1. آپ کے HPLC کالم کی رکاوٹ نہیں ہے
2. آپ کے HPLC کالم کی اعلی حساسیت
3. اعلی درستگی
4. کم غلط مثبت چوٹیوں
5. کم پس منظر کا شور
6. کوئی لیچ ایبل نہیں
HPLC نمونہ کی تیاری کے لئے چار اقدامات
آئیے ہم آپ کو راضی کریں کہ آپ ہمارے حل کے ساتھ کس طرح وقت کی بچت کرسکتے ہیں اور اسی وقت آپ کے نتائج کی تولیدی صلاحیت میں اضافہ کرتے ہیں:
مرحلہ 1۔ پانی کے حل کا تجزیہ
پانی کا ناقص معیار HPLC رنز کے دوران مسائل میں سب سے بڑے تعاون کرنے والے عوامل میں سے ایک ہے۔ موبائل مرحلے میں پانی کی نجاست کالم کے ساتھ تعامل کرسکتی ہے اور اس کے نتیجے میں کرومیٹوگرام میں ناقص قرارداد اور حساسیت یا غیر متوقع چوٹیوں کا نتیجہ بن سکتا ہے ، جسے عام طور پر ماضی کی چوٹیوں کے طور پر جانا جاتا ہے۔ الٹرا پیور پانی کا استعمال نامیاتی کاربن ، مائکروجنزموں ، اینڈوٹوکسینز ، آر این اے ایس ای اور ڈی اینسز کے ساتھ آلودگی کے خطرے کو کافی حد تک کم کرتا ہے۔ الٹرا پیور واٹر خریداری کے لئے دستیاب ہے ، تاہم ، آپ کی لیبارٹری میں پانی صاف کرنے کے نظام کا استعمال اعلی معیار کے الٹراپر پانی کو یقینی بنانے کا آسان ترین طریقہ ہے۔ ٹائپ 1 ریجنٹ گریڈ کا پانی جو ASTM ، NCCLs ، ISO ، اور USP معیارات سے ملتا ہے HPLC ایپلی کیشنز کے لئے بہترین انتخاب ہے۔
مرحلہ 2. معیارات کی تیاری
کمپاؤنڈ شناخت اور مقدار کے ل standards معیارات تیار کرنا ایک تکلیف دہ اور وقت طلب عمل ہوسکتا ہے۔ درست طور پر کسی ٹھوس وزن کا وزن تاکہ سالوینٹس کی پہلے سے طے شدہ حجم کو استعمال کیا جاسکے ، اور غلطی کی وجہ سے فضلہ مہنگا پڑسکتا ہے - خاص طور پر جب دواسازی کے ساتھ کام کرتے ہو۔ درجہ حرارت جیسے دیگر عوامل معیاری تیاری کو مزید پیچیدہ بناتے ہیں۔ درجہ حرارت کے اتار چڑھاو سالوینٹ کثافت کو تبدیل کرتے ہیں اور حراستی میں ڈرامائی اختلافات میں معاون ہیں۔

ایک توازن کا استعمال کرنا جو وزن کی درستگی کو کئی اعشاریہ مقامات تک قابل بناتا ہے اور توازن کو سالوینٹ ڈسپنسر سے جوڑ کر عمل کو خودکار کرنے سے اعلی صحت سے متعلق ضمانت دیتا ہے۔ سافٹ ویئر کا استعمال جیسے YAPP16 DOSEN Q-APP خود کار طریقے سے حساب کتاب اور پیمائش شدہ اقدار کی کشش ثقل کی نگرانی کے قابل بناتا ہے۔ سالوینٹس کے درجہ حرارت اور کثافت کی دستاویز کرنا بھی انتہائی درست حراستی کو یقینی بناتا ہے ، خاص طور پر جب بعد کے دنوں میں معیارات کی تیاری کریں۔ تھرمو سائنسی ™ کروملون ™ 7.2 کرومیٹوگرافی ڈیٹا سسٹم (سی ڈی ایس) سافٹ ویئر میں تھرمو سائنسی ™ کروملون ™ 7.2 کرومیٹوگرافی ڈیٹا سسٹم (سی ڈی ایس) سافٹ ویئر میں براہ راست ڈیٹا کی منتقلی مکمل ڈیٹا کی سالمیت کے ساتھ پیپر لیس ڈیٹا ہینڈلنگ کے لئے ایک آپشن ہے۔
