اعلی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (ایچ پی ایل سی) ایک کلیدی تجزیاتی تکنیک ہے جو دواسازی ، ماحولیاتی علوم اور کھانے کی حفاظت کی طرح متنوع شعبوں میں لیبارٹریوں میں استعمال ہوتی ہے۔ ایچ پی ایل سی دنیا کے اندر ، دو اہم زمرے ہیں: تجزیاتی HPLC اور تیاری HPLC۔ اگرچہ دونوں تکنیک مرکبات کو الگ کرنے کے لئے اسی طرح کے اصولوں کا استعمال کرتے ہیں ، لیکن وہ مختلف مقاصد کے لئے استعمال ہوتے ہیں اور مختلف آپریٹنگ پیرامیٹرز ہوتے ہیں۔ یہ بلاگ تجزیاتی اور تیاری HPLC کے مابین اختلافات کو دریافت کرے گا ، جس میں ان کا مقصد ، آپریشن کا پیمانہ ، آلات اور ایپلی کیشنز شامل ہیں۔
HPLC شیشیوں کے بارے میں مکمل معلومات جاننا چاہتے ہیں ، براہ کرم اس مضمون کو چیک کریں: HPLC شیشیوں کا انسائیکلوپیڈیا
تجزیاتی HPLC کو سمجھنا
تعریف اور مقصد
تجزیاتی HPLC بنیادی طور پر نمونے میں مرکبات کو الگ کرنے اور ان کی نشاندہی کرنے پر مرکوز ہے۔ بنیادی مقصد یہ ہے کہ مرکب میں موجود اجزاء کے بارے میں کوالٹی اور مقداری معلومات حاصل کریں۔ تجزیاتی HPLC اکثر اس کے لئے استعمال ہوتا ہے:
کوالیٹیٹو تجزیہ: نمونے کے اجزاء کی نشاندہی کرنا۔
مقداری تجزیہ: نمونے میں کسی مخصوص مرکب کی حراستی کا تعین کرنا۔
آپریشن کا پیمانہ
تجزیاتی HPLC چھوٹے پیمانے پر کام کرتا ہے ، جس میں عام طور پر مائکولیٹر نمونے کے انجیکشن شامل ہوتے ہیں۔ استعمال ہونے والی جلدیں عام طور پر 1 سے 100 µl رینج میں ہوتی ہیں ، جس سے ایک ہی رن میں متعدد نمونوں کا تجزیہ کیا جاسکتا ہے۔ یہ چھوٹا پیمانہ معمول کی جانچ اور کوالٹی کنٹرول کے لئے مثالی ہے۔
کالم کا سائز اور ذرہ سائز
تجزیاتی HPLC میں استعمال ہونے والے کالم عام طور پر قطر میں چھوٹے ہوتے ہیں ، عام طور پر 4.6 ملی میٹر کے لگ بھگ ہوتے ہیں ، اور چھوٹے اسٹیشنری مرحلے کے ذرات (3-5 μm) سے بھرے ہوتے ہیں۔ یہ ترتیب اعلی ریزولوشن اور موثر کمپاؤنڈ علیحدگی کی اجازت دیتی ہے ، جو تفصیلی تجزیہ کے لئے موزوں ہے۔
پتہ لگانے کے طریقے
تجزیاتی HPLC مختلف قسم کا پتہ لگانے کے طریقوں کو ملازمت دیتا ہے ، جس میں UV-Visible ، فلوروسینس اور بڑے پیمانے پر اسپیکٹومیٹری شامل ہیں۔ ڈیٹیکٹر کا انتخاب تجزیہ کی نوعیت اور تجزیہ کی مخصوص ضروریات پر منحصر ہے۔ غیر تباہ کن ڈٹیکٹر اکثر اس بات کا یقین کرنے کے لئے استعمال کیے جاتے ہیں کہ نمونے کا تجزیہ بغیر کسی خاص نقصان کے کیا جاسکتا ہے۔
