Yüksək performanslı maye xromatoqrafiya (HPLC), əczaçılıq, ekoloji elmlər və qida təhlükəsizliyi kimi müxtəlif sahələrdə laboratoriyalarda istifadə olunan əsas analitik texnikadır. HPLC World daxilində iki əsas kateqoriya var: analitik hplc və hazırlıq hplc. Hər iki üsul oxşar prinsiplərdən birləşmələrin ayrılması üçün istifadə olunur, fərqli məqsədlər üçün istifadə olunur və fərqli əməliyyat parametrlərinə malikdirlər. Bu blog, analitik və hazırlıq HPLC arasındakı fərqləri, o cümlədən onların məqsədi, avadanlıq və tətbiqetmələri, tətbiqetmələri arasındakı fərqləri araşdıracaqdır.
Hplc flakonları haqqında tam məlumatı bilmək istəyirsinizsə, bu məqaləni yoxlayın: Hplc flakonlarının ensiklopediyası
Analitik hplc anlamaq
Tərif və məqsəd
Analitik HPLC, ilk növbədə bir nümunədə birləşmələrin ayrılması və müəyyənləşdirilməsinə yönəlmişdir. Əsas məqsəd bir qarışıqda mövcud olan komponentlər haqqında keyfiyyət və kəmiyyət məlumatı əldə etməkdir. Analitik HPLC tez-tez istifadə olunur:
Keyfiyyətin təhlili: Bir nümunənin komponentlərini müəyyənləşdirmək.
Kəmiyyət təhlili: Bir nümunədə müəyyən bir birləşmənin konsentrasiyasını müəyyənləşdirmək.
Əməliyyat miqyası
Analitik HPLC, adətən mikroliter nümunə enjeksiyonları ilə əlaqəli daha kiçik miqyasda işləyir. İstifadə olunan həcmlər ümumiyyətlə birdən çox nümunənin bir qaçışda təhlil edilməsinə imkan verən 1-dən 100-ə qədər mkl çeşidindədir. Bu kiçik miqyas müntəzəm test və keyfiyyətə nəzarət üçün idealdır.
Sütun ölçüsü və hissəcik ölçüsü
Analitik HPLC-də istifadə olunan sütunlar ümumiyyətlə diametri, adətən 4.6 mm-də kiçikdir və kiçik stasionar faza hissəcikləri (3-5 mkm) ilə doludur. Bu konfiqurasiya, ətraflı təhlil üçün uyğun yüksək qətnamə və səmərəli mürəkkəb ayrılmasına imkan verir.
Aşkarlama metodları
Analitik HPLC, UV-görünən, flüoresan və kütləvi spektrometriya da daxil olmaqla müxtəlif aşkar metodları istifadə edir. Detektorun seçimi analitiyanın xarakterindən və analizin xüsusi tələblərindən asılıdır. Dağıdıcı olmayan detektorlar, nümunənin əhəmiyyətli bir zərər olmadan təhlil oluna biləcəyini təmin etmək üçün tez-tez istifadə olunur.
Hplc flakonları haqqında 50 cavab bilmək istəyirsinizsə, bu məqaləni yoxlayın: HPLC flakonlarında ən çox ən çox soruşulan suallar
Hazırlıq hplc anlamaq
Tərif və məqsəd
Hazırlıq HPLC, digər tərəfdən, bir qarışıqdan konkret birləşmələri ayırmağı və təmizləməyi hədəfləyir. Əsas məqsəd, daha da təhlil və ya istifadə üçün hədəf birləşmənin kifayət qədər miqdarını təcrid etməkdir. Hazırlıq
HPLC, ümumiyyətlə aşağıdakı tətbiqlər üçün istifadə olunur:
Mürəkkəb izolyasiya: tədqiqat və ya sənaye tətbiqləri üçün xüsusi birləşmələrin çıxarılması və təmizlənməsi.
Nümunə hazırlığı: sonrakı təhlil və ya formalaşdırma üçün nümunələrin hazırlanması.
Əməliyyatların miqyası
Hazırlıq HPLC analitik HPLC-dən daha böyük miqyasda həyata keçirilir. Nümunə həcmləri, hədəf birləşmənin gözlənilən məhsuldarlığından asılı olaraq bir neçə mililitrdən bir neçə litrə qədər dəyişə bilər. Bu daha böyük miqyasda daha da istifadə üçün kifayət qədər təmizlənmiş materialın toplanmasına imkan verir.
Sütun ölçüsü və hissəcik ölçüsü
Hazırlıq HPLC üçün istifadə olunan sütunlar, adətən 20 mm-dən 100 mm və ya diametri qədər daha böyükdür. Sütunlar axın sürətini artırmaq və daha böyük nümunə həcmlərini təmin etmək üçün daha böyük stasionar faza hissəcikləri (adətən 10-20 mkm) ilə doludur. Bu dizayn geri təzyiqin azaldılmasına və birləşmələrin səmərəli ayrılmasına kömək edir.