مرحلہ 3. اچھی پائپٹنگ کے ساتھ بنیادی باتوں پر واپس جائیں
درست اور عین مطابق پائپٹنگ کی اہمیت کو اکثر نظرانداز کیا جاتا ہے اور اس کی قدر کی جاتی ہے۔ صارف کی مہارت کی سطح اور تجربے میں HPLC جیسے حساس تجزیوں کے لئے اہم مضمرات ہوسکتے ہیں۔ صحیح پائپیٹ کا انتخاب انسانی غلطی اور ضائع ہونے والے سالوینٹس کے وابستہ اخراجات کو کم کرسکتا ہے۔

ایک حجم لاک کے ساتھ مکینیکل پائپٹس حادثاتی حجم کی تبدیلیوں کو روکنے کے لئے ایک آسان حل پیش کرتے ہیں ، جبکہ زیادہ نفیس الیکٹرانک پائپٹس مستقل طور پر عین مطابق مقدار کی فراہمی کے لئے صارف کی تغیر کو ختم کرتے ہیں۔ HPLC تجزیوں کے لئے غور کرنے کے لئے پائپٹ ٹپ بھی ایک اہم تفصیل ہے۔ مختلف ویسکوسیٹیز کے سالوینٹس کے ساتھ کام کرتے وقت کم برقرار رکھنے کے نکات بہترین ہیں ، کیونکہ وہ نمونہ کی بازیابی کو زیادہ سے زیادہ کرتے ہیں۔ پائپٹ ٹپ سے لیکچنگ کے نتیجے میں نمونہ کی آلودگی بھی ہوسکتی ہے۔ اس طرح ، اعلی کیمیائی مزاحمت کے ساتھ نکات نمونے کی سالمیت کو محفوظ رکھتے ہیں۔
مرحلہ 4. درستگی اور لمبی عمر کے لئے فلٹر
تجزیہ سے قبل نمونوں کو فلٹر کرنے کے ل additional اضافی نگہداشت کرنا وشوسنییتا کو بہتر بناتا ہے اور ایچ پی ایل سی کالم کی زندگی کو طولانی اثرات کو روکنے کے ذریعہ طول دے سکتا ہے۔ کالم کرومیٹوگرافی سے قبل نمونوں کو فلٹر کرنے کے لئے سرنج فلٹرز ایک آسان ، تیز حل ہیں۔ جیسا کہ پائپٹ ٹپس کی طرح ، ایچ پی ایل سی میں استعمال ہونے والے سالوینٹس کو لیچنگ اور نمونہ آلودگی کو روکنے کے لئے مخصوص فلٹرز کی ضرورت ہوتی ہے۔

سیلولوز جھلی ڈیمتھائل سلفوکسائڈ (ڈی ایم ایس او) ، امائڈس ، کیٹونز ، ایسٹر اور ایتھر مرکبات کے خلاف مزاحم ہیں۔ خاص طور پر سخت سالوینٹس کے ل un ، غیر کوٹڈ پولیٹیرسولفون (پی ٹی ایف او) جھلی لیچنگ اور نمونے کی آلودگی کو روکتی ہیں۔ نمونہ کی تعداد میں اضافہ ہونے پر نمونہ فلٹریشن بہت وقت طلب ہوجاتا ہے۔ کثیر نمونہ فلٹریشن یونٹ ، جیسے کلیرسٹپ® فلٹریشن سسٹم ، معیار کی قربانی کے بغیر سرنجوں اور فاسٹ ٹریک نمونے کی تیاری کے بغیر نمونے پر کارروائی کرسکتے ہیں۔
پانچ مسائل جن کی آپ کو توجہ دینے کی ضرورت ہے!
