mzteng.title.15.title
Novinky
kategórie
Vyšetrovanie

Všetko, čo potrebujete vedieť o príprave vzorky LCMS

20. septembra, 2024
Príprava vzorky je kritickým krokom v procese kvapalinovej chromatografie-hmotnostnej spektrometrie (LC-MS), ktorý ovplyvňuje presnosť a spoľahlivosť analytických výsledkov. Hlavným účelom prípravy vzorky je extrahovať, čistiť a koncentovať analyty z komplexných matíc, čím sa zabezpečuje kompatibilné s analýzou LC-MS. Tento krok je rozhodujúci pre odstránenie potenciálnych interferencií, ktoré by mohli ovplyvniť kvalitu údajov. Správna príprava vzorky zlepšuje citlivosť a špecifickosť analýzy, ktorá je nevyhnutná pre aplikácie v rôznych oblastiach, ako sú proteomika, metabolomiky, farmaceutická analýza a testovanie životného prostredia.

Kľúčové ciele prípravy vzorky:

Odstránenie interferencií: Eliminujte látky, ktoré môžu interferovať s detekciou cieľových analytov.
Koncentrácia analytov: Zvýšte koncentráciu analytov na zlepšenie detekčných limitov.
Kompatibilita: Pripravte vzorky spôsobom, aby ich mohli efektívne analyzovať systémami LC-MS.

Chcete sa dozvedieť viac o príprave vzoriek HPLC, pozrite si tento článok: Riešenia prípravy vzorky HPLC pre najlepšie výsledky


Bežné techniky prípravy vzorky LC-MS

Pri príprave vzorky LC-MS sa bežne používa niekoľko techník. Každá metóda má svoje vlastné výhody a je vybraná na základe špecifických požiadaviek analýzy.

1. Extrakcia tuhej fázy (SPE)

SPE sa široko používa na izolačné analyty zo vzoriek kvapaliny. Táto technika zahŕňa odovzdávanie vzorky cez pevnú stacionárnu fázu, ktorá selektívne zachováva cieľové analyty a zároveň umožňuje prejsť ostatnými komponentmi. SPE je obzvlášť účinný pre zložité matice, ako je krv alebo moč, a ponúka niekoľko výhod:
Vysoké rýchlosti zhodnocovania: SPE zvyčajne poskytuje vyššie miery zotavenia v porovnaní s extrakciou kvapalin-kvapaliny.
Kompatibilita automatizácie: Metóda je možné ľahko automatizovať, čím sa zlepší priepustnosť a efektívnosť.

2. Zrážanie proteínov

Zrážanie proteínov je jednoduchá, ale účinná metóda na odstraňovanie proteínov z biologických vzoriek. Táto technika je obzvlášť dôležitá pri analýze vzoriek s vysokým obsahom proteínov, ako je plazma alebo sérum. Zrážaním proteínov táto metóda zjednodušuje maticu a znižuje interferenciu v následných analýzach.
Rýchle a efektívne: Umožňuje rýchle spracovanie vzoriek pri zachovaní dobrých miery zotavenia.

3. Extrakcia kvapaliny-kvapalina (LLE)

LLE oddeľuje analyty založené na ich rozpustnosti v dvoch nemiešateľných tekutinách - zvyčajne vodná fáza a organické rozpúšťadlo. Táto technika je užitočná na extrakciu nepolárnych alebo miernych polárnych zlúčenín z komplexných vodných matíc.
Všestranná aplikácia: LLE sa môže prispôsobiť pre rôzne objemy a typy vzoriek, vďaka čomu je vhodná pre širokú škálu aplikácií.

4. Derivatizácia

Derivatizácia zahŕňa chemicky modifikáciu analytov na zvýšenie ich detekovateľnosti v analýze LC-MS. Tento proces zlepšuje vlastnosti, ako je volatilita a účinnosť ionizácie, vďaka čomu je obzvlášť užitočný pre zlúčeniny s nízkou inherentnou detekovateľnosťou.
Zvýšená citlivosť: derivatizácia môže významne zvýšiť citlivosť a selektivitu analýz pre špecifické triedy zlúčenín, ako sú aminokyseliny alebo steroidy.

Chcete sa dozvedieť viac o aplikáciách chromatografie, prosím, skontrolujte tento článok: 15 Aplikácie chromatografie fľaštičky v rôznych oblastiach

Faktory ovplyvňujúce výber metódy prípravy vzorky


Výber vhodnej techniky prípravy vzoriek si vyžaduje zváženie niekoľkých faktorov:
Chémia analytu: Pochopenie polarity, náboja a stability analytov je rozhodujúce.
Objem a zložitosť vzorky: Objemové obmedzenia a zložitosť matrice vzorky môžu diktovať, ktoré metódy sú uskutočniteľné.
Požiadavky na citlivosť: Rôzne aplikácie môžu mať rôzne potreby citlivosti, ktoré ovplyvňujú výber metódy.
Laboratórne zdroje: Dostupnosť zariadenia pre automatizáciu alebo manuálne spracovanie môže ovplyvniť výber techniky.

Osvedčené postupy pre efektívnu prípravu vzoriek


Na dosiahnutie optimálnych výsledkov v analýze LC-MS je nevyhnutné dodržiavanie osvedčených postupov počas prípravy vzorky:
Štandardizácia: Vypracovať štandardizované protokoly, aby sa zabezpečila konzistentnosť v rámci analýz.
Validácia: Pravidelne overujte metódy na potvrdenie ich spoľahlivosti a presnosti.
Minimalizujte manipuláciu s vzorkou: Znížte počet manipulácií, aby ste zabránili strate alebo kontaminácii.
Používajte kvalitné činidlá: Využite vysoko kvalitné činidlá, aby ste zabránili zavedeniu nečistôt do vzoriek.
Postupy dokumentu: Uvedomte si podrobné záznamy o všetkých postupoch na uľahčenie riešenia problémov a optimalizácie metódy.

Záver

Efektívna príprava vzoriek je základom úspešnej analýzy LC-MS. Pochopením rôznych techník, ako sú SPE, zrážanie proteínov, LLE a derivatizácia, môžu analytici zvoliť najvhodnejšiu metódu pre svoje špecifické požiadavky. Okrem toho, podľa osvedčených postupov zlepší kvalitu údajov a zabezpečí spoľahlivé výsledky pre rôzne aplikácie vo výskumných a priemyselných prostrediach.
Záverom možno povedať, že techniky prípravy vzoriek môžu nielen zlepšiť analytický výkon, ale tiež významne prispievať k pokroku v oblastiach, ako sú klinická diagnostika, vývoj liekov a monitorovanie životného prostredia.

Odomknite tajomstvá správnej chromatografie prípravy liekovky na presnú a spoľahlivú analýzu iba v 6 jednoduchých krokoch.Čítajte ďalej, aby ste zvládli techniku! 6 krokov na prípravu injekčných liekoviek na chromatografiu na analýzu
Dopyt