Чи знаєте ви про паперову хроматографію?

Паперова хроматографія - це широко застосовувана аналітична методика, яка розділяє та визначає суміші речовин на основі їх різних спорідненостей для стаціонарної фази (паперу) та мобільної фази (розчинник). Це особливо корисно в хімії та біохімії для аналізу невеликих кількостей речовин, таких як пігменти, амінокислоти та інші органічні сполуки.

Що таке паперова хроматографія?

Паперова хроматографія - це тип рідинної хроматографії, в якій стаціонарна фаза є аркушем фільтрувального паперу, а мобільна фаза - це розчинник, який протікає через фільтр -папір. Методика спирається на диференціальне розподіл сполук між стаціонарною фазою (фільтрувальний папір) та мобільної фази (розчинник). Коли розчинник рухається вгору по паперу фільтру за допомогою капілярної дії, він несе компоненти суміші з різною швидкістю на основі їх спорідненості до двох фаз.

Основні принципи, що стоять за паперовою хроматографією, можна зрозуміти за допомогою двох основних понять: хроматографія розділу та адсорбційну хроматографію.

Хроматографія розділу: У цьому типі речовини розподіляються між двома рідкими фазами. Стаціонарна фаза складається з води в порах фільтрувального паперу, тоді як мобільна фаза - це розчинник, який рухається через ці пори. Розділення відбувається через те, що різні сполуки мають різні спорідненості для стаціонарних та мобільних фаз.

Адсорбційна хроматографія: Тут тверда поверхня паперу діє як стаціонарна фаза, а рідкий розчинник виступає як мобільна фаза. Компоненти в суміші відокремлюються на основі їх адсорбції до твердої поверхні та їх розчинності в рідкій фазі.

Компоненти

Стаціонарна фаза: хроматографічний папір, зазвичай виготовлений з целюлози. Це забезпечує поверхню для компонентів дотримуватися.

Мобільна фаза: розчинник або суміш розчинників, які рухаються на папері за допомогою капілярних дій. Вибір розчинника може суттєво вплинути на процес розділення.

Зразок: суміш, яку слід проаналізувати, зазвичай помічається у визначеній відправній точці на папері.

Хочете дізнатися більше про підготовку зразків HPLC, будь ласка, перевірте цю статтю: Рішення для підготовки зразків ВЕРХ для найкращих результатів

Процес паперової хроматографії

Підготовка: Виберіть високоякісний фільтр-папір з певною пористістю, щоб забезпечити ефективне розділення. Нанесіть невелику частину зразкової суміші на базову лінію хроматографічної паперу.

Підготовка зразків: Розчиніть зразкову суміш у відповідному розчиннику як частину мобільної фази.

Показування: Використовуйте капілярну або мікропіпету, щоб скинути невелику кількість розчину зразка на базовій лінії на фільтрувальному папері.

Розробка: занурте нижній край тестового паперу в розробку розчинника (мобільна фаза). Як відбувається капілярна дія, розчинник піднімається через тестовий папір, несучи з собою компоненти зразка.

Розділення: По мірі руху розчинника різні компоненти зразка будуть рухатися з різними темпами через їх взаємодію з стаціонарною фазою та різною розчинністю на мобільній фазі.

Візуалізація: Після того, як фронт розчинника перемістив достатню відстань, папір видаляється з розчинника і залишається сухим. Компоненти можна візуалізувати за допомогою УФ -світла, хімічних реагентів або шляхом спостереження за змінами кольору.

Аналіз: Відстань, що проходить кожним компонентом, відносно фронту розчинника вимірюється для обчислення значення РФ (коефіцієнт утримання) для ідентифікації.

Застосування паперової хроматографії

Паперова хроматографія має широкий спектр застосувань у різних галузях:

Біохімія: аналіз амінокислот, цукрів та інших біомолекул.

Фармацевтичні препарати: Ідентифікація активних інгредієнтів та домішок у препаратах. Використовується для ідентифікації активних сполук та домішок у препаратах наркотиків під час розвитку та контролю якості.

Наука про навколишнє середовище: паперова хроматографія використовується для виявлення забруднень у зразках води та аналізу забруднень у екстрактах ґрунту.

Харчова промисловість: Техніка допомагає аналізувати добавки, забруднення та барвники в продуктах харчування для забезпечення дотримання правил безпеки.

Переваги паперової хроматографії

Ефективність витрат: Це вимагає мінімального обладнання та матеріалів порівняно з іншими хроматографічними методами, такими як ВЕРХ (високоефективна рідинна хроматографія). Простота: Процес дуже простий і може бути виконаний за допомогою основних лабораторних інструментів, тому він може бути використаний для навчальних цілей.

Низька вимога обсягу вибірки: Для аналізу потрібна лише невелика кількість зразка, що робить його ідеальним для дорогоцінних або обмежених зразків.

Універсальність: вона може розділити широкий спектр речовин на основі хімічних властивостей, включаючи полярні та неполярні сполуки

Обмеження паперової хроматографії

Незважаючи на свої переваги, паперова хроматографія має деякі обмеження:

Обмежена ємність: як правило, підходить для невеликих обсягів зразків.

Резолюція: Резолюція може бути не такою високою, як досягнута більш розвиненими методами, такими як ВЕРХ або газова хроматографія (GC).

Через багато часу: Через повільну швидкість міграції процес може зайняти довше порівняно з іншими хроматографічними методами.

Обмежений кількісний аналіз: Хоча якісні результати можна легко отримати, для кількісної оцінки концентрацій можуть знадобитися додаткові методи калібрування.

Пабова хроматографія залишається цінною технікою для розділення та аналізу сумішей у різних наукових галузях. Його простота, економічна ефективність та здатність надавати інтуїтивно зрозумілі результати роблять його важливим інструментом для хіміків та дослідників. Незважаючи на його обмеження порівняно з більш розвиненими хроматографічними методами, він все ще широко використовується для освітніх цілей та попереднього аналізу в лабораторіях.

Хочете знати 50 відповідей про флакони ВЕРХ, будь ласка, перевірте цю статтю: 50 найчастіше задаються питання щодо флаконів ВЕРХ