1. لیبز کو درپیش نمونہ پریپ کے سب سے بڑے مسائل کیا ہیں؟
لیبارٹریز وقت اور لاگت کے لحاظ سے بڑھتے ہوئے دباؤ میں ہیں ، اکثر نہ صرف بہت سارے نمونوں کے ساتھ بلکہ مختلف نوعیت کے نمونے بھی کرتے ہیں۔ نمونہ کی تیاری ایک ایسا علاقہ ہے جہاں نمونے کی اقسام یا نمونے کی تیاری کے طریقوں اور استعمال شدہ مواد کے مابین ٹھیک ٹھیک اختلافات حاصل کردہ نتائج کو متاثر کرسکتے ہیں۔ فلٹریشن ڈیوائس اور سالوینٹ میں موجود مواد کے مابین مطابقت کو یقینی بنانا معاملات کو کم سے کم کرسکتا ہے۔ مثال کے طور پر ، نکالنے کے قابل مرکبات کی سطح جو تجزیاتی پتہ لگانے میں مداخلت کرسکتی ہے۔

2. جب نمونہ پریپ غلط ہوجاتی ہے تو کیا ہوتا ہے؟
تجزیاتی اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی (HPLC) ایپلی کیشنز سے پہلے ، نمونے متعدد طریقوں کے ذریعہ تیار کیے جاتے ہیں ، ان سب میں نظام میں انجکشن والے نمونے کو متاثر کرکے تجزیاتی نتائج پر اثر انداز ہونے کی صلاحیت ہوتی ہے۔ غیر موثر نمونہ کی تیاری کالم کی زندگی میں کمی ، اجزاء کے لئے خدمات کی ضروریات میں اضافہ ، آلے کے ممکنہ کم وقت ، کرومیٹوگرافک علیحدگی کی کارکردگی اور تولیدی صلاحیت میں کمی اور بہت سے دیگر مسائل کا باعث بن سکتی ہے۔
3. پہلی نظر میں ، فلٹریشن ایک سادہ عمل کی طرح لگتا ہے ...
اگرچہ فلٹریشن کسی بڑے ورک فلو کا بظاہر چھوٹا سا حصہ ہے ، لیکن دیئے گئے درخواست کے لئے صحیح فلٹر کا انتخاب کرنے کا اثر کافی حد تک ہوسکتا ہے۔ مثال کے طور پر ، وہ طریقے جو کافی ذرہ مادے کو نہیں ہٹاتے ہیں اس کے نتیجے میں کالم مسدود ہوسکتا ہے۔ نمونہ کی تیاری کے آلات کا نامناسب انتخاب ، کچھ مخصوص حالات میں ، نمونے میں نکالنے کے قابل مرکبات کو جاری کرسکتا ہے ، دلچسپی کے تجزیہ کاروں کو پابند کرسکتا ہے یا نمونے کے نقصان کے ذریعہ غلطیوں کو متعارف کراتا ہے - مشاہدہ کردہ نتائج کی معیار اور تولیدی صلاحیت کو متاثر کرنے والے سبھی۔ اگر آپ کو یقین ہے کہ آپ کے فلٹریشن استعمال کی کوئی غلطیوں میں حصہ نہیں لے رہے ہیں جن کے لئے دوبارہ کام کرنے یا جڑ سے متعلق تحقیقات کی ضرورت ہوتی ہے تو ، آپ پیسہ بچائیں گے اور اپنے آپ کو ذہنی سکون دیں گے۔

4. نمونہ کی سب سے عام پریپ کیا ہے ‘ناکام‘؟