HPLC شیشیوں کے بارے میں 50 جوابات جاننا چاہتے ہیں ، براہ کرم اس مضمون کو چیک کریں: 50 اکثر HPLC شیشیوں پر سوالات پوچھے جاتے ہیں
تیاری HPLC کو سمجھنا
تعریف اور مقصد
دوسری طرف ، تیاری HPLC کا مقصد مخصوص مرکبات کو مرکب سے الگ کرنا اور صاف کرنا ہے۔ بنیادی مقصد مزید تجزیہ یا استعمال کے ل target ہدف کمپاؤنڈ کی کافی مقدار کو الگ کرنا ہے۔ پریپریٹو
HPLC عام طور پر درج ذیل درخواستوں کے لئے استعمال ہوتا ہے:
کمپاؤنڈ تنہائی: تحقیق یا صنعتی ایپلی کیشنز کے ل specific مخصوص مرکبات کو نکالنا اور صاف کرنا۔
نمونہ کی تیاری: بعد کے تجزیہ یا تشکیل کے ل samples نمونے کی تیاری۔
کارروائیوں کا پیمانہ
تیاری HPLC تجزیاتی HPLC کے مقابلے میں بڑے پیمانے پر انجام دیا جاتا ہے۔ نمونے کی حجم کچھ ملی لیٹر سے لے کر کئی لیٹر تک ہوسکتی ہے ، جس میں ہدف کے مرکب کی متوقع پیداوار پر منحصر ہے۔ یہ بڑے پیمانے پر مزید استعمال کے ل sufficient صاف شدہ مواد کی کافی مقدار کو جمع کرنے کی اجازت دیتا ہے۔
کالم کا سائز اور ذرہ سائز
تیاری HPLC کے لئے استعمال ہونے والے کالم نمایاں طور پر بڑے ہوتے ہیں ، عام طور پر 20 ملی میٹر سے 100 ملی میٹر تک یا اس سے زیادہ قطر۔ کالم بڑے اسٹیشنری مرحلے کے ذرات (عام طور پر 10-20 µm) سے بھرے ہوئے ہیں تاکہ بہاؤ کی شرح میں اضافہ کیا جاسکے اور نمونے کی بڑی مقدار کو ایڈجسٹ کیا جاسکے۔ یہ ڈیزائن کمر کے دباؤ کو کم کرنے اور مرکبات کی موثر علیحدگی حاصل کرنے میں مدد کرتا ہے۔
پتہ لگانے کے طریقے
تیاری HPLC میں ، پتہ لگانے کے طریقے تجزیاتی HPLC میں استعمال ہونے والوں سے مختلف ہوسکتے ہیں۔ اگرچہ غیر تباہ کن ڈٹیکٹر اب بھی عام ہیں ، لیکن تیاری کے نظام اکثر ڈٹیکٹر استعمال کرتے ہیں جو کسی الیوشن پروفائل کی بنیاد پر حصوں کو جمع کرنے کے قابل ہوتے ہیں۔ اس سے مخصوص مرکبات کو الگ تھلگ کرنے کی اجازت ملتی ہے کیونکہ وہ کالم سے نکلتے ہیں۔
کرومیٹوگرافی شیشیوں کے اطلاق کے بارے میں مزید جاننا چاہتے ہیں ، براہ کرم اس مضمون کو چیک کریں:HPLC شیشیوں کے لئے صفائی کے پانچ طریقے
تجزیاتی اور تیاری HPLC کے مابین کلیدی اختلافات
|
خصوصیت
|
تجزیاتی HPLC
|
تیاری HPLC
|
|
مقصد
|
معیار اور مقداری تجزیہ
|
مرکبات کی تنہائی اور طہارت
|
|
آپریشن کا پیمانہ
|
چھوٹے پیمانے پر (µl جلدیں)
|
بڑے پیمانے پر (ایم ایل سے ایل جلدیں)
|
|
