Știți despre cromatografia de hârtie?

Cromatografia pe hârtie este o tehnică analitică utilizată pe scară largă, care separă și identifică amestecuri de substanțe bazate pe diferitele lor afinități pentru o fază staționară (hârtie) și o fază mobilă (solvent). Este util în special în chimie și biochimie pentru analizarea unor cantități mici de substanțe precum pigmenți, aminoacizi și alți compuși organici.

Ce este cromatografia de hârtie?

Cromatografia de hârtie este un tip de cromatografie lichidă în care faza staționară este o foaie de hârtie de filtru, iar faza mobilă este solventul care curge prin hârtia de filtru. Tehnica se bazează pe partiționarea diferențială a compușilor dintre faza staționară (hârtie de filtrare) și faza mobilă (solvent). Pe măsură ce solventul crește hârtia de filtru prin acțiune capilară, poartă componentele amestecului la viteze diferite, pe baza afinității lor pentru cele două faze.

Principiile de bază din spatele cromatografiei pe hârtie pot fi înțelese prin două concepte principale: cromatografie de partiție și cromatografie de adsorbție.

Cromatografie de partiție: În acest tip, substanțele sunt distribuite între două faze lichide. Faza staționară este formată din apă în porii hârtiei de filtrare, în timp ce faza mobilă este solventul care se deplasează prin acești pori. Separarea apare deoarece diferiți compuși au afinități diferite pentru fazele staționare și mobile.

Cromatografie de adsorbție: Aici, suprafața solidă a lucrării acționează ca faza staționară și solventul lichid acționează ca faza mobilă. Componentele din amestec sunt separate pe baza adsorbției lor la suprafața solidă și a solubilității lor în faza lichidă.

Componente

Faza staționară: hârtie cromatografică, de obicei din celuloză. Oferă o suprafață pentru ca componentele să adere.

Faza mobilă: Solventul sau amestecul de solvenți care se deplasează pe hârtie prin acțiune capilară. Alegerea solventului poate afecta semnificativ procesul de separare.

Eșantion: amestecul de analizat, de obicei observat la un punct de plecare desemnat pe hârtie.

Doriți să aflați mai multe despre pregătirea eșantionului HPLC, vă rugăm să verificați acest articol: Soluții de pregătire a eșantionului HPLC pentru cele mai bune rezultate

Proces de cromatografie pe hârtie

Pregătire: Alegeți o hârtie de filtru de înaltă calitate, cu o anumită porozitate pentru a asigura o separare eficientă. Aplicați o porție mică din amestecul de probe la valoarea de bază a lucrării de cromatografie.

Pregătirea eșantionului: dizolvați amestecul de probe într -un solvent adecvat ca parte a fazei mobile.

Spot: Utilizați un capilar sau micropipetă pentru a renunța la o cantitate mică din soluția de probă pe linia de bază de pe hârtia de filtru.

Dezvoltare: scufundați marginea de jos a hârtiei de testare în solventul în curs de dezvoltare (faza mobilă). Pe măsură ce se produce o acțiune capilară, solventul se ridică prin hârtia de testare, purtând componentele eșantionului cu acesta.

Separare: Pe măsură ce solventul se mișcă, diferite componente ale eșantionului se vor deplasa la rate diferite, datorită interacțiunii lor cu faza staționară și solubilitatea diferită în faza mobilă.

Vizualizare: După ce fața solventului a mutat o distanță suficientă, hârtia este îndepărtată din solvent și lăsată la uscat. Componentele pot fi vizualizate folosind lumină UV, reactivi chimici sau prin observarea modificărilor de culoare.

Analiză: Distanța parcursă de fiecare componentă în raport cu fața solventului este măsurată pentru a calcula valoarea RF (factorul de retenție) pentru identificare.

Aplicații de cromatografie de hârtie

Cromatografia pe hârtie are o gamă largă de aplicații în diferite domenii:

Biochimie: analiza aminoacizilor, zaharurilor și a altor biomolecule.

Farmaceutice: identificarea ingredientelor active și a impurităților în formulările de medicamente. Folosit pentru identificarea compușilor și impurităților active în formulările de medicamente în timpul dezvoltării și controlului calității.

Știința mediului: cromatografia pe hârtie este utilizată pentru a detecta contaminanții în probele de apă și pentru a analiza contaminanții în extractele de sol.

Industria alimentară: Tehnica ajută la analiza aditivilor, contaminanților și colorantilor din alimente pentru a asigura respectarea reglementărilor de siguranță.

Avantajele cromatografiei pe hârtie

Eficiența costurilor: necesită echipamente și materiale minime în comparație cu alte tehnici cromatografice, cum ar fi HPLC (cromatografie lichidă de înaltă performanță). Simplitate: Procesul este foarte simplu și poate fi efectuat cu instrumente de laborator de bază, astfel încât poate fi utilizat în scopuri educaționale.

Cerință de volum scăzută a eșantionului: este necesară doar o cantitate mică de eșantion pentru analiză, ceea ce îl face ideal pentru probe prețioase sau limitate.

Versatilitate: poate separa o gamă largă de substanțe bazate pe proprietăți chimice, inclusiv compuși polari și non-polari

Limitări ale cromatografiei pe hârtie

În ciuda avantajelor sale, cromatografia pe hârtie are unele limitări:

Capacitate limitată: în general adecvată pentru volumele mici de eșantion.

Rezoluție: Rezoluția poate să nu fie la fel de mare ca cea obținută prin tehnici mai avansate, cum ar fi HPLC sau cromatografie de gaze (GC).

Consumarea timpului: Datorită ratei de migrare mai lente, procesul poate dura mai mult în comparație cu alte metode cromatografice.

Analiza cantitativă limitată: în timp ce rezultatele calitative pot fi obținute cu ușurință, pot fi necesare metode suplimentare de calibrare pentru a cuantifica concentrațiile.

Cromatografia pe hârtie rămâne o tehnică valoroasă pentru separarea și analizarea amestecurilor într -o varietate de domenii științifice. Simplitatea, rentabilitatea și capacitatea sa de a oferi rezultate intuitive îl fac un instrument esențial pentru chimiști și cercetători. În ciuda limitărilor sale în comparație cu tehnicile cromatografice mai avansate, acesta este încă utilizat pe scară largă în scopuri educaționale și analize preliminare în laboratoare.

Doriți să cunoașteți 50 de răspunsuri despre flacoanele HPLC, vă rugăm să verificați acest articol: 50 de întrebări cele mai frecvente pe flacoane HPLC