¿Sabes sobre a cromatografía en papel?

A cromatografía en papel é unha técnica analítica moi utilizada que separa e identifica mesturas de substancias baseadas nas súas diferentes afinidades para unha fase estacionaria (papel) e unha fase móbil (disolvente). É particularmente útil en química e bioquímica para analizar pequenas cantidades de substancias como pigmentos, aminoácidos e outros compostos orgánicos.

Que é a cromatografía en papel?

A cromatografía de papel é un tipo de cromatografía líquida na que a fase estacionaria é unha folla de papel de filtro e a fase móbil é o disolvente que flúe a través do papel de filtro. A técnica depende da partición diferencial de compostos entre a fase estacionaria (papel de filtro) e a fase móbil (disolvente). A medida que o disolvente move o papel de filtro por acción capilar, leva os compoñentes da mestura a diferentes taxas en función da súa afinidade polas dúas fases.

Os principios básicos detrás da cromatografía en papel pódense entender a través de dous conceptos principais: cromatografía de partición e cromatografía de adsorción.

Cromatografía de partición: neste tipo, as substancias distribúense entre dúas fases líquidas. A fase estacionaria consiste en auga nos poros do papel de filtro, mentres que a fase móbil é o disolvente que se move por estes poros. A separación prodúcese porque diferentes compostos teñen diferentes afinidades para as fases estacionarias e móbiles.

Cromatografía de adsorción: Aquí, a superficie sólida do papel actúa como fase estacionaria e o disolvente líquido actúa como fase móbil. Os compoñentes da mestura están separados en función da súa adsorción á superficie sólida e da súa solubilidade na fase líquida.

Compoñentes

Fase estacionaria: papel cromatográfico, normalmente feito de celulosa. Proporciona unha superficie para que os compoñentes se adhiran.

Fase móbil: o disolvente ou a mestura de disolventes que se moven no papel por acción capilar. A elección do disolvente pode afectar significativamente o proceso de separación.

Mostra: a mestura a analizar, normalmente visto nun punto de partida designado no papel.

Quere saber máis sobre a preparación da mostra de HPLC, comproba este artigo: Solucións de preparación de mostras de HPLC para os mellores resultados

Proceso de cromatografía en papel

Preparación: elixe un papel de filtro de alta calidade cunha certa porosidade para garantir unha separación efectiva. Aplique unha pequena porción da mestura de mostra na liña base do papel de cromatografía.

Preparación da mostra: disolve a mestura de mostra nun disolvente adecuado como parte da fase móbil.

Spotting: usa un capilar ou micropipeta para soltar unha pequena cantidade da solución de mostra na liña base no papel de filtro.

Desenvolvemento: mergullo o bordo inferior do papel de proba no disolvente en desenvolvemento (fase móbil). A medida que se produce a acción capilar, o disolvente sobe a través do papel de proba, levando os compoñentes da mostra con el.

Separación: a medida que se mova o disolvente, diferentes compoñentes da mostra moveranse a diferentes taxas debido á súa interacción coa fase estacionaria e a solubilidade diferente na fase móbil.

Visualización: despois de que a parte frontal do disolvente moveu unha distancia suficiente, o papel elimínase do disolvente e se deixa secar. Os compoñentes pódense visualizar usando luz UV, reactivos químicos ou observando cambios de cor.

Análise: a distancia percorrida por cada compoñente relativo á parte dianteira do disolvente mídese para calcular o valor RF (factor de retención) para a identificación.

Aplicacións de cromatografía en papel

A cromatografía en papel ten unha ampla gama de aplicacións en varios campos:

Bioquímica: análise de aminoácidos, azucres e outras biomoléculas.

Farmacéutica: identificación de ingredientes activos e impurezas nas formulacións de drogas. Utilízase para identificar compostos activos e impurezas nas formulacións de drogas durante o desenvolvemento e o control da calidade.

Ciencia ambiental: a cromatografía en papel úsase para detectar contaminantes en mostras de auga e analizar contaminantes nos extractos do solo.

Industria alimentaria: A técnica axuda a analizar aditivos, contaminantes e colorantes nos alimentos para garantir o cumprimento das normas de seguridade.

Vantaxes da cromatografía en papel

Eficacia de custos: require equipos e materiais mínimos en comparación con outras técnicas cromatográficas como HPLC (cromatografía líquida de alto rendemento). Simplicidade: o proceso é moi sinxelo e pódese realizar con ferramentas básicas de laboratorio, polo que se pode usar con fins educativos.

Requisito de volume baixo de mostra: só é necesaria unha pequena cantidade de mostra para a súa análise, tornándoa ideal para mostras preciosas ou limitadas.

Versatilidade: pode separar unha ampla gama de substancias baseadas en propiedades químicas, incluídos compostos polares e non polares

Limitacións da cromatografía en papel

A pesar das súas vantaxes, a cromatografía en papel ten algunhas limitacións:

Capacidade limitada: xeralmente adecuado para pequenos volumes de mostra.

Resolución: a resolución pode non ser tan alta como a conseguida por técnicas máis avanzadas como HPLC ou cromatografía de gas (GC).

Lume de tempo: debido á taxa de migración máis lenta, o proceso pode levar máis tempo en comparación con outros métodos cromatográficos.

Análise cuantitativa limitada: Aínda que se poden obter resultados cualitativos facilmente, poden ser necesarios métodos de calibración adicionais para cuantificar as concentracións.

A cromatografía en papel segue sendo unha valiosa técnica para separar e analizar mesturas en diversos campos científicos. A súa sinxeleza, rendibilidade e capacidade para proporcionar resultados intuitivos convérteno nunha ferramenta esencial para químicos e investigadores. A pesar das súas limitacións en comparación con técnicas cromatográficas máis avanzadas, aínda se usa amplamente con fins educativos e análise preliminar en laboratorios.

Quere saber 50 respostas sobre frascos HPLC, comproba este artigo: 50 preguntas máis frecuentes sobre frascos HPLC