Zamonaviy analitik laboratoriyada xromatografiya oddiy protokoldan ancha ko'p; bu molekulyar o'zaro ta'sirlarning murakkab raqsi. Farmatsevtik aralashmalar miqdorini aniqlayapsizmi yoki iz darajasida atrof-muhitni ifloslantiruvchi moddalarni aniqlayapsizmi, ajralishning asosiy fizikasini tushunish texnikni usta xromatografdan ajratib turadigan narsadir.
Laboratoriyada muvaffaqiyat faqat yuqori darajadagi asboblar sozlamalaridan kelib chiqmaydi. U sizning usulingiz kimyosi va namunangizning yaxlitligini himoya qiluvchi yuqori sifatli sarf materiallari o'rtasidagi sinergiyada yashaydi. Murakkabliklar bo'ylab sayohat qilganlar uchun
HPLC va LC-MS: qaysi birini tanlash kerak
, yoki beqaror asosiy ko'rsatkichlar bilan kurashayotgan ushbu qo'llanma jahon miqyosidagi ma'lumotlarga erishish va asbobning ishlash vaqtini maksimal darajada oshirish uchun dastgoh sirlari bilan o'rtoqlashadi.
Gidrofobik qo'l siqishni tushunish: teskari fazali xromatografiya nima?
Asosiy savolga javob berish uchun - teskari fazali xromatografiya nima - darslik ta'rifidan tashqariga qarash kerak. Uning mohiyatida bu "suv qo'rquvi" (hidrofobiklik) ga asoslangan ajralishdir. Teskari fazali yuqori bosimli suyuqlik xromatografiyasida (RP-HPLC) biz molekulalarni hidrofobik xususiyati bo'yicha saralash uchun qutbsiz statsionar faza va qutbli mobil fazadan foydalanamiz.
C18 (oktadesil) zanjirining kimyosi
Eng keng tarqalgan statsionar faza C18 (oktadesil) zanjirlari bilan bog'langan silika asosidagi zarralarni o'z ichiga oladi. Mening tajribamga ko'ra, ushbu C18 zanjirlarining zichligi va silika tayanchining sifati sizning usulingizning mustahkamligini aniqlaydi. Ko'pgina tahlilchilar asosiy birikmalarni tahlil qilishda eng yuqori cho'qqiga duch kelishadi. Bu ko'pincha silika yuzasidagi qoldiq silanol guruhlari tomonidan istalmagan ion almashish joylari sifatida ishlaydi.
Buni hal qilish uchun biz uchi bilan qoplangan ustundan foydalanamiz, bu erda kichikroq silanlar bu faol saytlarni "maskalaydi". Biroq, hatto eng yaxshi ustun ham yomon in'ektsiyani tuzata olmaydi. Agar sizning xromatografik cho'qqingiz ustunga tegmasdan oldin buzilgan ko'rinsa, flakoningizni tekshiring. Yuqori tozalikdan foydalanish
Universal Fit bilan 9 mm qisqa ipli flakonlar
Analitingiz igna uni olishdan oldin flakon devorlariga singib ketmasligini ta'minlaydi.
HPLC usulini ishlab chiqishda organik modifikatorning san'ati
Analitlaringizni saqlash muddati organik modifikator HPLC konsentratsiyasi bilan boshqariladi. Asetonitril yoki metanolning suvli tamponga nisbatini sozlash orqali siz mobil fazaning "elutsiya kuchini" sozlaysiz.
Usulni o'tkazishda men ko'rgan keng tarqalgan xato - bu noto'g'ri tushunilgan gradient elutsiya egri chizig'i. Agar siz organik modifikatorni juda tez oshirsangiz, piksellar sonini yo'qotasiz; juda sekin, va siz cho'qqi kengayishi va isrof solventdan aziyat chekasiz. Orasiga o'tishda
Analitik va tayyorgarlik HPLC
, gradient nishabni boshqarish muvaffaqiyatli o'sishning asosiy omiliga aylanadi. Esingizda bo'lsin, asetonitril past yopishqoqlik va yuqori elutsiya quvvatini taklif qiladi, metanol esa ACN o'tkazib yuborishi mumkin bo'lgan qutbli birikmalar uchun turli xil selektivlikni ta'minlaydi.
GC elutsiya tartibini dekodlash: birikmalar ajralishini bashorat qilish
Gc elutsiya tartibini bashorat qilish gaz xromatografi uchun eng foydali vazifalardan biridir. Solvent kimyosi asosiy dastak bo'lgan HPLC dan farqli o'laroq, GCni ajratish "Ajratish uchligi" bilan belgilanadi: qaynash nuqtasi, molekulyar qutblilik va ustun harorati dasturlash.
Termodinamika va dipol o'zaro ta'siri
Polar bo'lmagan statsionar fazada gc elutsiya tartibi qaynash nuqtasiga qat'iy rioya qiladi. Ko'proq uchuvchi birikmalar birinchi bo'lib chiqadi. Biroq, PEG\/Wax kabi qutb ustunidan foydalanganda o'yin o'zgaradi. Men yaqinda qaynoq nuqtalari deyarli bir xil bo'lgan izomerlarni o'z ichiga olgan loyihani ko'rib chiqdim. Qutbli fazaga o'tish orqali dipol-dipol o'zaro ta'siri bizga bu birikmalarni o'lchamiga emas, balki elektron tuzilishiga qarab ajratishga imkon berdi.
Atrof-muhit izlarini tahlil qilish kabi yuqori sezgirlikdagi ishlar uchun namuna idishingizning yaxlitligi muhim ahamiyatga ega. Foydalanish
20 mm Crimp Top Headspace flakonlari
uchuvchan analizatorlarning yo'qolishini oldini oladi, bu sizning ommaviy spektral dekonvolyutsiyangiz sizib chiqqan fraktsiyaga emas, balki namunangizning haqiqiy ko'rinishiga asoslanganligini ta'minlaydi.
