Ni awọn igbalode analitikali yàrá, kiromatography jẹ jina siwaju sii ju a baraku Ilana; o jẹ ijó intricate ti awọn ibaraẹnisọrọ molikula. Boya o n ṣe iwọn awọn idoti elegbogi tabi wiwa awọn idoti ayika ni awọn ipele itọpa, agbọye fisiksi ipilẹ ti ipinya rẹ jẹ ohun ti o ṣe iyatọ oni-ẹrọ kan lati ọdọ oluwa chromatographer.
Aṣeyọri ninu laabu ko kan wa lati awọn eto irinse giga-giga. O ngbe ni amuṣiṣẹpọ laarin kemistri ọna rẹ ati awọn ohun elo ti o ni agbara giga ti o daabobo iduroṣinṣin ayẹwo rẹ. Fun awon ti lilọ kiri awọn complexities ti
HPLC vs LC-MS: Ewo ni lati yan
, tabi tiraka pẹlu awọn ipilẹ ti ko duro, itọsọna yii pin awọn aṣiri-ẹgbẹ ibujoko lati ṣaṣeyọri data-kilasi agbaye ati mimu akoko ohun elo pọ si.
Loye Ifọwọwọ Hydrophobic: Kini Kiromatografi Alakoso Yiyipada?
Lati dahun ibeere ipilẹ-kini yiyipada chromatography alakoso-ọkan gbọdọ wo ni ikọja itumọ iwe-ẹkọ. Ni ipilẹ rẹ, o jẹ iyapa ti o da lori "iberu omi" (hydrophobicity). Ni yiyipada ipele giga titẹ omi kiromatogirafi (RP-HPLC), a lo ipo iduro ti kii-pola ati ipele alagbeka pola kan lati to awọn ohun elo nipasẹ ihuwasi hydrophobic wọn.
Kemistri ti C18 (Octadecyl) Pq
Ipele iduro ti o wọpọ julọ jẹ awọn patikulu ti o da lori siliki ti o ni asopọ pẹlu awọn ẹwọn C18 (octadecyl). Lati iriri mi, iwuwo ti awọn ẹwọn C18 wọnyi ati didara atilẹyin silica pinnu ruggedness ọna rẹ. Ọpọlọpọ awọn atunnkanwo ni alabapade tailing tente nigba ti n ṣatupalẹ awọn agbo ogun ipilẹ. Eyi nigbagbogbo nfa nipasẹ awọn ẹgbẹ silanol ti o ku lori dada silica ti n ṣiṣẹ bi awọn aaye paṣipaarọ ion aifẹ.
Lati yanju eyi, a lo ọwọn ti o ni ipari, nibiti awọn silanes ti o kere ju “boju” awọn aaye ti nṣiṣe lọwọ wọnyi. Sibẹsibẹ, paapaa ọwọn ti o dara julọ ko le ṣatunṣe abẹrẹ ti ko dara. Ti tente oke chromatographic rẹ ba daru ṣaaju paapaa ti o de ọwọn, ṣayẹwo vial rẹ. Lilo giga-mimọ
9mm Kukuru O tẹle lẹgbẹrun pẹlu Universal Fit
ṣe idaniloju pe atupale rẹ ko ni adsorb si awọn odi vial ṣaaju ki abẹrẹ paapaa gbe e soke.
Aworan ti Oniyipada Organic ni Idagbasoke Ọna HPLC
Akoko idaduro ti awọn atunnkanka rẹ jẹ iṣakoso nipasẹ ifọkansi HPLC modifier Organic. Nipa ṣiṣatunṣe ipin ti Acetonitrile tabi Methanol si ifipamọ olomi rẹ, o tune “agbara giga” ti ipele alagbeka.
