Деякі зразки все ще не можуть бути безпосередньо введені після попередньої обробки. Дериватизація необхідна, щоб зробити сполуки без УФ-поглинання або флуоресценції, які можна виявити УФ- або флуоресцентними детекторами.

Покращує чутливість
Покращує розділення (зміна якості)

Можливі проблеми включають втрату зразка, забруднення, незавершені реакції або численні побічні продукти, які можуть вплинути на точність або створити помилки.

Фільтрація зразків

Зразки РХ повинні бути однорідними та без часток; частинки можуть пошкодити інжектор або заблокувати колонку. Кроки включають:

Збовтайте зразок перед ін’єкцією та перевірте на наявність часток, каламутності чи емульсії
Якщо спостерігаються частинки, відфільтруйте зразок за допомогою мембрани, яка може утримувати частинки ≥0,15 мкм

Потенційні проблеми: забруднення зразка, концентрація компонентів, що знижує адсорбцію, і випаровування розчинника, що викликає помилки.

Методи вилучення

Екстракція відокремлює аналіти від співрозчинників або видаляє заважаючі речовини (наприклад, білки). Органічні розчинники повинні бути малотоксичними, леткими, з низьким вмістом домішок і добре розчиняти зразок.

Звичайні розчинники: діетиловий ефір, етилацетат, дихлорметан, хлороформ, бензол або суміші.

Після екстракції зразки можна вводити безпосередньо або концентрувати для підвищення концентрації аналіту та чутливості.

Екстракція водорозчинних зразків

Кислі компоненти та солі: витягніть домішки органічним розчинником, доведіть до кислого, потім витягніть або введіть; або висушіть під N₂ і розчиніть у відповідному розчиннику перед ін'єкцією.
Основні компоненти та солі: витягніть домішки органічним розчинником, доведіть до основних, потім витягніть або введіть; або висушіть під N₂ і розчиніть у відповідному розчиннику перед ін'єкцією.
Нейтральні компоненти: витягніть домішки органічним розчинником, потім проаналізуйте безпосередньо за допомогою хроматографії з оберненою фазою.

Екстракція жиророзчинних зразків

Екстрагуйте органічним розчинником або вводьте безпосередньо; або висушіть під N₂ і розчиніть у відповідному розчиннику перед ін'єкцією.

Джерела забруднення

Потенційні джерела забруднення в аналізі:

Тип забруднення	Джерело	Заходи профілактики
Екологічний	Шкідливі гази, пил, аерозолі	Тримайте приладову кімнату ізольованою, чистою; встановити кондиціонер; контролювати вологість <70%; запобігають волозі, корозії, вібрації
Контейнери	Посуд лабораторний скляний, керамічний, кварцовий, пластиковий	Виберіть відповідні контейнери для типу зразка; ретельно очистити
Реагенти	Реагенти, непридатні для хроматографії	Використовуйте реагенти хроматографічного класу, високої чистоти або аналітичного класу

Приготування стандартного розчину

Спочатку приготуйте розчин внутрішнього стандарту; використовувати ту саму партію в стандартах і зразках, щоб зменшити помилки
Речовини мають бути хроматографічно чистими та стабільними
Стандартні розчини зберігають у коричневих пляшках при низькій температурі
Для вітамінів використовуйте коричневі мірні колби або захищайте від світла

Поширені проблеми під час попередньої обробки зразків і розчинів

проблема	причина	Рішення
Непов’язані піки на хроматограмі	Забруднення фільтра	Замочіть фільтр у розчиннику зразка та введіть пробну ін’єкцію Змінити тип фільтра Використовуйте альтернативні методи очищення
Низька пікова відповідь (особливо зразки з низькою концентрацією)	Адсорбція на поверхні фільтра	Змінити тип фільтра Обробляйте всі зразки в однакових умовах Використовуйте альтернативні методи очищення
Низьке відновлення	Неповне вилучення	Збільште час екстракції, використовуйте гарячий розчинник Налаштуйте метод очищення
Розширені піки, скорочений термін служби колонки	Перешкоди та забруднення зразків	Удосконалити спосіб очищення
Погана точність	Неповне одужання	Оптимізуйте або замініть дериватізацію, розділення, екстракцію чи інші умови Використовуйте автоматичне керування для підвищення точності

Попередній:

Надзвичайно висока/низька температура та вплив світла на стабільність зразка: теорія та методологія

далі:

Назад до списку