Hoëprestasie vloeistofchromatografie (HPLC) is 'n belangrike analitiese tegniek wat in laboratoriums gebruik word in velde so uiteenlopend soos farmaseutiese produkte, omgewingswetenskappe en voedselveiligheid. Binne die HPLC -wêreld is daar twee hoofkategorieë: analitiese HPLC en voorbereidende HPLC. Alhoewel albei tegnieke soortgelyke beginsels gebruik om verbindings te skei, word dit vir verskillende doeleindes gebruik en het hulle verskillende bedryfsparameters. Hierdie blog ondersoek die verskille tussen analitiese en voorbereidende HPLC, insluitend die doel, werkingskaal, toerusting en toepassings.
Wil u volledige inligting oor HPLC -flessies weet, kyk na hierdie artikel: Encyclopedia van HPLC -flessies
Begrip van analitiese HPLC
Definisie en doel
Analitiese HPLC fokus hoofsaaklik op die skeiding en identifisering van verbindings in 'n monster. Die primêre doel is om kwalitatiewe en kwantitatiewe inligting oor die komponente in 'n mengsel te bekom. Analitiese HPLC word gereeld gebruik vir:
Kwalitatiewe analise: die identifisering van die komponente van 'n steekproef.
Kwantitatiewe analise: Bepaling van die konsentrasie van 'n spesifieke verbinding in 'n monster.
Skaal van werking
Analitiese HPLC werk op 'n kleiner skaal, wat tipies mikroliter -monsterinspuitings behels. Die volumes wat gebruik word, is gewoonlik in die 1 tot 100 µl -reeks, waardeur verskeie monsters in 'n enkele lopie geanaliseer kan word. Hierdie klein skaal is ideaal vir roetine -toetsing en kwaliteitskontrole.
Kolomgrootte en deeltjiegrootte
Die kolomme wat in analitiese HPLC gebruik word, is gewoonlik klein in deursnee, gewoonlik ongeveer 4,6 mm, en is verpak met klein stilstaande fase-deeltjies (3-5 μm). Hierdie konfigurasie maak voorsiening vir hoë resolusie en doeltreffende verbindingskeiding, geskik vir gedetailleerde ontleding.
Opsporingsmetodes
Analitiese HPLC gebruik 'n verskeidenheid opsporingsmetodes, insluitend UV-sigbare, fluoressensie en massaspektrometrie. Die keuse van detektor hang af van die aard van die analiet en die spesifieke vereistes van die ontleding. Nie-vernietigende detektore word dikwels gebruik om te verseker dat die monster sonder 'n beduidende verlies ontleed kan word.
Wil u 50 antwoorde oor HPLC -flessies weet, kyk gerus na hierdie artikel: 50 vrae wat gereeld gevra word oor HPLC -flessies
Begrip van voorbereidende HPLC
Definisie en doel
Voorbereidende HPLC, daarenteen, is daarop gemik om spesifieke verbindings van 'n mengsel te skei en te suiwer. Die hoofdoel is om voldoende hoeveelhede van die teikenverbinding te isoleer vir verdere ontleding of gebruik. Voorbereidend
HPLC word gereeld vir die volgende toepassings gebruik:
Saamgestelde isolasie: Onttrekking en suiwering van spesifieke verbindings vir navorsing of industriële toepassings.
Voorbereiding: Voorbereiding van monsters vir daaropvolgende analise of formulering.
Skaal van bedrywighede
Voorbereidende HPLC word op groter skaal uitgevoer as analitiese HPLC. Monstervolumes kan wissel van 'n paar milliliter tot 'n paar liter, afhangende van die verwagte opbrengs van die teikenverbinding. Met hierdie groter skaal kan voldoende hoeveelhede gesuiwerde materiaal versamel word vir verdere gebruik.
Kolomgrootte en deeltjiegrootte
Die kolomme wat gebruik word vir voorbereidende HPLC is aansienlik groter, en wissel gewoonlik van 20 mm tot 100 mm of groter in deursnee. Die kolomme is verpak met groter stilstaande fase-deeltjies (gewoonlik 10-20 μm) om die vloeitempo te verhoog en groter monstervolumes te akkommodeer. Hierdie ontwerp help om rugdruk te verminder en doeltreffende skeiding van verbindings te bewerkstellig.
