نمونہ کی تیاری اور فلٹریشن: کرومیٹوگرافی میں معیار کو یقینی بنانا

مناسب نمونہ تیار - کلین کنٹینر ، ذرات کو ہٹا دیں ، تجزیہ کاروں کو افزودہ کریں ، اور ، اگر ضرورت ہو تو ، مشتق - 90 فیصد سے زیادہ بیس لائن شور اور دباؤ کی بے ضابطگیوں کو ختم کرتا ہے ، جس سے تیز چوٹیوں اور مستحکم بیس لائنوں کو یقینی بنایا جاتا ہے۔ یہاں ناکامی کے نتیجے میں چوٹی کی ٹیلنگ ، بہتی بیس لائنوں ، یا کالم کی رکاوٹ کا نتیجہ ہوتا ہے۔

1. آلودگی اور میٹرکس مداخلت

مسئلہ

• بیس لائن بڑھنے اور بڑھتی ہوئی شور کو غیر واضح کریں معمولی چوٹیوں۔

• غیر متوقع چوٹیوں کو لیکچڈ نجاست سے ظاہر ہوتا ہے۔

• انجیکشن کے مابین ناقص تولیدی صلاحیت۔
  

  

وجہ

• شیشے کے سامان میں باقیات: نامکمل ایسڈ - واش پتے سلیکیٹس ؛ پلاسٹک ویئر پلاسٹائزر لیچ کرسکتا ہے۔

• صفائی کے ایجنٹوں: کللا سالوینٹس میں آرگینک کا سراغ لگائیں۔

• ماحولیاتی ذرات: کھلی نمونوں پر لیب ایئر کی دھول اور VOCS ADSORB۔
  

  

حل

1. سخت صفائی SOP: تیزاب بھگتے ہوئے → الٹراسونک خالص - پانی کللا → نائٹروجن شیشے کے سامان کے لئے خشک ؛ پلاسٹک کے لئے سرشار ڈٹرجنٹ۔

2. پری - فلٹریشن: 10 منٹ کے لئے 3000rpm پر سینٹرفیوج یا حتمی 0.22µm فلٹریشن سے پہلے 5µm پریفیلٹر کا استعمال کریں۔

3. کنٹرول ماحول: ہوا سے پیدا ہونے والے آلودگی کو کم سے کم کرنے کے لئے لیمینر - فلو ہڈ میں پریپ انجام دیں۔
   
   

2. متضاد فلٹرز سے فلٹر کلگنگ

مسئلہ

• آٹوسامپلر پریشر کے الارم اور بار بار انجکشن کی تبدیلی۔

• بہاؤ کی شرح میں کمی ، متضاد چوٹی والے علاقوں۔

• بلند بیک پریسر اور کالم inlet رکاوٹ۔
  

  

وجہ

• جھلی کی مماثلت: نامیاتی سالوینٹس میں نایلان پھول جاتا ہے۔ PVDF بلند درجہ حرارت پر رینگتا ہے۔

• غلط تاکنا سائز: 0.22µm فلٹرز ٹھیک ذرات کو پھنساتے ہیں لیکن بہاؤ کو کم کرتے ہیں۔ 0.45µm فلٹرز اب بھی مائکرو کرسٹل کے ساتھ بند ہوسکتے ہیں۔

حل

1. جھلی - سالوینٹ میٹرکس: نامیاتی مراحل کے لئے ہائیڈرو فیلک پی ای ایس \ / ایم سی ای کا استعمال کریں (پی ایچ 4–8) ، ہائیڈروفوبک پی ٹی ایف ای \ / پی وی ڈی ایف۔ مضبوط تیزاب میں سیلولوز ایسیٹیٹ سے پرہیز کریں۔

2. مناسب تاکنا سائز منتخب کریں: معمول کے HPLC کے لئے 0.45µm ، UHPLC یا ٹریس ورک کے لئے 0.22µm استعمال کریں۔ 5µm کے ذریعے پریفیلٹر اعلی - ویسکوسیٹی نمونے۔

3. مانیٹر ΔP: ٹریک پریشر میں اضافہ ؛ جب بیکپریشر میں اضافہ ہوتا ہے تو فلٹر کو تبدیل کریں۔
   
   

   

3. سالوینٹ - میمبرن کیمیائی عدم مطابقت

مسئلہ

• فلٹر شدہ نمونہ ابر آلود ہوتا ہے یا ذرات لے جاتا ہے۔

• نیا بیس لائن شور یا ماضی کی چوٹیوں کے بعد - فلٹریشن۔

• کم تجزیہ کار بازیافت۔
  

  

وجہ

• سالوینٹ سوجن: THF PTFE میں پھولتا ہے ، تاکنا سائز اور بہاؤ میں ردوبدل کرتا ہے۔

• جھلی لیچ ایبلز: فارمک ایسڈ میں نایلان اولیگومرز کو جاری کرتا ہے جو 214nm پر جذب ہوتا ہے۔

حل

1. مطابقت کا امتحان: 25 ° C پر 24h کے لئے مطلوبہ سالوینٹ میں بھگنا فلٹر ؛ سوجن یا وزن میں تبدیلی کا معائنہ کریں۔

2. پائلٹ ایل سی - ایم ایس ٹیسٹ: فلٹر بمقابلہ غیر منقولہ نمونے کے کل آئن کرومیٹگرامس کا موازنہ کریں۔

3. کم لیچ فلٹرز کا استعمال کریں: الٹراسونک - بغیر چپکنے کے بغیر پی ٹی ایف ای یا پی ای ایس۔
   
   

کوالٹی سسٹم: دفاعی - نگرانی - اصلاح

دفاع

غلطیوں کو روکنے کے لئے صفائی ، فلٹریشن ، اور جھلی کے انتخاب کے لئے ایس او پیز کو معیاری بنائیں۔

نگرانی

بہاؤ کا پتہ لگانے کے لئے ریکارڈ بہاؤ کی شرح ، بیکپریسچر ، اور خالی - نمونہ بیس لائنوں کو ریکارڈ کریں۔

اصلاح

تیزی سے جڑ کی وجہ سے شناخت اور اصلاحی کارروائی کے لئے غلطی کے درخت کے تجزیے کو برقرار رکھیں۔

"تجزیاتی صحت سے متعلق سب سے چھوٹے ذرہ کو روکنے کے ساتھ شروع ہوتا ہے۔"