

Попередній:

LCMS проти GCMS: Яка методика найкраща для ваших досліджень?

Далі:

Що таке флакон TOC та його значення в хроматографії?