Ọfin ti o wọpọ ti Mo rii ni gbigbe ọna jẹ ṣiṣafihan gigadient ti ko loye. Ti o ba rampu Organic modifier rẹ yarayara, o padanu ipinnu; ju laiyara, ati awọn ti o jiya lati tente broadening ati sofo epo. Nigbati o ba yipada laarin
Analitikali vs igbaradi HPLC
, Ṣiṣakoṣo awọn ite gradient di ifosiwewe akọkọ ni iwọn-soke aṣeyọri. Ranti, Acetonitrile nfunni ni viscosity kekere ati agbara elution giga, lakoko ti Methanol le pese yiyan yiyan fun awọn agbo ogun pola ti ACN le padanu.
Ipilẹṣẹ Ilana Elution GC: Iṣapejuwe Iyapa Agbopọ
Asọtẹlẹ aṣẹ elution gc jẹ ọkan ninu awọn italaya ti o ni ere julọ fun chromatographer gaasi. Ko dabi HPLC, nibiti kemistri olomi ti jẹ lefa akọkọ, Iyapa GC jẹ ilana nipasẹ “Mẹtalọkan ti Iyapa”: aaye farabale, polarity molikula, ati siseto iwọn otutu ọwọn.
Thermodynamics vs Dipole Interactions
Ni ipele idaduro ti kii-pola, aṣẹ elution gc ni muna tẹle aaye farabale. Awọn akojọpọ iyipada diẹ sii jade ni akọkọ. Sibẹsibẹ, ere naa yipada nigbati o ba lo ọwọn pola bi PEG\/Wax. Laipẹ Mo ṣe itọju iṣẹ akanṣe kan ti o kan awọn isomers nibiti awọn aaye farabale ti fẹrẹ jọra. Nipa yiyi pada si alakoso pola, awọn ibaraẹnisọrọ dipole-dipole gba wa laaye lati ya awọn agbo ogun wọnyi da lori eto itanna wọn ju iwọn wọn lọ.
Fun iṣẹ ifamọ giga bi itupalẹ itọpa ayika, iduroṣinṣin ti apoti ayẹwo rẹ jẹ pataki julọ. Lilo
20mm Crimp Top Headspace Vials
ṣe idilọwọ isonu ti awọn atunnkanka iyipada, ni idaniloju pe iwọn-iwoye iwoye titobi rẹ da lori aṣoju otitọ ti ayẹwo rẹ, kii ṣe ida ti o jo.
HPLC vs LC-MS: Lilọ kiri ni yi lọ yi bọ ifamọ
Ibeere loorekoore ninu laabu wa ni: "Nigbawo ni o yẹ ki a gbe lati HPLC vs LC-MS?" Idahun si wa ninu ifamọ ti o nilo. Lakoko ti HPLC pẹlu wiwa UV jẹ o tayọ fun QC igbagbogbo ni awọn ipele microgram, LC-MS nilo nigbati o nilo lati ṣe awari awọn ipele picogram tabi ṣe idanimọ awọn aimọ ni awọn matrices eka.
Ti o ba n lọ si LC-MS, yiyan ti awọn lẹgbẹrun di paapaa pataki. Awọn fila boṣewa le sọ awọn ṣiṣu ṣiṣu sinu ipele alagbeka rẹ, ṣiṣẹda “Awọn oke Ẹmi” ti o lepa chromatogram rẹ. Eyi ni idi ti Aijiren
Idede dabaru fila
jẹ ohun pataki ni awọn ile-iṣẹ ti a fọwọsi MS-wọn yọkuro ewu ti septa ti o ṣubu sinu vial tabi fifa awọn contaminants sinu aṣawari.
Anatomi ti Peak Chromatographic Pipe
Gbogbo tente oke chromatographic jẹ ohun elo iwadii kan. Oke Gaussian ti o ni didasilẹ, ti o ni isunmọ sọ fun ọ pe eto rẹ jẹ iṣapeye. A "ejika" tabi "iru" sọ fun ọ pe nkan kan jẹ aṣiṣe, nigbagbogbo ni ibatan si hardware tabi iwọn didun ti o ku.