Aşkarlama metodları
Hazırlıq Hplc-də, aşkarlama üsulları analitik hplc-də istifadə olunanlardan fərqlənə bilər. Dağıdıcı olmayan detektorlar hələ də ortaq olduqları halda, hazırlıq sistemləri tez-tez bir ellik profilinə əsaslanaraq fraksiyalar toplaya bilən detektorlardan istifadə edirlər. Bu, konkret birləşmələrin sütundan yuyulduqca təcrid olunmasına imkan verir.
Xromatoqrafiya flakonlarının tətbiqi haqqında daha çox bilmək istəyirsinizsə, xahiş edirəm bu məqaləni yoxlayın:HPLC flakonları üçün beş təmizlik üsulu
Analitik və hazırlıq hplc arasındakı əsas fərqlər
|
Xüsusiyyət
|
Analitik hplc
|
Hazırlıq hplc
|
|
Mastika
|
Keyfiyyətli və kəmiyyət təhlili
|
Birləşmələrin izolyasiyası və təmizlənməsi
|
|
Əməliyyat miqyası
|
Kiçik miqyaslı (μl həcmləri)
|
Geniş miqyaslı (ml-dən etibarən)
|
|
Sütun ölçüləri
|
Kiçik diametr (4.6 mm)
|
Daha böyük diametr (20-100 mm)
|
|
Hissəcik ölçüsü
|
Kiçik hissəciklər (3-5 mkm)
|
Daha böyük hissəciklər (10-20 mkm)
|
|
Axın qiymətləri
|
Aşağı axın dərəcələri (0,1-5 ml \ / Min)
|
Daha yüksək axın dərəcələri (10-200 ml \ / Min)
|
|
Aşkarlama metodları
|
Dağıdıcı olmayan detektorlar (UB, MS)
|
Etibarlı profilinə əsaslanan fraksiya kolleksiyası
|
Analitik və hazırlıq HPLC arasında seçim
Analitik və hazırlıq HPLC arasında seçim edərkən aşağıdakı amilləri nəzərdən keçirin:
Təhlilin məqsədi: əsas hədəfin birləşmələri keyfiyyətcə və kəmiyyətcə təhlil etmək və ya sonrakı istifadə üçün xüsusi birləşmələri təcrid etmək üçün olub olmadığını müəyyənləşdirin.
Nümunə miqdarı: mövcud nümunənin miqdarını qiymətləndirin. Kiçik bir miqdarda nümunə varsa, analitik hplc daha uyğun ola bilər. Əksinə, çox miqdarda nümunə tələb olunarsa, hazırlıq hplc daha yaxşı bir seçimdir.
Tələb olunan saflıq və məhsuldarlıq: Hədəf birləşməsinin tələb olunan saflığı və məhsuldarlığını nəzərdən keçirin. Hazırlıq HPLC, analitik hplc, nümunənin tərkibi haqqında ətraflı məlumat verməyə yönəlmiş, müəyyən bir birləşmənin bərpasını maksimum dərəcədə artırmağı hədəfləyir.
Resurslar və avadanlıqlar: Avadanlıq və büdcə də daxil olmaqla mövcud mənbələri qiymətləndirin. Hazırlıq HPLC sistemləri daha bahalı olmağa və avadanlıq və əməliyyat xərclərinə daha çox investisiya tələb edir.
HPLC nümunə hazırlığını mənimsəməkdə maraqlısınız? Bu məqaləyə baxın:Ən yaxşı nəticələr üçün hplc nümunə hazırlıq həlləri.
Rəy
Həm analitik, həm də hazırlıq hplc xromatoqrafiya sahəsində dəyərli texnikadır və hər birinin tədqiqatçıların və sənayenin ehtiyaclarından asılı olaraq fərqli istifadəsi var. Analitik HPLC birləşmələrin ətraflı təhlili və miqdarı üçün idealdır, hazırlanan HPLC sonrakı tətbiqlər üçün xüsusi birləşmələri təcrid etmək və təmizləmək üçün vacibdir. Bu iki üsul arasındakı fərqləri dərk etmək tədqiqatçılara məlumatlı qərarlar qəbul etməyə, iş axınlarını optimallaşdırmağa və təhlillərində dəqiq və etibarlı nəticələr əldə etməyə kömək edəcəkdir. HPLC texnologiyası irəliləməyə davam etdikcə, həm analitik, həm də hazırlıq üsulları hər növ uğurlu elmi tədqiqatların ayrılmaz hissəsi olaraq qalacaqdır.
İngilisləşdirmək
Çin