Opsporingsmetodes
In voorbereidende HPLC kan opsporingsmetodes verskil van dié wat in analitiese HPLC gebruik word. Alhoewel nie-vernietigende detektore nog gereeld voorkom, gebruik voorbereidende stelsels dikwels detektors wat breuke kan versamel op grond van 'n elueringsprofiel. Hiermee kan spesifieke verbindings geïsoleer word terwyl dit uit die kolom elute.
Wil u meer weet oor die toepassing van chromatografie -flessies, kyk na hierdie artikel:Vyf skoonmaakmetodes vir HPLC -flessies
Belangrike verskille tussen analitiese en voorbereidende HPLC
|
Kenmerk
|
Analitiese HPLC
|
Bereidende HPLC
|
|
Doel
|
Kwalitatiewe en kwantitatiewe analise
|
Isolasie en suiwering van verbindings
|
|
Skaal van werking
|
Kleinskaalse (µl volumes)
|
Grootskaal (ML tot L volumes)
|
|
Kolomafmetings
|
Kleiner deursnee (4,6 mm)
|
Groter deursnee (20-100 mm)
|
|
Deeltjiegrootte
|
Kleiner deeltjies (3-5 μm)
|
Groter deeltjies (10-20 μm)
|
|
Vloeitempo
|
Laer vloeitempo (0,1-5 ml \ / min)
|
Hoër vloeitempo (10-200 ml \ / min)
|
|
Opsporingsmetodes
|
Nie-vernietigende detektors (UV, MS)
|
Breukversameling gebaseer op die elueringsprofiel
|
Kies tussen analitiese en voorbereidende HPLC
Oorweeg die volgende faktore wanneer u tussen analitiese en voorbereidende HPLC kies:
Doel van analise: Bepaal of die primêre doel is om verbindings kwalitatief en kwantitatief te ontleed of om spesifieke verbindings vir verdere gebruik te isoleer.
Monster: Evalueer die hoeveelheid wat beskikbaar is. As 'n klein hoeveelheid monster beskikbaar is, kan analitiese HPLC meer geskik wees. Omgekeerd, as 'n groot hoeveelheid monster benodig word, is voorbereidende HPLC 'n beter keuse.
Vereiste suiwerheid en opbrengs: Oorweeg die vereiste suiwerheid en opbrengs van die teikenverbinding. Voorbereidende HPLC het ten doel om die herstel van 'n spesifieke verbinding te maksimeer, terwyl analitiese HPLC fokus op die verskaffing van gedetailleerde inligting oor die samestelling van die monster.
Hulpbronne en toerusting: evalueer beskikbare hulpbronne, insluitend toerusting en begroting. Voorbereidende HPLC -stelsels is geneig om duurder te wees en benodig meer belegging in toerusting en bedryfskoste.
Stel u belang om HPLC -voorbeeldvoorbereiding te bemeester? Kyk na hierdie artikel:HPLC -monstervoorbereidingsoplossings vir die beste resultate.
Konklusie
Beide analitiese en voorbereidende HPLC is waardevolle tegnieke op die gebied van chromatografie, en elkeen het verskillende gebruike, afhangende van die behoeftes van navorsers en nywerhede. Terwyl analitiese HPLC ideaal is vir gedetailleerde ontleding en kwantifisering van verbindings, is voorbereidende HPLC noodsaaklik vir die isolering en suiwering van spesifieke verbindings vir verdere toepassings. As u die verskille tussen hierdie twee tegnieke verstaan, sal navorsers help om ingeligte besluite te neem, hul werkvloei te optimaliseer en akkurate en betroubare resultate in hul ontledings te verkry. Namate HPLC -tegnologie aanhou vorder, sal beide analitiese en voorbereidingsmetodes 'n integrale deel van suksesvolle wetenskaplike navorsing van alle soorte bly.
Engels
Chinees
