Víte o papírové chromatografii?

Papírová chromatografie je široce používaná analytická technika, která odděluje a identifikuje směsi látek založených na jejich různých afinitách pro stacionární fázi (papír) a mobilní fázi (rozpouštědlo). Je to zvláště užitečné v chemii a biochemii pro analýzu malých množství látek, jako jsou pigmenty, aminokyseliny a další organické sloučeniny.

Co je papírová chromatografie?

Papírová chromatografie je typ kapalné chromatografie, ve které je stacionární fáze listem filtračního papíru a mobilní fáze je rozpouštědlo, které protéká filtračním papírem. Tato technika se spoléhá na diferenciální rozdělení sloučenin mezi stacionární fází (filtrační papír) a mobilní fází (rozpouštědlo). Když se rozpouštědlo pohybuje do filtračního papíru kapilárním působením, nese komponenty směsi různými rychlostmi na základě jejich afinity k oběma fázi.

Základní principy papírové chromatografie lze pochopit prostřednictvím dvou hlavních konceptů: rozdělovací chromatografie a adsorpční chromatografie.

Rozdíl chromatografie: V tomto typu jsou látky rozděleny mezi dvě kapalné fáze. Stacionární fáze se skládá z vody v pórech filtračního papíru, zatímco mobilní fáze je rozpouštědlo, které se pohybuje těmito póry. K separaci dochází, protože různé sloučeniny mají různé afinity pro stacionární a mobilní fáze.

Adsorpční chromatografie: Zde je pevný povrch papíru působí jako stacionární fáze a kapalné rozpouštědlo jako mobilní fáze. Složky ve směsi jsou separovány na základě jejich adsorpce na pevný povrch a jejich rozpustnost v kapalné fázi.

Komponenty

Stacionární fáze: Chromatografický papír, obvykle vyrobený z celulózy. Poskytuje povrch pro komponenty.

Mobilní fáze: Rozpouštědlo nebo směs rozpouštědel, která se pohybuje na papíře kapilárním působením. Výběr rozpouštědla může významně ovlivnit proces separace.

Vzorek: Směs, která má být analyzována, obvykle spatřená v určeném výchozím bodě na papíře.

Chcete se dozvědět více o přípravě vzorku HPLC, zkontrolujte tento článek: Řešení přípravy vzorku HPLC pro nejlepší výsledky

Proces papírové chromatografie

Příprava: Vyberte vysoce kvalitní filtrační papír s určitou pórovitou, abyste zajistili efektivní oddělení. Naneste malou část směsi vzorku na základní linii chromatografického papíru.

Příprava vzorku: Rozpusťte směs vzorku ve vhodném rozpouštědle v rámci mobilní fáze.

Spotting: Pomocí kapiláry nebo mikropipety vypustí malé množství roztoku vzorku na základní linii na filtračním papíru.

Vývoj: Ponořte spodní okraj zkušebního papíru do vyvíjejícího se rozpouštědla (mobilní fáze). Když dochází k kapilárnímu účinku, rozpouštědlo stoupá zkušebním papírem a nesou složky vzorku s sebou.

Separace: Jak se rozpouštědlo pohybuje, různé komponenty vzorku se budou pohybovat různými rychlostmi v důsledku jejich interakce se stacionární fází a odlišnou rozpustnost v mobilní fázi.

Vizualizace: Poté, co se přední část rozpouštědla posunula dostatečnou vzdáleností, je papír odstraněn z rozpouštědla a odešlou k suchu. Komponenty lze vizualizovat pomocí UV světla, chemických činidel nebo pozorováním změn barev.

Analýza: Pro identifikaci se měří vzdálenost ujetá každou složkou vzhledem k přední části rozpouštědla pro výpočet hodnoty RF (retenční faktor).

Aplikace papírové chromatografie

Papírová chromatografie má širokou škálu aplikací v různých oborech:

Biochemie: Analýza aminokyselin, cukrů a dalších biomolekul.

Farmanice: Identifikace aktivních složek a nečistot v lékových formulacích. Používá se k identifikaci aktivních sloučenin a nečistot při formulacích léků během vývoje a kontroly kvality.

Environmentální věda: Papírová chromatografie se používá k detekci kontaminantů ve vzorcích vody a analýze kontaminantů v půdních extraktech.

Potravinářský průmysl: Technika pomáhá při analýze aditiv, kontaminantů a barevných látek v potravinách, aby byla zajištěna dodržování bezpečnostních předpisů.

Výhody papírové chromatografie

Efektivita nákladů: Vyžaduje minimální vybavení a materiály ve srovnání s jinými chromatografickými technikami, jako je HPLC (vysoce výkonná kapalinová chromatografie). Jednoduchost: Proces je velmi jednoduchý a lze jej provádět se základními laboratorními nástroji, takže jej lze použít pro vzdělávací účely.

Požadavek na objemu nízkého vzorku: Pro analýzu je nutné pouze malé množství vzorku, což je ideální pro vzácné nebo omezené vzorky.

Všestrannost: Může oddělit širokou škálu látek založených na chemických vlastnostech, včetně polárních a nepolárních sloučenin

Omezení papírové chromatografie

Přes své výhody má papírová chromatografie určitá omezení:

Omezená kapacita: Obecně vhodná pro malé objemy vzorku.

Rozlišení: Rozlišení nemusí být tak vysoké, jak bylo dosaženo pokročilejšími technikami, jako je HPLC nebo plynová chromatografie (GC).

Časově náročná: V důsledku pomalejší míry migrace může proces ve srovnání s jinými chromatografickými metodami trvat déle.

Omezená kvantitativní analýza: Zatímco kvalitativní výsledky lze snadno získat, pro kvantifikaci koncentrací mohou být vyžadovány další kalibrační metody.

Papírová chromatografie zůstává cennou technikou pro oddělení a analýzu směsí v různých vědeckých oborech. Díky jeho jednoduchosti, nákladové efektivitě a schopnosti poskytovat intuitivní výsledky z něj činí základní nástroj pro chemiky a výzkumné pracovníky. Navzdory svým omezením ve srovnání s pokročilejšími chromatografickými technikami se stále široce používá pro vzdělávací účely a předběžnou analýzu v laboratořích.

Chcete vědět 50 odpovědí na lahvičky HPLC, zkontrolujte tento článek: 50 nejčastěji kladených otázek na lahvičky HPLC