کالم طول و عرض
|
چھوٹا قطر (4.6 ملی میٹر)
|
بڑا قطر (20-100 ملی میٹر)
|
|
ذرہ سائز
|
چھوٹے ذرات (3-5 µm)
|
بڑے ذرات (10-20 µm)
|
|
بہاؤ کی شرح
|
کم بہاؤ کی شرح (0.1-5 ملی لیٹر \ / منٹ)
|
اعلی بہاؤ کی شرح (10-200 ملی لیٹر \ / منٹ)
|
|
پتہ لگانے کے طریقے
|
غیر تباہ کن ڈٹیکٹر (یووی ، ایم ایس)
|
الیوشن پروفائل پر مبنی فریکشن کلیکشن
|
تجزیاتی اور تیاری HPLC کے درمیان انتخاب کرنا
تجزیاتی اور تیاری HPLC کے مابین انتخاب کرتے وقت ، مندرجہ ذیل عوامل پر غور کریں:
تجزیہ کا مقصد: اس بات کا تعین کریں کہ آیا بنیادی مقصد کوالٹی اور مقداری طور پر مرکبات کا تجزیہ کرنا ہے یا مزید استعمال کے ل specific مخصوص مرکبات کو الگ تھلگ کرنا ہے۔
نمونے کی رقم: دستیاب نمونے کی مقدار کا اندازہ کریں۔ اگر نمونہ کی تھوڑی مقدار دستیاب ہے تو ، تجزیاتی HPLC زیادہ مناسب ہوسکتا ہے۔ اس کے برعکس ، اگر نمونے کی ایک بڑی مقدار کی ضرورت ہو تو ، تیاری HPLC ایک بہتر انتخاب ہے۔
مطلوبہ طہارت اور پیداوار: ٹارگٹ کمپاؤنڈ کی مطلوبہ طہارت اور پیداوار پر غور کریں۔ تیاری HPLC کا مقصد کسی خاص مرکب کی بازیابی کو زیادہ سے زیادہ کرنا ہے ، جبکہ تجزیاتی HPLC نمونے کی تشکیل کے بارے میں تفصیلی معلومات فراہم کرنے پر مرکوز ہے۔
وسائل اور سامان: سامان اور بجٹ سمیت دستیاب وسائل کا اندازہ کریں۔ تیاری HPLC سسٹم زیادہ مہنگے ہوتے ہیں اور سامان اور آپریٹنگ اخراجات میں زیادہ سرمایہ کاری کی ضرورت ہوتی ہے۔
HPLC نمونہ کی تیاری میں مہارت حاصل کرنے میں دلچسپی رکھتے ہیں؟ اس مضمون کو دیکھیں:بہترین نتائج کے ل H HPLC نمونہ کی تیاری کے حل۔
نتیجہ
دونوں تجزیاتی اور تیاری والے HPLC کرومیٹوگرافی کے شعبے میں قیمتی تکنیک ہیں ، اور محققین اور صنعت کی ضروریات کے مطابق ہر ایک کے مختلف استعمال ہوتے ہیں۔ اگرچہ تجزیاتی HPLC مرکبات کے تفصیلی تجزیہ اور مقدار کے ل ideal مثالی ہے ، مزید درخواستوں کے ل specific مخصوص مرکبات کو الگ تھلگ کرنے اور صاف کرنے کے لئے تیاری HPLC ضروری ہے۔ ان دونوں تکنیکوں کے مابین اختلافات کو سمجھنے سے محققین کو باخبر فیصلے کرنے ، ان کے ورک فلوز کو بہتر بنانے اور ان کے تجزیوں میں درست اور قابل اعتماد نتائج حاصل کرنے میں مدد ملے گی۔ چونکہ ایچ پی ایل سی ٹکنالوجی آگے بڑھتی جارہی ہے ، تجزیاتی اور تیاری کے دونوں طریقے ہر طرح کی کامیاب سائنسی تحقیق کا لازمی جزو رہیں گے۔