غلط فلٹر جھلی کا انتخاب ایک مسئلہ ہے جسے ہم بہت کچھ دیکھتے ہیں۔ مسائل ایکسٹریکٹ ایبلز سے خارجی چوٹیوں کے طور پر ظاہر ہوسکتے ہیں ، جو دلچسپی کے تجزیہ کاروں کا پتہ لگانے میں مداخلت کرسکتے ہیں۔ کیمیائی مزاحمت کے لحاظ سے نمونے یا سالوینٹ کے ساتھ فلٹر میڈیا کی عدم مطابقت مکمل طور پر فلٹر میڈیا پر تحلیل اثرات تک ہی محدود نہیں ہے۔ سالوینٹس پولیمرک جھلی کے مواد کی معمولی سوجن کا سبب بن سکتے ہیں جب مکمل طور پر مطابقت پذیر نہیں ہوتے ہیں ، جس کے نتیجے میں فلٹریشن کی کارکردگی کو متاثر کیا جاسکتا ہے ، جس کی وجہ سے نمونوں کی غیر موثر صفائی ہوسکتی ہے۔ اس مسئلے کو حل کرنے کا ایک طریقہ یہ ہے کہ ایک جھلی کا انتخاب کریں جو پانی اور نامیاتی سالوینٹس دونوں کے ساتھ وسیع پیمانے پر مطابقت رکھتا ہو۔ عام HPLC نمونے کی تیاری کے ل se ، سرنج اور سرنگ لیس فلٹرز جن میں دوبارہ پیدا ہونے والے سیلولوز جھلیوں پر مشتمل ہے ان کی وسیع سالوینٹ مطابقت کی وجہ سے ایک اچھا اختیار ہے۔
فلٹر ڈیوائس کا استعمال جو تیار کی جانے والی حجم کی ضرورت سے بڑا ہے ایک اور عام خطرہ ہے۔ بہت بڑے فلٹر ڈیوائسز کے استعمال کا مطلب یہ ہے کہ نمونے کی تھوڑی مقدار فلٹر میں ہی رہے گی ، یہاں تک کہ احتیاطی تدابیر زیادہ سے زیادہ نکالنے کے لئے بھی لیا جائے گا۔

5. فلٹریشن مرحلہ کو سنجیدگی سے لینے کے کیا فوائد ہیں؟
تجزیاتی جانچ میں مشغول بیشتر لیبارٹریوں کا ایک بنیادی مقصد مستقل عمل کو تیار کرنا ہے جو مستقل نتائج کی نشاندہی کرتے ہیں - اور اس کے لئے مستقل فلٹرنگ کی ضرورت ہوتی ہے۔ دائیں تاکنا سائز اور برقرار رکھنے کی خصوصیات کے ساتھ فلٹریشن ڈیوائس کا انتخاب موثر پارٹکیولیٹ ہٹانے کو یقینی بنانے میں مدد کرتا ہے ، جبکہ فلٹر یونٹ کے مناسب سائز اور ڈیزائن کا انتخاب نمونے کے نقصان کو کم سے کم کرنے میں مدد کرسکتا ہے۔ اچھا فلٹریشن کالم کی حفاظت میں بھی مدد کرتا ہے اور ممکنہ طور پر انجیکٹر اور کالم دونوں کی زندگی میں توسیع کرتا ہے۔
نتیجہ
ایچ پی ایل سی زندگی سائنس اور بائیوفرماسٹیکل ریسرچ کے لئے ایک قابل قدر تکنیک ہے کیونکہ یہ درست ، تولیدی نتائج فراہم کرتا ہے۔ یہ درستگی HPLC نمونے کی سالمیت پر منحصر ہے ، اور اعلی معیار کے نمونوں کو یقینی بنانے کا بہترین طریقہ بہترین ٹولز سے شروع کرنا ہے۔ الٹرا پیور واٹر ، معیاری تیاری ، پائپٹیٹس ، اشارے اور فلٹرز کے حل کے ساتھ ، HPLC نمونہ کی تیاری لائن ہر تفصیل کا حساب دیتی ہے۔ خودکار حل اور سافٹ ویئر صاف نتائج کے لئے صاف نمونے فراہم کرنے کے لئے نمونے کی تیاری کو ہموار کرنے میں بھی مدد کرتے ہیں۔
HPLC نمونہ تیاری کے حل کے بارے میں مزید گفتگو کا خیرمقدم کیا گیا ہے!