Imukuro Iwọn didun ti o ku ati Iwọn-iwe-iwe-iwe
Ọkan ninu awọn apaniyan ipalọlọ ti ipinnu jẹ iwọn didun ti o ku. Ti aafo eyikeyi ba wa laarin abẹrẹ rẹ ati isalẹ ti vial, ayẹwo naa tuka. Fun iṣapẹẹrẹ bulọọgi, Mo ṣeduro nigbagbogbo lilo Awọn ifibọ Conical. Awọn ifibọ wọnyi fi ipa mu ayẹwo sinu ọna dín, ọna inaro, ni idaniloju abẹrẹ "plug didasilẹ". Eyi taara ni abajade ti o ga julọ ati awọn ipin ifihan-si-ariwo to dara julọ, ni pataki ni awọn eto titẹ-giga nibiti pipinka jẹ ọta.
Laasigbotitusita Bii Pro: Lati Ariwo Baseline si Septa Coring
Ni awọn ọdun mi ti laasigbotitusita, Mo ti rii pe 70% ti awọn ọran ohun elo jẹ awọn ọran agbara gangan.
-
Ariwo Ipilẹ & Awọn Gaga Ẹmi: Ti o ba rii awọn oke giga nibiti ko yẹ ki o wa, awọn asẹ rẹ le jẹ ẹlẹbi. Nigbagbogbo tọka si
Itọsọna pipe si 0.22 Micron Ajọ
ṣaaju yiyan awọn asẹ syringe rẹ.
-
Septa Coring: Ti o ba ri awọn ege ti silikoni ninu vial rẹ, abẹrẹ rẹ jẹ "coring" septa. Eyi ṣẹlẹ pẹlu awọn fila ti ko dara. Awọn caps Crimp ND11 wa ati 10-425 Screw Caps jẹ iṣẹ-ṣiṣe ti konge lati koju ọpọlọpọ awọn punctures laisi pipin.
-
Iduroṣinṣin ni Ibi ipamọ: Fun awọn ọna EPA tabi ibi ipamọ igba pipẹ, lilo
24-400 EPA lẹgbẹrun
ti a ṣe ti gilasi borosilicate ṣe idaniloju pipadanu iyọdafẹ odo ati idoti odo.
Kini idi ti iduroṣinṣin data bẹrẹ pẹlu ohun elo
Nigbagbogbo a nlo 50,000 USD lori eto giga-giga, lẹhinna gbiyanju lati ṣafipamọ awọn pennies lori vial. Ninu iriri mi, vial sub-par jẹ ohun ti o gbowolori julọ ninu laabu rẹ nitori pe o yori si “tun-ṣiṣẹ” ati “awọn afọwọsi ti kuna.”
Boya o nilo 1ml Shell Vials fun chromatography ti o rọrun tabi 18mm Screw Thread Headspace Vials fun GC adaṣe, Aijiren n pese aitasera ti awọn amoye beere. A rii daju pe aṣẹ elution gc rẹ jẹ atunṣe lojoojumọ, ati pe tente oke chromatographic rẹ duro bi didasilẹ bi ọjọ ti o ṣe agbekalẹ ọna naa.
Atilẹyin Amoye & Awọn ibeere: Ṣe o n dojukọ awọn abajade aisedede tabi tiraka pẹlu idagbasoke ọna? Jẹ ki a mu iṣẹ ṣiṣe ṣiṣẹ pọ. Kan si mi fun ijumọsọrọ imọ-ẹrọ:
Ipari Titunto si ohun ti o jẹ alakoso yiyipada ati ṣiṣakoso awọn nuances ti ohun elo rẹ jẹ irin-ajo ti ẹkọ lilọsiwaju. Nipa yiyan HPLC oniyipada Organic ti o tọ ati awọn ohun elo ti o dara julọ ni kilasi, o n ṣe idoko-owo ni otitọ ti data rẹ. Maṣe jẹ ki vial iha-ipin ba ọna ti o wuyi ti o lo awọn ọsẹ ni idagbasoke.
English
Kannada
