HPLC نمونہ pretreatment کے لئے جامع گائیڈ - فلٹریشن ، نکالنے ، اور مشتق
خبریں
زمرے
انکوائری

HPLC نمونہ پریٹریٹمنٹ-مرحلہ وار گائیڈ

21 اکتوبر ، 2025
ٹیگز:

نمونہ pretreatment جائزہ

نمونہ پریٹریٹمنٹ میں انجیکشن سے پہلے تمام کاروائیاں شامل ہیں۔ وزن ، تحلیل کرنے اور کمزوری کے علاوہ ، اس میں مندرجہ ذیل اقدامات بھی شامل ہیں:

  • فلٹریشن
  • نکالنے
  • مشتق (کالم سے پہلے سے مشتق)
  • مائع کرومیٹوگرافی (کم دباؤ کالم کرومیٹوگرافی)

پریٹریٹمنٹ کو دستی یا خودکار انجام دیا جاسکتا ہے۔ کیا آپ نمونہ پریٹریٹمنٹ سے واقف ہیں؟


مشتق

کچھ نمونے پریٹریٹریٹمنٹ کے بعد براہ راست انجکشن نہیں لگائے جاسکتے ہیں۔ UV یا فلوروسینس ڈٹیکٹر کے ذریعہ UV جذب یا فلوروسینس کا پتہ لگانے کے بغیر مرکبات بنانے کی ضرورت ہے۔

  • حساسیت کو بہتر بناتا ہے
  • علیحدگی میں اضافہ (معیار کی تبدیلی)

ممکنہ امور میں نمونہ میں کمی ، آلودگی ، نامکمل رد عمل ، یا متعدد ضمنی مصنوعات شامل ہیں ، جو درستگی کو متاثر کرسکتے ہیں یا غلطیاں متعارف کروا سکتے ہیں۔

نمونہ فلٹریشن

ایل سی کے نمونے یکساں اور ذرہ سے پاک ہونے چاہئیں۔ ذرات انجیکٹر کو نقصان پہنچا سکتے ہیں یا کالم کو روک سکتے ہیں۔ اقدامات میں شامل ہیں:

  • انجیکشن سے پہلے نمونے کو ہلا دیں اور ذرات ، گندگی یا ایملیشن کی جانچ کریں
  • اگر ذرات مشاہدہ کیے جاتے ہیں تو ، ایک جھلی کا استعمال کرتے ہوئے نمونے کو فلٹر کریں جو .10.15μm ذرات کو برقرار رکھ سکتا ہے

ممکنہ امور: نمونہ آلودگی ، جذب کو کم کرنے والے جزو کی حراستی ، اور سالوینٹ وانپیکرن کی وجہ سے غلطیاں۔

نکالنے کے طریقے

نکالنے سے تجزیہ کاروں کو شریک سالوینٹس سے الگ ہوجاتا ہے یا مداخلت کرنے والے مادوں (جیسے ، پروٹین) کو دور کرتا ہے۔ نامیاتی سالوینٹس کو کم زہریلا ، اتار چڑھاؤ ، نجاست میں کم ہونا چاہئے ، اور نمونے کو اچھی طرح سے تحلیل کرنا چاہئے۔

عام سالوینٹس: ڈائیٹیل ایتھر ، ایتھیل ایسیٹیٹ ، ڈیکلورومیٹین ، کلوروفارم ، بینزین ، یا مرکب۔

نکالنے کے بعد ، نمونوں کو براہ راست انجکشن لگایا جاسکتا ہے یا تجزیہ کی حراستی اور حساسیت کو بڑھانے کے ل anctured مرکوز کیا جاسکتا ہے۔

