시료 전처리 개요
시료 전처리에는 주입 전의 모든 작업이 포함됩니다. 계량, 용해 및 희석 외에도 다음 단계도 포함됩니다.
- 여과
- 추출
- 유도체화(컬럼 전 유도체화)
- 액체 크로마토그래피(저압 컬럼 크로마토그래피)
전처리는 수동 또는 자동으로 수행할 수 있습니다. 시료 전처리에 대해 잘 알고 계시나요?
유도체화
일부 샘플은 전처리 후에도 직접 주입할 수 없습니다. UV 또는 형광 검출기로 검출할 수 있는 UV 흡수 또는 형광이 없는 화합물을 만들기 위해서는 유도체화가 필요합니다.
가능한 문제로는 샘플 손실, 오염, 불완전한 반응 또는 여러 부산물이 있으며, 이는 정확도에 영향을 미치거나 오류를 유발할 수 있습니다.
샘플 여과
LC 샘플은 균일하고 입자가 없어야 합니다. 입자가 주입기를 손상시키거나 컬럼을 막을 수 있습니다. 단계는 다음과 같습니다:
- 주입하기 전에 샘플을 흔들어 입자, 탁도 또는 유제를 확인하십시오.
- 입자가 관찰되면 ≥0.15μm 입자를 보유할 수 있는 멤브레인을 사용하여 샘플을 필터링합니다.
잠재적인 문제: 시료 오염, 흡착 감소 성분 농도, 용매 증발로 인해 오류가 발생합니다.
추출 방법
추출을 통해 공용매에서 분석물을 분리하거나 간섭 물질(예: 단백질)을 제거합니다. 유기용매는 독성이 낮고, 휘발성이 낮고, 불순물이 적어 시료를 잘 녹여야 합니다.
일반적인 용매: 디에틸 에테르, 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 벤젠 또는 혼합물.
추출 후 시료를 직접 주입하거나 농축하여 분석물질 농도와 감도를 높일 수 있습니다.
수용성 시료 추출
- 산성성분 및 염류: 유기용매로 불순물을 추출하고, 산성으로 조정한 후 추출 또는 주입한다. 또는 N2 하에서 건조시킨 후 적절한 용매에 용해시킨 후 주입하십시오.
- 기본성분 및 염류: 유기용매로 불순물을 추출하고, 염기성으로 조정한 후 추출 또는 주입한다. 또는 N2 하에서 건조시킨 후 적절한 용매에 용해시킨 후 주입하십시오.
- 중성 성분: 유기 용매로 불순물을 추출한 후 역상 크로마토그래피로 직접 분석합니다.
지용성 시료 추출
유기용매로 추출하거나 직접 주입합니다. 또는 N2 하에서 건조시킨 후 적절한 용매에 용해시킨 후 주입하십시오.
오염원
분석 시 잠재적인 오염원:
|
오염 유형
|
소스
|
예방 조치
|
|
환경
|
유해가스, 먼지, 에어로졸
|
기구실을 격리하고 깨끗하게 유지하십시오. AC를 설치하십시오; 제어 습도 <70%; 습기, 부식, 진동 방지
|
|
컨테이너
|
유리, 세라믹, 석영, 플라스틱 실험용품
|
시료 유형별로 적절한 용기를 선택하세요. 깨끗이 청소하다
|
|
시약
|
비크로마토그래피 등급 시약
|
크로마토그래피 등급, 고순도 또는 분석 등급 시약 사용
|
표준 용액 준비
- 내부 표준 용액을 먼저 준비하십시오. 표준품과 시료에 동일한 배치를 사용하여 오류를 줄입니다.
- 물질은 크로마토그래피 등급이어야 하며 안정적이어야 합니다.
- 표준용액은 갈색병에 담아 저온 보관
- 비타민의 경우 갈색 용량 플라스크를 사용하거나 빛으로부터 보호하십시오.
시료 전처리 및 솔루션의 일반적인 문제
|
문제
|
원인
|
솔루션
|
|
크로마토그램의 관련 없는 피크
|
필터 오염
|
-
시료용매에 필터를 담근 후 시험 주입
-
필터 유형 변경
-
대체 청소 기술 사용
|
|
낮은 피크 응답(특히 저농도 샘플)
|
필터 표면에 흡착
|
-
필터 유형 변경
-
동일한 조건에서 모든 샘플을 처리합니다.
-
대체 청소 기술 사용
|
|
낮은 회복
|
불완전한 추출
|
-
추출 시간을 늘리고 뜨거운 용매를 사용하세요.
-
청소 방법 조정
|
|
피크 확장, 컬럼 수명 단축
|
시료 간섭 및 오염
|
청소방법 개선
|
|
정밀도가 좋지 않음
|
불완전한 복구
|
-
유도체화, 분리, 추출 또는 기타 조건을 최적화하거나 대체합니다.
-
자동화된 처리를 사용하여 정밀도 향상
|
영어
중국어
