Apakah Anda tahu tentang kromatografi kertas?

Kromatografi kertas adalah teknik analitik yang banyak digunakan yang memisahkan dan mengidentifikasi campuran zat berdasarkan afinitas mereka yang berbeda untuk fase stasioner (kertas) dan fase gerak (pelarut). Ini sangat berguna dalam kimia dan biokimia untuk menganalisis sejumlah kecil zat seperti pigmen, asam amino, dan senyawa organik lainnya.

Apa itu kromatografi kertas?

Kromatografi kertas adalah jenis kromatografi cair di mana fase stasioner adalah selembar kertas saring dan fase gerak adalah pelarut yang mengalir melalui kertas saring. Teknik ini bergantung pada partisi diferensial senyawa antara fase stasioner (kertas filter) dan fase gerak (pelarut). Saat pelarut naik ke atas kertas saring dengan aksi kapiler, ia membawa komponen campuran pada tingkat yang berbeda berdasarkan afinitas mereka untuk dua fase.

Prinsip -prinsip dasar di balik kromatografi kertas dapat dipahami melalui dua konsep utama: kromatografi partisi dan kromatografi adsorpsi.

Kromatografi partisi: Dalam jenis ini, zat didistribusikan antara dua fase cair. Fase stasioner terdiri dari air di pori -pori kertas saring, sedangkan fase gerak adalah pelarut yang bergerak melalui pori -pori ini. Pemisahan terjadi karena senyawa yang berbeda memiliki afinitas yang berbeda untuk fase stasioner dan seluler.

Kromatografi Adsorpsi: Di ​​sini, permukaan padat kertas bertindak sebagai fase stasioner dan pelarut cair bertindak sebagai fase gerak. Komponen dalam campuran dipisahkan berdasarkan adsorpsi mereka ke permukaan padat dan kelarutannya dalam fase cair.

Komponen

Fase stasioner: kertas kromatografi, biasanya terbuat dari selulosa. Ini memberikan permukaan untuk komponen untuk dipatuhi.

Fase gerak: pelarut atau campuran pelarut yang bergerak di atas kertas dengan aksi kapiler. Pilihan pelarut dapat secara signifikan mempengaruhi proses pemisahan.

Sampel: Campuran yang akan dianalisis, biasanya terlihat pada titik awal yang ditentukan di atas kertas.

Ingin tahu lebih banyak tentang persiapan sampel HPLC, silakan periksa artikel ini: Solusi persiapan sampel HPLC untuk hasil terbaik

Proses kromatografi kertas

Persiapan: Pilih kertas saring berkualitas tinggi dengan porositas tertentu untuk memastikan pemisahan yang efektif. Oleskan sebagian kecil dari campuran sampel ke garis dasar kertas kromatografi.

Persiapan sampel: Larutkan campuran sampel dalam pelarut yang sesuai sebagai bagian dari fase gerak.

Spotting: Gunakan kapiler atau mikropipet untuk menjatuhkan sejumlah kecil solusi sampel pada baseline pada kertas saring.

Pengembangan: Celupkan tepi bawah kertas uji ke dalam pelarut yang berkembang (fase gerak). Ketika aksi kapiler terjadi, pelarut naik melalui kertas uji, membawa komponen sampel dengannya.

Pemisahan: Saat pelarut bergerak, komponen sampel yang berbeda akan bergerak pada laju yang berbeda karena interaksinya dengan fase stasioner dan kelarutan yang berbeda dalam fase gerak.

Visualisasi: Setelah bagian depan pelarut memindahkan jarak yang cukup, kertas dikeluarkan dari pelarut dan dibiarkan kering. Komponen dapat divisualisasikan menggunakan cahaya UV, reagen kimia, atau dengan mengamati perubahan warna.

Analisis: Jarak yang ditempuh oleh masing -masing komponen relatif terhadap bagian depan pelarut diukur untuk menghitung nilai RF (faktor retensi) untuk identifikasi.

Aplikasi kromatografi kertas

Kromatografi kertas memiliki berbagai aplikasi di berbagai bidang:

Biokimia: Analisis asam amino, gula, dan biomolekul lainnya.

Farmasi: Identifikasi bahan aktif dan kotoran dalam formulasi obat. Digunakan untuk mengidentifikasi senyawa aktif dan kotoran dalam formulasi obat selama pengembangan dan kontrol kualitas.

Ilmu Lingkungan: Kromatografi kertas digunakan untuk mendeteksi kontaminan dalam sampel air dan menganalisis kontaminan dalam ekstrak tanah.

Industri Makanan: Teknik ini membantu dalam menganalisis aditif, kontaminan, dan pewarna dalam makanan untuk memastikan kepatuhan terhadap peraturan keselamatan.

Keuntungan kromatografi kertas

Efektivitas Biaya: Dibutuhkan peralatan dan bahan minimal dibandingkan dengan teknik kromatografi lainnya seperti HPLC (kromatografi cair kinerja tinggi). Kesederhanaan: Prosesnya sangat sederhana dan dapat dilakukan dengan alat laboratorium dasar, sehingga dapat digunakan untuk tujuan pendidikan.

Persyaratan Volume Sampel Rendah: Hanya sejumlah kecil sampel yang diperlukan untuk analisis, membuatnya ideal untuk sampel yang berharga atau terbatas.

Fleksibilitas: Ini dapat memisahkan berbagai zat berdasarkan sifat kimia, termasuk senyawa polar dan non-polar

Keterbatasan Kromatografi Kertas

Terlepas dari kelebihannya, kromatografi kertas memiliki beberapa keterbatasan:

Kapasitas Terbatas: Umumnya cocok untuk volume sampel kecil.

Resolusi: Resolusi mungkin tidak setinggi yang dicapai dengan teknik yang lebih canggih seperti HPLC atau kromatografi gas (GC).

Memakan waktu: Karena tingkat migrasi yang lebih lambat, prosesnya mungkin memakan waktu lebih lama dibandingkan dengan metode kromatografi lainnya.

Analisis kuantitatif terbatas: Sementara hasil kualitatif dapat dengan mudah diperoleh, metode kalibrasi tambahan mungkin diperlukan untuk mengukur konsentrasi.

Kromatografi kertas tetap merupakan teknik yang berharga untuk memisahkan dan menganalisis campuran dalam berbagai bidang ilmiah. Kesederhanaannya, efektivitas biaya, dan kemampuan untuk memberikan hasil yang intuitif menjadikannya alat penting bagi ahli kimia dan peneliti. Terlepas dari keterbatasannya dibandingkan dengan teknik kromatografi yang lebih canggih, masih banyak digunakan untuk tujuan pendidikan dan analisis awal di laboratorium.

Ingin tahu 50 jawaban tentang vial HPLC, silakan periksa artikel ini: 50 pertanyaan paling sering diajukan tentang HPLC Vials