HPLC ir LCMS: kurį pasirinkti? 5 pagrindiniai punktai, į kuriuos reikia atsižvelgti
Naujienos
Kategorijos
Informacija

HPLC ir LCMS: kurį turėtumėte pasirinkti? 5 taškai

2024 m. Rugpjūčio 22 d
Aukštos kokybės skysčių chromatografija (HPLC) ir skysčių chromatografijos-masės spektrometrija (LCMS) yra du galingi analitiniai metodai, naudojami įvairiose srityse, įskaitant farmacijos, aplinkos mokslus ir gyvybės mokslus. Nors abu metodai apima junginių atskyrimą ir analizę, jų principai, funkcijos ir pritaikymai yra labai skirtingi. Šiame tinklaraščio įraše bus palyginta HPLC ir LCMS, daugiausia dėmesio skiriant jų pagrindiniams skirtumams ir kiekvienos technikos pranašumams.

Operacijos principas


HPLC


HPLC yra chromatografinė technika, atskirianti junginius, atsižvelgiant į jų sąveiką su nejudančiomis ir mobiliomis fazėmis. HPLC skysta mobilioji fazė pumpuojama per kolonėlę, užpildytą nejudančia faze, kurią paprastai sudaro mažos silicio dioksido ar polimerų dalelės. Kai į sistemą įvedamas mėginio mišinys, komponentai yra atskirti atsižvelgiant į jų afinitetą nejudančiai fazei. Junginiai, kurie stipriau sąveikauja su nejudančia faze, ruošiasi lėčiau, o junginiai, kurie mažiau sąveikauja greičiau. Tada atskirti junginiai aptinkami naudojant įvairius detektorius, tokius kaip UV-VIS, fluorescencija ar lūžio rodiklių detektoriai.

Norite sužinoti daugiau apie chromatografijos buteliukų programas, patikrinkite šį straipsnį:15 chromatografijos buteliukų taikymo skirtinguose laukuose


LCMS


LCMS sujungia HPLC atskyrimo galimybes su masės spektrometrijos masės analizės galimybėmis. LCMS mėginiai pirmiausia yra atskirti naudojant HPLC, kaip ir įprastame HPLC. Tačiau užuot nustatę įprastas detektorius, išplauti junginiai yra įvedami į masės spektrometrą. Masės spektrometras jonizuoja junginius ir matuoja jų masės ir krūvio santykį, pateikdamas išsamią informaciją apie analitės molekulinę masę ir struktūrą. Šis atskyrimo ir masės spektrometrijos derinys suteikia didesnį jautrumą ir specifiškumą nei vien HPLC.


Atskyrimo mechanizmas


HPLC:HPLC naudoja aukštą slėgį, kad per supakuotą kolonėlę, kurioje yra nejudanti fazė, perpildydama skystą mobilųjį fazę. Junginiai yra atskirti atsižvelgiant į jų diferencinę sąveiką su nejudančia faze, todėl tiksliai ir veiksmingi atskyrimai.

LCMS:LCMS sujungia HPLC fizinio atskyrimo galimybes su masių spektrometrijos (MS) masės spektrometrijos galimybėmis. Skysčio chromatografijos komponentas atskiria junginius, o masės spektrometras matuoja jonizuotų rūšių masės ir krūvio santykį.

Jautrumas ir selektyvumas

HPLC:HPLC turi gerą jautrumą ir selektyvumą, ypač kai jis derinamas su pažangiais detektoriais, tokiais kaip UV-Vis, fluorescencija ar diodų matricos detektoriai. Tačiau vien HPLC gali nepateikti tinkamo specifiškumo sudėtingiems mėginiams.

LCMS:LCMS, palyginti su HPLC, turi puikų jautrumą ir selektyvumą. Masės spektrometrai gali tiksliai nustatyti ir kiekybiškai įvertinti junginius, atsižvelgiant į jų unikalius masės ir krūvio santykį, net ir sudėtingose ​​matricose. Dėl to LCMS ypač naudinga analizuojant pėdsakų junginius ir patvirtinant nežinomų medžiagų tapatumą.


Mėginio paruošimas


HPLC:Mėginių paruošimas HPLC paprastai apima skiedimą, filtravimą ar paprastus ištraukimo būdus. Mėginiams nereikia išgaruoti, todėl HPLC yra tinkamas įvairiems junginiams, įskaitant polines ir nestabilias medžiagas.


LCMS:Mėginių paruošimas LCM yra panašus į HPLC, tačiau norint užtikrinti suderinamumą su masės spektrometru, gali prireikti papildomų žingsnių. Pavyzdžiui, norint sustiprinti jonizaciją ir užkirsti kelią jonų slopinimui, gali prireikti lakiųjų buferių ar priedų.

Paraiškos


HPLC:HPLC yra plačiai naudojamas farmacijos, maisto ir aplinkos mėginių analizei. Tai ypač efektyvu atskirti ir kiekybiškai įvertinti junginius sudėtinguose mišiniuose, tokiuose kaip vaistų priemaišos, maisto priedai ir pesticidų liekanos.

LCMS:LCMS turi platų programų spektrą, įskaitant:

Farmacijos analizė: naudojama narkotikų atradimui, plėtrai ir kokybės kontrolei.

Proteomika ir metabolomika: naudojami baltymams ir metabolitams nustatyti ir kiekybiškai įvertinti biologiniuose mėginiuose.

Aplinkos analizė: naudojama nustatyti pėdsakų teršalus vandenyje, dirvožemyje ir oro mėginiuose.

Įdomu dėl sertifikuotų HPLC buteliukų vaidmens užtikrinant tikslią mėginių analizę? Perskaitykite šį straipsnį: Sertifikuotų HPLC buteliukų svarba tiksliam mėginių analizei

Išvada

HPLC ir LCM yra galingi analitiniai metodai, turintys savo stipriąsias puses ir apribojimus. Pasirinkimas tarp dviejų priklauso nuo konkrečių analizės reikalavimų, tokių kaip jautrumas, selektyvumas, imties sudėtingumas ir turimi ištekliai.

HPLC yra geras pasirinkimas įprastinei žinomų junginių analizei santykinai paprastomis matricomis, kai sąnaudos ir paprastumas yra svarbūs veiksniai. Kita vertus, LCMS yra tinkamiausia technika analizuojant sudėtingus mėginius, identifikuojant nežinomus junginius ir siekiant aptikti ypač pėdsakus.

Tobulėjant technologijoms, HPLC ir LCMS integracija vaidins vis svarbesnį vaidmenį patenkinant besikeičiančius analitinės chemijos poreikius ir užtikrinant aukštos kokybės rezultatus įvairiose programose.

Užklausa