پانی میں گھلنشیل نمونہ نکالنے

  1. تیزابیت والے اجزاء اور نمکیات: نامیاتی سالوینٹ کے ساتھ نجاستوں کو نکالیں ، تیزابیت میں ایڈجسٹ کریں ، پھر نچوڑ یا انجیکشن لگائیں۔ یا N₂ کے تحت خشک کریں اور انجیکشن سے پہلے مناسب سالوینٹ میں تحلیل کریں۔
  2. بنیادی اجزاء اور نمکیات: نامیاتی سالوینٹ کے ساتھ نجاستوں کو نکالیں ، بنیادی میں ایڈجسٹ کریں ، پھر نچوڑ یا انجیکشن لگائیں۔ یا N₂ کے تحت خشک کریں اور انجیکشن سے پہلے مناسب سالوینٹ میں تحلیل کریں۔
  3. غیر جانبدار اجزاء: نامیاتی سالوینٹ کے ساتھ نجاستوں کو نکالیں ، پھر الٹ فیز کرومیٹوگرافی کے ذریعہ براہ راست تجزیہ کریں۔


چربی میں گھلنشیل نمونہ نکالنے

نامیاتی سالوینٹس یا براہ راست انجیکشن کے ساتھ نکالیں۔ یا N₂ کے تحت خشک کریں اور انجیکشن سے پہلے مناسب سالوینٹ میں تحلیل کریں۔


آلودگی کے ذرائع

تجزیہ میں آلودگی کے ممکنہ ذرائع:

آلودگی کی قسم

ماخذ

روک تھام کے اقدامات

ماحولیاتی

نقصان دہ گیسیں ، دھول ، ایروسول

آلہ کے کمرے کو الگ تھلگ ، صاف رکھیں۔ AC انسٹال کریں ؛ نمی کو کنٹرول کریں <70 ٪ ؛ نمی ، سنکنرن ، کمپن کو روکیں

کنٹینر

گلاس ، سیرامک ​​، کوارٹج ، پلاسٹک لیب ویئر

ہر نمونے کی قسم کے مطابق مناسب کنٹینر منتخب کریں۔ اچھی طرح سے صاف کریں

ریجنٹس

غیر کرومیٹوگرافی گریڈ ریجنٹس

کرومیٹوگرافی گریڈ ، اعلی طہارت ، یا تجزیاتی گریڈ ریجنٹس کا استعمال کریں


معیاری حل کی تیاری

  • پہلے داخلی معیاری حل تیار کریں۔ غلطیوں کو کم کرنے کے لئے معیار اور نمونوں میں ایک ہی بیچ کا استعمال کریں
  • مادہ کرومیٹوگرافی گریڈ اور مستحکم ہونا چاہئے
  • کم درجہ حرارت پر بھوری بوتلوں میں معیاری حل ذخیرہ کریں
  • وٹامن کے ل brown ، براؤن والومیٹرک فلاسکس کا استعمال کریں یا روشنی سے بچائیں


نمونہ پریٹریٹریٹمنٹ اور حل میں عام مسائل

مسئلہ

وجہ

حل

کرومیٹوگرام میں غیر متعلقہ چوٹیوں

فلٹر آلودگی

  1. نمونہ سالوینٹ اور ٹیسٹ انجیکشن میں فلٹر بھگو دیں

  2. فلٹر کی قسم تبدیل کریں

  3. صفائی کی متبادل تکنیک استعمال کریں

کم چوٹی کا جواب (خاص طور پر کم حراستی کے نمونے)

فلٹر کی سطح پر جذب

  1. فلٹر کی قسم تبدیل کریں

  2. ایک ہی حالت میں تمام نمونوں پر کارروائی کریں

  3. صفائی کی متبادل تکنیک استعمال کریں

کم بحالی

نامکمل نکالنے

  1. نکالنے کے وقت میں اضافہ کریں ، گرم سالوینٹ کا استعمال کریں

  2. صفائی کے طریقہ کار کو ایڈجسٹ کریں

چوڑا چوٹیوں ، کالم کی زندگی کو مختصر کریں

نمونہ مداخلت اور آلودگی

صفائی کے طریقہ کار کو بہتر بنائیں

ناقص صحت سے متعلق

نامکمل بحالی

  1. مشتق ، علیحدگی ، نکالنے ، یا دیگر شرائط کو بہتر بنائیں یا ان کی جگہ لیں

  2. صحت سے متعلق بہتر بنانے کے لئے خودکار ہینڈلنگ کا استعمال کریں

انکوائری