HPLC va LC-MS: sezgirlikni o'zgartirishda navigatsiya
Laboratoriyamizda tez-tez uchraydigan savol: "Biz qachon HPLC va LC-MS dan o'tishimiz kerak?" Javob sizning kerakli sezgirligingizda. UVni aniqlaydigan HPLC mikrogram darajasida muntazam QC uchun juda yaxshi bo'lsa-da, LC-MS pikogram darajasini aniqlash yoki murakkab matritsalarda noma'lumlarni aniqlash kerak bo'lganda talab qilinadi.
Agar siz LC-MS ga o'tayotgan bo'lsangiz, flakonlarni tanlash yanada muhimroq bo'ladi. Standart qopqoqlar sizning mobil fazangizga plastifikatorlarni singdirib, xromatogrammangizni ta'qib qiladigan "Arvoh cho'qqilari" ni yaratishi mumkin. Shuning uchun Aijiren
Bog'langan vintli qopqoqlar
MS tomonidan sertifikatlangan laboratoriyalarda asosiy hisoblanadi - ular septaning flakonga tushishi yoki ifloslantiruvchi moddalarni detektorga yuvish xavfini yo'q qiladi.
Mukammal xromatografik cho'qqining anatomiyasi
Har bir xromatografik cho'qqi diagnostika vositasidir. Keskin, nosimmetrik Gauss cho'qqisi sizning tizimingiz optimallashtirilganligini bildiradi. "Elka" yoki "quyruq" sizga biror narsa noto'g'ri ekanligini aytadi, ko'pincha apparat yoki o'lik hajm bilan bog'liq.
O'lik hajm va ustundan tashqari hajmni yo'q qilish
Rezolyutsiyaning jim qotillaridan biri o'lik hajmdir. Agar igna va flakonning pastki qismi o'rtasida bo'shliq bo'lsa, namuna tarqaladi. Mikro-namuna olish uchun men har doim konusli qo'shimchalardan foydalanishni maslahat beraman. Ushbu qo'shimchalar namunani tor, vertikal yo'lga majburlab, "o'tkir tiqin" in'ektsiyasini ta'minlaydi. Bu, ayniqsa, dispersiya dushman bo'lgan yuqori bosimli tizimlarda to'g'ridan-to'g'ri o'tkirroq cho'qqiga va yaxshi signal-shovqin nisbatlariga olib keladi.
Professional kabi muammolarni bartaraf etish: asosiy shovqindan Septa Coringgacha
Muammolarni bartaraf etish yillarim davomida men asboblar bilan bog'liq muammolarning 70 foizi aslida iste'mol qilinadigan muammolar ekanligini aniqladim.
-
Asosiy shovqin va arvoh cho'qqilari: Agar siz bo'lmasligi kerak bo'lgan cho'qqilarni ko'rsangiz, sizning filtrlaringiz aybdor bo'lishi mumkin. Har doim murojaat qiling
0,22 mikronli filtrlar bo'yicha to'liq qo'llanma
shprits filtrlarini tanlashdan oldin.
-
Septa Coring: Agar flakoningizda silikon bo'laklarini ko'rsangiz, sizning igna septani "o'z ichiga oladi". Bu sifatsiz qopqoqlar bilan sodir bo'ladi. Bizning ND11 qisish qopqoqlari va 10-425 vintli qopqoqlar parchalanmasdan bir nechta teshilishlarga bardosh berish uchun nozik ishlab chiqilgan.
-
Saqlashda barqarorlik: EPK usullari yoki uzoq muddatli saqlash uchun, foydalanish
24-400 EPA flakonlari
borosilikat oynasidan tayyorlanganligi nol hal qiluvchi yo'qotilishini va nol ifloslanishni ta'minlaydi.
Nima uchun ma'lumotlar yaxlitligi sarf materiallaridan boshlanadi
Biz tez-tez yuqori darajadagi tizimga 50 000 AQSh dollarini sarflaymiz, keyin flakonda tiyinlarni tejashga harakat qilamiz. Mening tajribamga ko'ra, subparatli flakon laboratoriyangizdagi eng qimmat narsadir, chunki u "qayta ishlash" va "muvaffaqiyatsiz tekshirishlar" ga olib keladi.
Sizga oddiy xromatografiya uchun 1ml qobiq flakonlari yoki avtomatlashtirilgan GC uchun 18 mm vintli boshli flakonlar kerak bo'ladimi, Aijiren mutaxassislar talab qiladigan mustahkamlikni ta'minlaydi. Biz sizning gc elutsiya tartibingiz kundan-kunga takrorlanishini va xromatografik cho'qqingiz usulni ishlab chiqqan kuningizdek aniq bo'lishini ta'minlaymiz.
Mutaxassislarni qo'llab-quvvatlash va so'rovlar: Siz nomuvofiq natijalarga duch kelyapsizmi yoki usullarni ishlab chiqish bilan kurashyapsizmi? Keling, birgalikda ish jarayonini optimallashtiraylik. Texnik maslahat uchun men bilan bog'laning:
Xulosa Teskari bosqich nima ekanligini o'zlashtirish va asbobingizning nuanslarini o'zlashtirish - bu doimiy o'rganish sayohatidir. To'g'ri organik modifikator HPLC va eng yaxshi sarf materiallarini tanlab, siz ma'lumotlaringiz haqiqatiga investitsiya qilasiz. Noto'g'ri flakon haftalab ishlab chiqishga sarflagan ajoyib usulingizni buzishiga yo'l qo'ymang.
Ingliz
Xitoy
