mzteng.title.15.title
Naujienos
Kategorijos
Informacija

Viskas, ką reikia žinoti apie LCMS mėginių paruošimą

2024 m. Rugsėjo 20 d
Mėginių paruošimas yra kritinis skysčių chromatografijos-masės spektrometrijos (LC-MS) proceso žingsnis, darantis įtaką analitinių rezultatų tikslumui ir patikimumui. Pagrindinis mėginio paruošimo tikslas yra ištraukti, išvalyti ir sutelkti analizę iš sudėtingų matricų, užtikrinant, kad jos būtų suderinamos su LC-MS analize. Šis žingsnis yra labai svarbus norint pašalinti galimus trukdžius, kurie galėtų paveikti duomenų kokybę. Tinkamas mėginio paruošimas pagerina analizės jautrumą ir specifiškumą, o tai yra būtina pritaikant įvairiose srityse, tokiose kaip proteomika, metabolomika, farmacijos analizė ir aplinkos tyrimai.

Pagrindiniai mėginių paruošimo tikslai:

Interferencijų pašalinimas: pašalinkite medžiagas, kurios gali trukdyti aptikti tikslines analizes.
Analitų koncentracija: padidinkite analizės koncentraciją, kad pagerintumėte aptikimo ribas.
Suderinamumas: paruoškite pavyzdžius taip, kad juos būtų galima efektyviai analizuoti LC-MS sistemomis.

Norite sužinoti daugiau apie HPLC mėginių paruošimą, patikrinkite šį straipsnį: HPLC mėginių paruošimo sprendimai geriausiems rezultatams


Dažni LC-MS mėginių paruošimo metodai

Rengiant LC-MS mėginius, dažniausiai naudojami keli metodai. Kiekvienas metodas turi savo pranašumus ir yra pasirinktas remiantis konkrečiais analizės reikalavimais.

1. Kietos fazės ištraukimas (SPE)

SPE yra plačiai naudojamas analitėms atskirti nuo skystųjų mėginių. Ši technika apima mėginio praėjimą per kietą nejudančią fazę, kuri selektyviai išlaiko tikslines analizes, tuo pačiu leisdamas praeiti kitiems komponentams. SPE yra ypač efektyvus sudėtingoms matricoms, tokioms kaip kraujas ar šlapimas, ir siūlo keletą privalumų:
Aukštas atsigavimo greitis: SPE paprastai gaunamas didesnis atsigavimo greitis, palyginti su skysčio skysčio ekstrahavimu.
Automatizavimo suderinamumas: Metodą galima lengvai automatizuoti, padidinant pralaidumą ir efektyvumą.

2. Baltymų krituliai

Baltymų krituliai yra paprastas, tačiau efektyvus baltymų pašalinimo iš biologinių mėginių pašalinimo būdas. Ši technika yra ypač svarbi analizuojant mėginius, kurių baltymų kiekis yra didelis, pavyzdžiui, plazma ar serumas. Nusodindamas baltymus, šis metodas supaprastina matricą ir sumažina trukdžius į vėlesnes analizes.
Greitas ir efektyvus: tai leidžia greitai apdoroti mėginius, išlaikant gerą atkūrimo procentą.

3. Skysčio skysčio ekstrahavimas (LLE)

LLE atskiria analitus, atsižvelgiant į jų tirpumą dviejuose nesimaišomuose skysčiuose - paprastai vandeninėje fazėje ir organiniame tirpiklyje. Ši technika yra naudinga norint išgauti nepolinius ar vidutiniškai polinius junginius iš sudėtingų vandeninių matricų.
Universalus taikymas: LLE gali būti pritaikyta įvairiems mėginių kiekiams ir tipams, todėl jis yra tinkamas įvairioms programoms.

4. Derivatizacija

Derivatizacija apima chemiškai modifikuojant analizę, siekiant padidinti jų aptinkamumą atliekant LC-MS analizę. Šis procesas pagerina tokias savybes kaip nepastovumas ir jonizacijos efektyvumas, todėl jis yra ypač naudingas junginiams, kuriems yra mažai būdingų aptinkamumo.
Padidėjęs jautrumas: Derivatizavimas gali žymiai padidinti konkrečių sudėtinių klasių, tokių kaip aminorūgštys ar steroidai, analizės jautrumas ir selektyvumas.

Norite sužinoti daugiau apie chromatografijos buteliukų programas, patikrinkite šį straipsnį: 15 chromatografijos buteliukų taikymo skirtinguose laukuose

Veiksniai, darantys įtaką mėginių paruošimo metodo atrankai


Norint pasirinkti tinkamą mėginių paruošimo techniką, reikia atsižvelgti į keletą veiksnių:
Analite chemija: labai svarbu suprasti analitų poliškumą, krūvį ir stabilumą.
Imties tūris ir sudėtingumas: Matricos imties tūrio apribojimai ir sudėtingumas gali diktuoti, kurie metodai yra įmanomi.
Jautrumo reikalavimai: Skirtingose ​​programose gali būti skirtingi jautrumo poreikiai, turintys įtakos metodo pasirinkimui.
Laboratoriniai ištekliai: Automatizavimo ar rankinio apdorojimo įrangos prieinamumas gali turėti įtakos technikos pasirinkimui.

Geriausia veiksmingo mėginių paruošimo praktika


Norint pasiekti optimalius LC-MS analizės rezultatus, būtina laikytis geriausios praktikos ruošiant mėginius:
Standartizavimas: sukurkite standartizuotus protokolus, kad būtų užtikrintas nuoseklumas atliekant analizes.
Patvirtinimas: reguliariai patvirtinkite metodus, kad patvirtintumėte jų patikimumą ir tikslumą.
Sumažinkite mėginių tvarkymą: sumažinkite manipuliacijų skaičių, kad būtų išvengta nuostolių ar užteršimo.
Naudokite kokybiškus reagentus: naudokite aukštos kokybės reagentus, kad išvengtumėte priemaišų į mėginius.
Dokumentų procedūros: saugokite išsamius visų procedūrų įrašus, kad būtų lengviau pašalinti triktis ir optimizuoti metodą.

Išvada

Efektyvus mėginių paruošimas yra esminis sėkmingos LC-MS analizės. Supratę įvairius metodus, tokius kaip SPE, baltymų krituliai, LLE ir darinys, analitikai gali pasirinkti tinkamiausią jų specifinių reikalavimų metodą. Be to, atlikta geriausia praktika pagerins duomenų kokybę ir užtikrins patikimus rezultatus skirtingoms tyrimų ir pramonės srityse.
Apibendrinant galima pasakyti, kad imties paruošimo metodų įsisavinimas gali ne tik pagerinti analitinius rezultatus, bet ir reikšmingą indėlį į pažangą tokiose srityse kaip klinikinė diagnostika, vaistų kūrimas ir aplinkos stebėjimas.

Atrakinkite tinkamos chromatografijos buteliuko paruošimo paslaptis, kad atliktumėte tikslią ir patikimą analizę vos 6 paprastais veiksmais.Skaitykite toliau, kad įvaldytumėte techniką! 6 žingsniai, kaip paruošti chromatografijos buteliukus analizei
Užklausa