Вибір між високопродуктивною рідинною хроматографією (ВЕРХ) та капілярним електрофорезом (СЕ) залежить від окремих аналітичних потреб та конкретного середовища застосування. Кожна методика має свої переваги та недоліки і, отже, підходить для різних типів аналізу.

Розблокуйте секрети належної підготовки флакона хроматографії для точного та надійного аналізу лише за 6 простих кроків. Читайте далі, щоб освоїти техніку!6 кроків для підготовки флаконів хроматографії для аналізу

Огляд HPLC та CE

Високопродуктивна рідинна хроматографія (ВЕРХ)

HPLC- це широко використана аналітична методика, яка розділяє компоненти в суміші на основі їх взаємодії з стаціонарною фазою та мобільною фазою. Він особливо ефективний для аналізу малих молекул, пептидів та білків. Основні особливості ВЕРХ включають:

Межі чутливості та виявлення: ВЕРХ, як правило, пропонує менші межі виявлення порівняно з СЕ, що робить його придатним для аналізу слідів. Наприклад, дослідження показали, що ВЕРХ може досягти меж виявлення, значно нижчими, ніж у СЕ, особливо при аналізі складних матриць, таких як біологічні зразки.

Універсальність: ВЕРХ може бути адаптований для різних типів аналізів, включаючи нормальну фазу, зворотну фазу, обмін іонами та хроматографію виключення розмірів. Ця універсальність дозволяє використовувати його в різних галузях, включаючи фармацевтичні препарати, екологічні тестування та безпеку харчових продуктів.

Обсяг вибірки: ВЕРХ зазвичай вимагає більших обсягів вибірки порівняно з СЕ, що може бути обмеженням у певних додатках, де наявність вибірки обмежена.

Хочете знати 50 відповідей про флакони ВЕРХ, будь ласка, перевірте цю статтю:50 найчастіше задаються питання щодо флаконів ВЕРХ

Капілярний електрофорез (CE)

CE - це техніка поділу, яка використовує електричне поле для проведення заряджених аналітиків через капіляр, наповнений електролітом. Він особливо ефективний для розділення іонних видів і пропонує кілька переваг:

Швидкість та ефективність: CE, як правило, забезпечує швидший час аналізу, ніж ВЕРХ завдяки високій ефективності процесу розділення. Невеликий діаметр капіляра дозволяє швидко нагрівати та охолодити, що призводить до коротшого часу пробігу.

Нижнє споживання розчинника: CE, як правило, використовує значно менше розчинника, ніж ВЕРХ, що робить його більш екологічним варіантом. Ця характеристика добре узгоджується з принципами зеленої хімії, які все більше важливі для розробки аналітичних методів.

Висока роздільна здатність: CE може досягти високої роздільної здатності для тісно споріднених видів, що особливо корисно для аналізу складних сумішей, таких як ті, що знаходяться в біологічних зразках.

Фактори, що впливають на вибір між ВЕРХ та СЕ

1. Природа аналітиків

Вибір між ВЕРХ та СЕ часто залежить від характеру досліджуваних аналітиків. ВЕРХ більше підходить для більших, неіонних сполук, а CE перевершує невеликі, заряджені молекули. Наприклад, CE ефективно використовувався для аналізу варіантів гемоглобіну, де він продемонстрував чудову здатність у виявленні конкретних варіантів, які ВЕРХ не міг виявити.

2. Необхідні межі чутливості та виявлення

Якщо аналіз вимагає надзвичайно низьких меж виявлення, ВЕРХ може бути кращим вибором. Показано, що в різних дослідженнях досягає нижчих меж виявлення, що робить його ідеальним для таких застосувань, як тестування на наркотики та моніторинг навколишнього середовища.

3. Підготовка та складність зразків

ВЕРХ часто вимагає більш широкої підготовки зразків, що може бути недоліком у налаштуваннях високої пропускної здатності. На відміну від цього, CE може спростити підготовку зразків, особливо для іонних видів, що дозволяє швидше аналізувати та менше використання реагентів. Це особливо вигідно в клінічних умовах, де швидкі результати є важливими.

4. Вартість міркувань

Вартість - ще один вагомий фактор. Незважаючи на те, що початкова установка для ВЕРХ може бути вищою через необхідність складних приладів та стовпців, CE, як правило, несе зниження експлуатаційних витрат через зменшення споживання розчинника та генерації відходів. Це робить CE привабливим варіантом для лабораторій, спрямованих на мінімізацію оперативних витрат, дотримуючись екологічних норм.

5. Час розробки методу

CE часто дозволяє більш швидкий розвиток методу порівняно з ВЕРХ. Простота налаштування CE та зменшена потреба в широкій оптимізації можуть призвести до швидшого часу повороту для нових аналітичних методів, що має вирішальне значення для динамічних дослідницьких умов.

Хочете знати, чому флакони скляної хроматографії кращі за пластикові флакони, будь ласка, перевірте цю статтю: ТОП 3 причини, чому флакони скляної хроматографії кращі, ніж пластикові флакони

Висновок

Підводячи підсумок, рішення про використання ВЕРХ або СЕ має ґрунтуватися на ретельній оцінці конкретних аналітичних вимог, включаючи характер аналіту, потреби чутливості, складність підготовки вибірки, міркування витрат та час розробки методів. Обидві методи мають свої унікальні переваги і іноді можуть доповнювати один одного, залежно від аналітичних цілей. Розуміння цих факторів допоможе дослідникам та аналітикам вибрати найбільш підходящий метод для їх конкретного застосування.

Попередній:

Який матеріал фільтрів шприца пропонує найкращу ефективність утримання частинок？

Далі:

LCMS проти GCMS: Яка методика найкраща для ваших досліджень?

Електрофорез HPLC проти капілярів: який можна використовувати?