אין דער מאָדערן אַנאַליטיקאַל לאַבאָראַטאָריע, כראָמאַטאַגראַפי איז פיל מער ווי אַ רוטין פּראָטאָקאָל; עס איז אַ ינטראַקאַט טאַנצן פון מאָלעקולאַר ינטעראַקשאַנז. צי איר קוואַנטאַפייז פאַרמאַסוטיקאַל ימפּיוראַטיז אָדער דיטעקטינג ינווייראַנמענאַל פּאַלוטאַנץ אין שפּור לעוועלס, די פונדאַמענטאַל פיזיק פון דיין צעשיידונג איז וואָס דיסטינגגווישיז אַ טעכניקער פון אַ בעל טשראָמאַטאָגראַפער.
הצלחה אין די לאַב איז ניט נאָר פֿון הויך-סוף קיילע סעטטינגס. עס לעבט אין די סינערדזשי צווישן דיין מעטאָד כעמיע און די הויך-קוואַליטעט קאָנסומאַבלעס וואָס באַשיצן דיין מוסטער אָרנטלעכקייַט. פֿאַר יענע וואָס נאַוויגירן די קאַמפּלעקסיטיז פון
HPLC ווס LC-MS: וואָס צו קלייַבן
, אָדער סטראַגאַלינג מיט אַנסטייבאַל בייסליינז, דעם פירער שאַרעס די באַנק-זייַט סיקריץ צו דערגרייכן וועלט-קלאַס דאַטן און מאַקסאַמייזינג די ופּטימע פון די ינסטרומענט.
פֿאַרשטיין די הידראָפאָביק האַנדשאַקע: וואָס איז פאַרקערט פאַסע טשראָמאַטאָגראַפי?
צו ענטפֿערן די פונדאַמענטאַל קשיא - וואָס איז פאַרקערט פאַסע קראָומאַטאַגראַפי - איינער מוזן קוקן ווייַטער פון די לערנבוך דעפֿיניציע. אין זיין האַרץ, עס איז אַ צעשיידונג באזירט אויף די "מורא פון וואַסער" (הידראָפאָביסיטי). אין פאַרקערט פאַסע הויך דרוק פליסיק קראָומאַטאַגראַפי (RP-HPLC), מיר נוצן אַ ניט-פּאָליאַר סטיישאַנערי פאַסע און אַ פּאָליאַר רירעוודיק פאַסע צו סאָרט מאַלאַקיולז לויט זייער כיידראָופאָביק כאַראַקטער.
די כעמיע פון די C18 (אָקטאַדייל) קייט
די מערסט פּראָסט סטיישאַנערי פאַסע ינוואַלווז סיליקאַ-באזירט פּאַרטיקאַלז באַנדיד מיט C18 (אָקטאַדייל) קייטן. פֿון מיין דערפאַרונג, די געדיכטקייַט פון די C18 קייטן און די קוואַליטעט פון די סיליקאַ שטיצן באַשטימען די גראָבקייט פון דיין אופֿן. פילע אַנאַליס טרעפן שפּיץ טיילינג ווען אַנאַלייזינג יקערדיק קאַמפּאַונדז. דאָס איז אָפט געפֿירט דורך ריזידזשואַל סילאַנאָל גרופּעס אויף די סיליקאַ ייבערפלאַך אַקטינג ווי אַנוואָנטיד יאָן וועקסל זייטלעך.
צו סאָלווע דעם, מיר נוצן אַ סוף-קאַפּט זייַל, ווו קלענערער סילאַנעס "מאַסקע" די אַקטיוו זייטלעך. אָבער, אפילו דער בעסטער זייַל קענען נישט פאַרריכטן אַ נעבעך ינדזשעקשאַן. אויב דיין טשראָמאַטאָגראַפיק שפּיץ קוקט פאַרקרימט איידער עס אפילו שלאָגן די זייַל, טשעק דיין וויאַל. ניצן הויך-ריינקייַט
9 מם קורץ פאָדעם ווייאַלז מיט וניווערסאַל פּאַסיק
ינשורז אַז דיין אַנאַליט איז נישט אַדסאָרב צו די וויאַל ווענט איידער די נאָדל אפילו פּיקס עס אַרויף.
די קונסט פון די אָרגאַניק מאָדיפיער אין HPLC מעטאַד אַנטוויקלונג
די ריטענשאַן צייט פון דיין אַנאַליטעס איז גאַווערנד דורך די אָרגאַניק מאָדיפיער HPLC קאַנסאַנטריישאַן. דורך אַדזשאַסטינג די פאַרהעלטעניש פון אַסעטאָניטרילע אָדער מעטאַנאָל צו דיין ייקוויאַס באַפער, איר סטרויערן די "ילושאַן שטאַרקייַט" פון די רירעוודיק פאַסע.
