HPLC સેમ્પલ પ્રીટ્રીટમેન્ટ - સ્ટેપ-બાય-સ્ટેપ ગાઇડ

નમૂના પૂર્વ સારવાર ઝાંખી

સેમ્પલ પ્રીટ્રીટમેન્ટમાં ઈન્જેક્શન પહેલાંના તમામ ઓપરેશનનો સમાવેશ થાય છે. વજન, ઓગળવા અને મંદન ઉપરાંત, તેમાં નીચેના પગલાં પણ સામેલ છે:

• ગાળણ
• નિષ્કર્ષણ
• ડેરિવેટાઇઝેશન (પ્રી-કૉલમ ડેરિવેટાઇઝેશન)
• લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી (લો-પ્રેશર કૉલમ ક્રોમેટોગ્રાફી)

પ્રીટ્રીટમેન્ટ મેન્યુઅલી અથવા ઓટોમેટેડ કરી શકાય છે. શું તમે નમૂના પૂર્વ સારવારથી પરિચિત છો?

વ્યુત્પન્નીકરણ

કેટલાક નમૂનાઓ હજુ પણ પ્રીટ્રીટમેન્ટ પછી સીધા ઇન્જેક્ટ કરી શકતા નથી. યુવી અથવા ફ્લોરોસેન્સ ડિટેક્ટર્સ દ્વારા શોધી શકાય તેવા યુવી શોષણ અથવા ફ્લોરોસેન્સ વિના સંયોજનો બનાવવા માટે વ્યુત્પત્તિકરણ જરૂરી છે.

• સંવેદનશીલતા સુધારે છે
• અલગતા વધારે છે (ગુણવત્તામાં ફેરફાર)

સંભવિત સમસ્યાઓમાં નમૂનાની ખોટ, દૂષિતતા, અપૂર્ણ પ્રતિક્રિયાઓ અથવા બહુવિધ ઉપ-ઉત્પાદનોનો સમાવેશ થાય છે, જે ચોકસાઈને અસર કરી શકે છે અથવા ભૂલો દાખલ કરી શકે છે.

નમૂના ગાળણક્રિયા

એલસી નમૂનાઓ એકસમાન અને કણો-મુક્ત હોવા જોઈએ; કણો ઇન્જેક્ટરને નુકસાન પહોંચાડી શકે છે અથવા કૉલમને અવરોધિત કરી શકે છે. પગલાંઓમાં શામેલ છે:

• ઇન્જેક્શન પહેલાં નમૂનાને હલાવો અને કણો, ટર્બિડિટી અથવા ઇમ્યુશન તપાસો
• જો કણો અવલોકન કરવામાં આવે, તો પટલનો ઉપયોગ કરીને નમૂનાને ફિલ્ટર કરો જે ≥0.15μm કણો જાળવી શકે.

સંભવિત મુદ્દાઓ: નમૂનાનું દૂષણ, શોષણ ઘટાડતા ઘટકોની સાંદ્રતા, અને દ્રાવક બાષ્પીભવન ભૂલોનું કારણ બને છે.

નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિઓ

નિષ્કર્ષણ વિશ્લેષકોને સહ-દ્રાવકમાંથી અલગ કરે છે અથવા દખલ કરતા પદાર્થોને દૂર કરે છે (દા.ત., પ્રોટીન). ઓર્ગેનિક સોલવન્ટ્સ ઓછી ઝેરી, અસ્થિર, અશુદ્ધિઓમાં ઓછી હોવી જોઈએ અને નમૂનાને સારી રીતે ઓગાળો.

સામાન્ય દ્રાવક: ડાયથાઈલ ઈથર, એથિલ એસીટેટ, ડિક્લોરોમેથેન, ક્લોરોફોર્મ, બેન્ઝીન અથવા મિશ્રણ.

નિષ્કર્ષણ પછી, વિશ્લેષણની સાંદ્રતા અને સંવેદનશીલતા વધારવા માટે નમૂનાઓને સીધા અથવા કેન્દ્રિત કરી શકાય છે.

પાણીમાં દ્રાવ્ય નમૂના નિષ્કર્ષણ

1. એસિડિક ઘટકો અને ક્ષાર: કાર્બનિક દ્રાવક સાથે અશુદ્ધિઓને બહાર કાઢો, એસિડિકને સમાયોજિત કરો, પછી અર્ક અથવા ઇન્જેક્ટ કરો; અથવા N₂ હેઠળ સુકાઈ જાઓ અને ઈન્જેક્શન પહેલાં યોગ્ય દ્રાવકમાં ઓગળી જાઓ.
2. મૂળભૂત ઘટકો અને ક્ષાર: કાર્બનિક દ્રાવક સાથે અશુદ્ધિઓને બહાર કાઢો, મૂળભૂતમાં સમાયોજિત કરો, પછી અર્ક અથવા ઇન્જેક્ટ કરો; અથવા N₂ હેઠળ સુકાઈ જાઓ અને ઈન્જેક્શન પહેલાં યોગ્ય દ્રાવકમાં ઓગળી જાઓ.
3. તટસ્થ ઘટકો: કાર્બનિક દ્રાવક સાથે અશુદ્ધિઓ બહાર કાઢો, પછી વિપરીત-તબક્કાની ક્રોમેટોગ્રાફી દ્વારા સીધું વિશ્લેષણ કરો.

ચરબી-દ્રાવ્ય નમૂના નિષ્કર્ષણ

કાર્બનિક દ્રાવક સાથે અર્ક અથવા સીધા ઇન્જેક્શન; અથવા N₂ હેઠળ સુકાઈ જાઓ અને ઈન્જેક્શન પહેલાં યોગ્ય દ્રાવકમાં ઓગળી જાઓ.

દૂષણ સ્ત્રોતો

વિશ્લેષણમાં દૂષણના સંભવિત સ્ત્રોતો:

પ્રમાણભૂત ઉકેલ તૈયારી

• પ્રથમ આંતરિક પ્રમાણભૂત ઉકેલ તૈયાર કરો; ભૂલો ઘટાડવા માટે ધોરણો અને નમૂનાઓમાં સમાન બેચનો ઉપયોગ કરો
• પદાર્થો ક્રોમેટોગ્રાફી-ગ્રેડ અને સ્થિર હોવા જોઈએ
• નીચા તાપમાને બ્રાઉન બોટલમાં પ્રમાણભૂત સોલ્યુશન સ્ટોર કરો
• વિટામિન્સ માટે, બ્રાઉન વોલ્યુમેટ્રિક ફ્લાસ્કનો ઉપયોગ કરો અથવા પ્રકાશથી રક્ષણ કરો

નમૂના પ્રીટ્રીટમેન્ટ અને સોલ્યુશન્સમાં સામાન્ય સમસ્યાઓ