Weet u van papierchromatografie?

Papierchromatografie is 'n wyd gebruikte analitiese tegniek wat mengsels van stowwe skei en identifiseer op grond van hul verskillende affiniteite vir 'n stilstaande fase (papier) en 'n mobiele fase (oplosmiddel). Dit is veral nuttig in chemie en biochemie vir die ontleding van klein hoeveelhede stowwe soos pigmente, aminosure en ander organiese verbindings.

Wat is papierchromatografie?

Papierchromatografie is 'n tipe vloeistofchromatografie waarin die stilstaande fase 'n vel filterpapier is en die mobiele fase die oplosmiddel is wat deur die filterpapier vloei. Die tegniek maak staat op die differensiële verdeling van verbindings tussen die stilstaande fase (filterpapier) en die mobiele fase (oplosmiddel). Terwyl die oplosmiddel die filterpapier deur kapillêre werking opskuif, dra dit die komponente van die mengsel teen verskillende tariewe op grond van hul affiniteit vir die twee fases.

Die basiese beginsels agter papierchromatografie kan deur twee hoofkonsepte verstaan ​​word: partisiechromatografie en adsorpsiechromatografie.

Partisiechromatografie: In hierdie tipe word stowwe tussen twee vloeibare fases versprei. Die stilstaande fase bestaan ​​uit water in die porieë van die filterpapier, terwyl die mobiele fase die oplosmiddel is wat deur hierdie porieë beweeg. Die skeiding vind plaas omdat verskillende verbindings verskillende affiniteite vir die stilstaande en mobiele fases het.

Adsorpsiechromatografie: Hier dien die soliede oppervlak van die papier as die stilstaande fase en die vloeibare oplosmiddel dien as die mobiele fase. Die komponente in die mengsel word geskei op grond van hul adsorpsie op die soliede oppervlak en hul oplosbaarheid in die vloeistoffase.

Komponente

Stasionêre fase: chromatografiese papier, gewoonlik van sellulose. Dit bied 'n oppervlak vir die komponente om aan te hou.

Mobiele fase: Die oplosmiddel of mengsel van oplosmiddels wat op die papier beweeg deur kapillêre aksie. Die keuse van oplosmiddel kan die skeidingsproses aansienlik beïnvloed.

Monster: Die mengsel wat geanaliseer moet word, word gewoonlik by 'n aangewese beginpunt op die papier gesien.

Wil u meer weet oor HPLC -voorbeeldvoorbereiding, kyk gerus na hierdie artikel: HPLC -monstervoorbereidingsoplossings vir die beste resultate

Papierchromatografieproses

Voorbereiding: Kies 'n filterpapier van hoë gehalte met 'n sekere poreusheid om effektiewe skeiding te verseker. Wend 'n klein gedeelte van die monstermengsel aan op die basislyn van die chromatografie -papier.

Voorbereiding van die monster: los die monstermengsel op in 'n toepaslike oplosmiddel as deel van die mobiele fase.

Spotting: Gebruik 'n kapillêre of mikropipet om 'n klein hoeveelheid van die monsteroplossing op die basislyn op die filterpapier te laat val.

Ontwikkeling: dompel die onderste rand van die toetspapier in die ontwikkelende oplosmiddel (mobiele fase). Namate kapillêre werking plaasvind, styg die oplosmiddel deur die toetspapier en dra die monsterkomponente daarmee.

Skeiding: Terwyl die oplosmiddel beweeg, sal verskillende komponente van die monster teen verskillende tariewe beweeg as gevolg van hul interaksie met die stilstaande fase en verskillende oplosbaarheid in die mobiele fase.

Visualisering: Nadat die oplosmiddelfront 'n voldoende afstand beweeg het, word die papier van die oplosmiddel verwyder en na droog gelaat. Die komponente kan gevisualiseer word met behulp van UV -lig, chemiese reagense, of deur kleurveranderings waar te neem.

Analise: Die afstand wat deur elke komponent relatief tot die oplosmiddelfront afgelê word, word gemeet om die RF -waarde (retensiefaktor) vir identifikasie te bereken.

Toepassings van papierchromatografie

Papierchromatografie het 'n wye verskeidenheid toepassings in verskillende velde:

Biochemie: analise van aminosure, suikers en ander biomolekules.

Farmaseutiese produkte: identifikasie van aktiewe bestanddele en onsuiwerhede in geneesmiddelformulasies. Word gebruik om aktiewe verbindings en onsuiwerhede in geneesmiddelformulasies tydens ontwikkeling en gehaltebeheer te identifiseer.

Omgewingswetenskap: papierchromatografie word gebruik om kontaminante in watermonsters op te spoor en om kontaminante in grondekstrakte te ontleed.

Voedselbedryf: Die tegniek help met die ontleding van bymiddels, kontaminante en kleurmiddels in voedsel om te verseker dat die veiligheidsregulasies nakom.

Voordele van papierchromatografie

Koste -effektiwiteit: dit benodig minimale toerusting en materiale in vergelyking met ander chromatografiese tegnieke soos HPLC (vloeistofchromatografie met 'n hoë werkverrigting). Eenvoud: die proses is baie eenvoudig en kan uitgevoer word met basiese laboratoriuminstrumente, sodat dit vir opvoedkundige doeleindes gebruik kan word.

Lae monstervolume -vereiste: slegs 'n klein hoeveelheid monster is nodig vir ontleding, wat dit ideaal maak vir kosbare of beperkte monsters.

Veelsydigheid: dit kan 'n wye verskeidenheid stowwe skei op grond van chemiese eienskappe, insluitend polêre en nie-polêre verbindings

Beperkings van papierchromatografie

Ondanks die voordele daarvan, het papierchromatografie enkele beperkings:

Beperkte kapasiteit: Oor die algemeen geskik vir klein monstervolumes.

Resolusie: Die resolusie is moontlik nie so hoog soos wat verkry word deur meer gevorderde tegnieke soos HPLC of gaschromatografie (GC) nie.

Tydrowend: As gevolg van die stadiger migrasietempo, kan die proses langer duur in vergelyking met ander chromatografiese metodes.

Beperkte kwantitatiewe analise: Alhoewel kwalitatiewe resultate maklik verkry kan word, kan addisionele kalibrasiemetodes nodig wees om konsentrasies te kwantifiseer.

Papierchromatografie bly 'n waardevolle tegniek om mengsels in 'n verskeidenheid wetenskaplike velde te skei en te ontleed. Die eenvoud, koste-effektiwiteit en die vermoë om intuïtiewe resultate te lewer, maak dit 'n noodsaaklike hulpmiddel vir chemici en navorsers. Ondanks sy beperkings in vergelyking met meer gevorderde chromatografiese tegnieke, word dit steeds wyd gebruik vir opvoedkundige doeleindes en voorlopige analise in laboratoriums.

Wil u 50 antwoorde oor HPLC -flessies weet, kyk gerus na hierdie artikel: 50 vrae wat gereeld gevra word oor HPLC -flessies