א פּראָסט גרוב איך זען אין אופֿן אַריבערפירן איז אַ מיסאַנדערסטוד גראַדיענט ילושאַן ויסבייג. אויב איר ראַמפּ דיין אָרגאַניק מאָדיפיער צו געשווינד, איר פאַרלירן האַכלאָטע; אויך סלאָולי, און איר ליידן פון שפּיץ בראָדאַנינג און ווייסטאַד סאַלוואַנט. ווען שיפטינג צווישן
אַנאַליטיש ווס פּרעפּאַראַטיוו HPLC
, אָנפירונג די גראַדיענט שיפּוע ווערט דער ערשטיק פאַקטאָר אין מצליח וואָג-אַרויף. געדענקט, אַסעטאָניטרילע אָפפערס נידעריק וויסקאָסיטי און הויך ילושאַן שטאַרקייַט, בשעת מעטאַנאָל קענען צושטעלן פאַרשידענע סעלעקטיוויטי פֿאַר פּאָליאַר קאַמפּאַונדז וואָס ACN קען פאַרפירן.
דעסיפערינג ג.ק. עלוטיאָן סדר: פּרידיקטינג קאַמפּאַונד צעשיידונג
פּרידיקטינג גק ילושאַן סדר איז איינער פון די מערסט ריוואָרדינג טשאַלאַנדזשיז פֿאַר אַ גאַז טשראָמאַטאָגראַפער. ניט ענלעך HPLC, ווו סאַלוואַנט כעמיע איז די ערשטיק הייבער, גק צעשיידונג איז דיקטייטיד דורך די "טריניטי פון סעפּאַראַטיאָן": בוילינג פונט, מאָלעקולאַר פּאָולעראַטי און זייַל טעמפּעראַטור פּראָגראַממינג.
טהערמאָדינאַמיקס ווס דיפּאָלע ינטעראַקטיאָנס
אין אַ ניט-פּאָולער סטיישאַנערי פאַסע, די גק ילושאַן סדר שטרענג גייט די בוילינג פונט. די מער וואַלאַטאַל קאַמפּאַונדז אַרויסגאַנג ערשטער. אָבער, די שפּיל ענדערונגען ווען איר נוצן אַ פּאָליאַר זייַל ווי PEG \/ וואַקס. איך לעצטנס כאַנדאַלד אַ פּרויעקט מיט יסאָמערז ווו די בוילינג פונקטן זענען כּמעט יידעניקאַל. דורך באַשטימען צו אַ פּאָליאַר פאַסע, די דיפּאָלע-דיפּאָלע ינטעראַקשאַנז ערלויבט אונדז צו באַזונדער די קאַמפּאַונדז באזירט אויף זייער עלעקטראָניש סטרוקטור אלא ווי זייער גרייס.
פֿאַר הויך-סענסיטיוויטי אַרבעט ווי ינווייראַנמענאַל שפּור אַנאַליסיס, די אָרנטלעכקייַט פון דיין מוסטער קאַנטיינער איז העכסט וויכטיק. ניצן
20 מם קרימפּ שפּיץ העאַדספּאַסע ווייאַלז
פּריווענץ די אָנווער פון וואַלאַטאַל אַנאַליטעס, ינשורינג אַז דיין מאַסע ספּעקטראַל דיקאַנוואַלושאַן איז באזירט אויף אַ אמת פאַרטרעטונג פון דיין מוסטער, נישט אַ ליקט בראָכצאָל.
HPLC ווס LC-MS: נאַוויגאַציע פון די סענסיטיוויטי שיפט
א אָפט קשיא אין אונדזער לאַבאָראַטאָריע איז: "ווען זאָל מיר מאַך פון HPLC ווס LC-MS?" דער ענטפער ליגט אין דיין פארלאנגט סענסיטיוויטי. כאָטש HPLC מיט ווו דיטעקשאַן איז ויסגעצייכנט פֿאַר רוטין QC ביי מיקראָגראַם לעוועלס, LC-MS איז פארלאנגט ווען איר דאַרפֿן צו דעטעקט פּיקאָגראַם לעוועלס אָדער ידענטיפיצירן אומבאַקאַנט אין קאָמפּלעקס מאַטריץ.
אויב איר מאַך צו LC-MS, דיין ברירה פון ווייאַלז ווערט אפילו מער קריטיש. סטאַנדאַרט קאַפּס קענען ויסשליסן פּלאַסטיסיזערס אין דיין רירעוודיק פאַסע, קריייטינג "גהאָסט פּיקס" וואָס כאָנט דיין קראָומאַטאַגראַם. דאָס איז וואָס Aijiren ס
באָנדעד שרויף קאַפּס
זענען אַ העפטן אין MS-סערטאַפייד לאַבאָראַטאָריעס - זיי עלימינירן די ריזיקירן פון די סעפּטאַ פאַלינג אין די וויאַל אָדער ליטשינג קאַנטאַמאַנאַנץ אין די דיטעקטער.
די אַנאַטאָמי פון אַ פּערפעקט טשראָמאַטאָגראַפיק שפּיץ
יעדער טשראָמאַטאָגראַפיק שפּיץ איז אַ דיאַגנאָסטיק געצייַג. א שאַרף, סאַמעטריקאַל גאַוסיאַן שפּיץ דערציילט איר אַז דיין סיסטעם איז אָפּטימיזעד. א "אַקסל" אָדער "עק" דערציילט איר אַז עפּעס איז פאַלש, אָפט שייַכות צו ייַזנוואַרג אָדער טויט באַנד.
