کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) یک روش تحلیلی به طور گسترده ای برای جداسازی ، شناسایی و تعیین کمیت اجزای موجود در یک مخلوط است. از بین ردیاب های مختلف موجود برای HPLC ، آشکارسازهای UV-VIS (UV-VIS) به دلیل سهولت در استفاده ، حساسیت بالا و توانایی تجزیه و تحلیل طیف گسترده ای از ترکیبات رایج ترین هستند. در این مقاله به بررسی انواع مختلف ردیاب های UV-Vis ، نحوه کار آنها ، مزایای آنها و ملاحظات برای انتخاب آنها می پردازیم.

انواع ردیاب های UV-vis

1. ردیاب های قابل تنظیم UV-vis

ردیاب های قابل تنظیم اجازه می دهند اندازه گیری ها در یک یا چند طول موج خاص انجام شود. آنها به طور معمول به طول موج مشترک مانند 254 نانومتر برای ترکیبات آلی تنظیم می شوند. این آشکارسازها برای برنامه هایی که آنالیت های خاص را هدف قرار می دهند مفید هستند.

2. ردیاب های آرایه آرایه (PDA)

آشکارسازهای PDA می توانند طیف ها را در طول موج های مختلف به طور همزمان اندازه گیری کنند ، که می تواند حساسیت و سرعت را در تجزیه و تحلیل هایی که به طول موج های متعدد نیاز دارند ، بهبود بخشد. این ویژگی امکان شناسایی بهتر و کمیت ترکیبات را بر اساس طیف جذب منحصر به فرد آنها فراهم می کند.

3. ردیاب آرایه دیود (پدر)

مشابه PDA ها ، DADS طیف کامل را در طیف وسیعی از طول موج در زمان واقعی ضبط می کند. این ویژگی به ویژه برای مخلوط های پیچیده که در آن ترکیبات متعدد ممکن است در همان زمان قرار بگیرند ، مفید است. پدر می تواند اطلاعات بیشتری در مورد خلوص اوج ارائه دهد و به شناسایی مواد ناشناخته بر اساس پروفایل های طیفی آنها کمک کند.

اصول عملیاتی

ردیاب های UV-Vis با عبور از اشعه ماوراء بنفش و نور مرئی از طریق نمونه در سلول جریان کار می کنند. با اندازه گیری میزان نور جذب شده توسط نمونه در طول موج های مختلف ، غلظت و هویت آنالیت های موجود را می توان درک کرد.

اجزای کلیدی:

منبع نور: به طور معمول از لامپ دوتریوم برای تشخیص اشعه ماوراء بنفش (400-400 نانومتر) استفاده می شود و ممکن است شامل یک لامپ تنگستن برای تشخیص قابل مشاهده (400-800 نانومتر) باشد. برخی از سیستم های پیشرفته از لامپ های زنون برای پوشش هر دو محدوده برای افزایش کارایی استفاده می کنند.

سلول جریان: طراحی و ظرفیت سلول جریان برای حساسیت بسیار مهم است. سلولهای جریان کوچکتر می توانند محدودیت های تشخیص را بهبود بخشند اما ممکن است اثرات گسترش باند را معرفی کنند.

سیستم ردیاب: ردیاب تغییرات در شدت نور را به یک سیگنال الکتریکی متناسب با غلظت آنالیت در نمونه تبدیل می کند.

می خواهید در مورد تهیه نمونه HPLC اطلاعات بیشتری کسب کنید ، لطفاً این مقاله را بررسی کنید:راه حل های آماده سازی نمونه HPLC برای بهترین نتیجه

مزایای ردیاب های UV-vis

حساسیت: آشکارسازهای UV-Vis می توانند به طور دقیق تغییرات در جذب را اندازه گیری کنند و بنابراین می توانند غلظت کم آنالیت ها را تشخیص دهند.

تطبیق پذیری: آنها می توانند در صنایع مختلفی از جمله داروسازی ، مواد غذایی و نوشیدنی ، آزمایش محیط زیست و بیوشیمی استفاده شوند.

تجزیه و تحلیل غیر مخرب: این فرایند نمونه را تغییر نمی دهد یا از بین نمی برد ، بنابراین تجزیه و تحلیل بیشتر در صورت نیاز می تواند انجام شود.

دامنه گسترده: توانایی تجزیه و تحلیل طیف گسترده ای از ترکیبات با کروموفورها (گروه های جذب کننده نور) ، مناسب برای انواع برنامه ها.

ملاحظات هنگام انتخاب یک ردیاب UV-Vis

1 محدوده طول موج

انتخاب انواع مختلف منابع نوری (دوتریوم ، تنگستن و زنون) بر دامنه طول موج تأثیر می گذارد که می تواند برای تشخیص استفاده شود. برای تجزیه و تحلیل جامع ، به ویژه تجزیه و تحلیل مخلوط های پیچیده ، دامنه طول موج گسترده تر ترجیح داده می شود.

2. نوع ردیاب

انتخاب بین یک ردیاب قابل تنظیم و PDA \ / DAD به نیازهای تحلیلی خاص بستگی دارد:

ردیاب قابل تنظیم: بهترین برای تجزیه و تحلیل هدف که در آن طول موج خاص شناخته شده است.

PDA \ / DAD: مناسب برای نمونه های پیچیده که نیاز به تجزیه و تحلیل همزمان چند موج دارند.

3. طراحی سلول جریان

طراحی بر حساسیت و وضوح تأثیر می گذارد:

یک سلول جریان حجم کوچکتر حساسیت را بهبود می بخشد اما ممکن است منجر به پراکندگی شود.

طول مسیر نیز مهم است. طول مسیر طولانی تر اندازه گیری های جذب را بهبود می بخشد اما پویایی جریان را پیچیده می کند.

4. ایزه استفاده و ادغام

سازگاری با سیستم های HPLC موجود و یک رابط کاربر پسند می تواند به طور قابل توجهی بر کارآیی آزمایشگاهی تأثیر بگذارد.

برنامه های آشکارسازهای UV-Vis

ردیاب های UV-Vis در زمینه های مختلف ضروری هستند:

داروسازی: برای کنترل کیفیت و تجزیه و تحلیل ماده فعال استفاده می شود.

آزمایش محیطی: نظارت بر آلاینده ها در نمونه های آب.

صنایع غذایی: تجزیه و تحلیل مواد افزودنی و آلاینده ها.

بیوتکنولوژی: ارزیابی غلظت پروتئین در فرآیندهای بیولوژیکی.

می خواهید در مورد کاربردهای ویال های کروماتوگرافی اطلاعات بیشتری کسب کنید ، لطفاً این مقاله را بررسی کنید:15 کاربرد ویال کروماتوگرافی در زمینه های مختلف

انتخاب بهترین آشکارساز HPLC برای تجزیه و تحلیل UV-Vis نیاز به درک نیازهای خاص برنامه ، از جمله نیازهای حساسیت ، دامنه طول موج و ویژگی های نمونه دارد. در حالی که ردیاب های قابل تنظیم سنتی برای تجزیه و تحلیل های ساده مناسب هستند ، آشکارسازهای PDA و DAD از نظر پیچیدگی و تطبیق پذیری مزایای قابل توجهی را ارائه می دهند و آنها را برای کارهای تحلیلی چالش برانگیز تر مناسب می کند.

قبلی:

ویال های بازیابی بالا برای تجزیه و تحلیل HPLC و GC: 5 امتیاز

بعدی:

همه چیز برای دانستن در مورد فیلتر کاغذ