ילימאַנייטינג דעד באנד און עקסטרע-קאָלאַם באנד
איינער פון די שטיל קיללערס פון האַכלאָטע איז טויט באַנד. אויב עס איז קיין ריס צווישן דיין נאָדל און די דנאָ פון די וויאַל, די מוסטער דיספּערז. פֿאַר מיקראָ מוסטערונג, איך שטענדיק רעקאָמענדירן קאַניקאַל ינסערץ. די ינסערץ צווינגען די מוסטער אין אַ שמאָל, ווערטיקאַל דרך, ינשורינג אַ "שאַרף צאַפּן" ינדזשעקשאַן. דאָס גלייך רעזולטאטן אין אַ שאַרפּער שפּיץ און בעסער סיגנאַל-צו-ראַש ריישיאָוז, ספּעציעל אין הויך-דרוק סיסטעמען ווו דיספּערסיאָן איז די פייַנט.
טראָובלעשאָאָטינג ווי אַ פּראָ: פֿון באַסעלינע ראַש צו סעפּטאַ קאָרינג
אין מיין יאָרן פון טראָובלעשאָאָטינג, איך געפֿונען אַז 70% פון ינסטרומענט ישוז זענען פאקטיש קאַנסומאַבאַל ישוז.
-
באַסעלינע ראַש & גהאָסט פּיקס: אויב איר זען פּיקס ווו עס זאָל זיין גאָרניט, דיין פילטערס קען זיין די קולפּריט. שטענדיק אָפּשיקן צו
די גאַנץ גייד צו 0.22 מייקראַן פילטערס
איידער טשוזינג דיין שפּריץ פילטערס.
-
סעפּטאַ קאָרינג: אויב איר זען ביטן פון סיליקאָנע אין דיין וויאַל, דיין נאָדל איז "קאָרינג" די סעפּטאַ. דאָס כאַפּאַנז מיט נידעריק-קוואַליטעט קאַפּס. אונדזער ND11 קרימפּ קאַפּס און 10-425 שרויף קאַפּס זענען פּינטלעכקייַט ענדזשאַנירד צו וויטסטאַנד קייפל פּאַנגקטשערז אָן פראַגמאַנטיישאַן.
-
סטאַביליטי אין סטאָרידזש: פֿאַר עפּאַ מעטהאָדס אָדער לאַנג-טערמין סטאָרידזש, ניצן
24-400 עפּאַ ווייאַלז
געמאכט פון באָראָסיליקאַטע גלאז ינשורז נול סאַלוואַנט אָנווער און נול קאַנטאַמאַניישאַן.
פארוואס דאַטאַ אָרנטלעכקייַט סטאַרץ מיט די קאָנסומאַבלע
מיר אָפט פאַרברענגען 50,000 וסד אויף אַ הויך-סוף סיסטעם, און פּרובירן צו שפּאָרן פּעניז אויף די וויאַל. אין מיין דערפאַרונג, אַ סאַב-פּאַר וויאַל איז די מערסט טייַער זאַך אין דיין לאַב ווייַל עס פירט צו "שייַעך-לויפט" און "ניט אַנדערש וואַלאַדיישאַנז."
צי איר דאַרפֿן 1 מל שעל ווייאַלז פֿאַר פּשוט קראָומאַטאַגראַפי אָדער 18 מם שרויף פאָדעם העאַדספּאַסע ווייאַלז פֿאַר אָטאַמייטיד גק, Aijiren גיט די קאָנסיסטענסי אַז עקספּערץ דאַרפן. מיר ענשור אַז דיין גק ילושאַן סדר איז רעפּראָדוסיבלע טאָג נאָך טאָג, און דיין טשראָמאַטאָגראַפיק שפּיץ סטייז ווי שאַרף ווי דער טאָג איר דעוועלאָפּעד דעם אופֿן.
עקספּערט סופּפּאָרט & ינקוויריעס: זענט איר פייסינג סתירה רעזולטאַטן אָדער סטראַגאַלינג מיט מעטאָד אַנטוויקלונג? זאל ס אַפּטאַמייז דיין וואָרקפלאָוו צוזאַמען. קאָנטאַקט מיר פֿאַר אַ טעכניש באַראַטונג:
מסקנא מאַסטערינג וואָס איז פאַרקערט פאַסע און מאַסטערינג די נואַנסיז פון דיין קיילע איז אַ נסיעה פון קעסיידערדיק לערנען. דורך טשוזינג די רעכט אָרגאַניק מאָדיפיער HPLC און בעסטער-אין-קלאַס קאָנסומאַבלעס, איר ינוועסטירן אין די אמת פון דיין דאַטן. דו זאלסט נישט לאָזן אַ סאַב-פּאַר וויאַל צעשטערן אַ בריליאַנט אופֿן איר פארבראכט וואָכן צו אַנטוויקלען.
ענגליש
כינעזיש
