Analytical vs. Preparative HPLC: Pochopenie kľúčových rozdielov
Znalosť
kategórie
Vyšetrovanie

Aký je rozdiel medzi analytickými a prípravnými HPLC?

30. augusta 2024

Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je kľúčová analytická technika používaná v laboratóriách v oblastiach tak rozmanitých ako farmaceutiká, environmentálne vedy a bezpečnosť potravín. Vo svete HPLC existujú dve hlavné kategórie: analytické HPLC a prípravné HPLC. Zatiaľ čo obe techniky používajú podobné princípy na samostatné zlúčeniny, používajú sa na rôzne účely a majú rôzne prevádzkové parametre. Tento blog preskúma rozdiely medzi analytickými a prípravnými HPLC vrátane ich účelu, rozsahu prevádzky, vybavenia a aplikácií.

Chcete sa dozvedieť úplné informácie o injekčných liekovkách HPLC, pozrite si tento článok: Encyklopédia hplc liekovky

Pochopenie analytického HPLC


Definícia a účel

Analytický HPLC sa zameriava predovšetkým na oddelenie a identifikáciu zlúčenín vo vzorke. Hlavným cieľom je získať kvalitatívne a kvantitatívne informácie o komponentoch prítomných v zmesi. Analytický HPLC sa často používa pre:

Kvalitatívna analýza: Identifikácia komponentov vzorky.

Kvantitatívna analýza: Stanovenie koncentrácie špecifickej zlúčeniny vo vzorke.


Činnosť

Analytical HPLC pracuje v menšom meradle, zvyčajne zahŕňajúci injekcie mikrolitrovej vzorky. Použité objemy sú zvyčajne v rozsahu 1 až 100 ul, čo umožňuje analyzovanie viacerých vzoriek v jednom behu. Tento malý rozsah je ideálny pre bežné testovanie a kontrolu kvality.


Veľkosť stĺpca a veľkosť častíc

Stĺpce použité v analytickom HPLC majú zvyčajne malý priemer, zvyčajne okolo 4,6 mm a sú balené malými stacionárnymi fázovými časticami (3-5 μm). Táto konfigurácia umožňuje vysoké rozlíšenie a účinné oddelenie zlúčenín, vhodné na podrobnú analýzu.


Detekčné metódy

Analytický HPLC využíva rôzne detekčné metódy vrátane UV-viditeľného, ​​fluorescencie a hmotnostnej spektrometrie. Výber detektora závisí od povahy analytu a špecifických požiadaviek analýzy. Nedesštruktívne detektory sa často používajú na zabezpečenie toho, aby sa vzorka mohla analyzovať bez výraznej straty.

Chcete poznať 50 odpovedí na hplc fľaštičky, pozrite si tento článok: 50 najčastejšie kladených otázok týkajúcich sa injekčných liekoviek HPLC


Pochopenie prípravného HPLC


Definícia a účel

Na druhej strane prípravný HPLC je cieľom oddeliť a čistiť špecifické zlúčeniny od zmesi. Hlavným cieľom je izolovať dostatočné množstvo cieľovej zlúčeniny na ďalšiu analýzu alebo použitie. Prípravný


HPLC sa bežne používa pre nasledujúce aplikácie:

Izolácia zlúčeniny: extrakcia a čistenie konkrétnych zlúčenín pre výskumné alebo priemyselné aplikácie.

Príprava vzorky: Príprava vzoriek na následnú analýzu alebo formuláciu.


Rozsah operácií

Preparatívne HPLC sa vykonáva vo väčšej miere ako analytické HPLC. Objemy vzorky sa môžu pohybovať od niekoľkých mililitrov po niekoľko litrov, v závislosti od očakávaného výťažku cieľovej zlúčeniny. Tento väčší rozsah umožňuje zhromažďovanie dostatočného množstva čisteného materiálu na ďalšie použitie.


Veľkosť stĺpca a veľkosť častíc

Stĺpce používané na prípravu HPLC sú výrazne väčšie, zvyčajne sa pohybujú od 20 mm do 100 mm alebo väčšieho priemeru. Stĺpce sú balené s väčšími stacionárnymi fázovými časticami (zvyčajne 10-20 um), aby sa zvýšili prietoky a prispôsobili sa väčším objemom vzoriek. Táto konštrukcia pomáha znižovať zadný tlak a dosahuje účinné oddelenie zlúčenín.


Detekčné metódy

Pri prípravnom HPLC sa detekčné metódy môžu líšiť od metód používaných v analytickom HPLC. Zatiaľ čo nedeštruktívne detektory sú stále bežné, prípravné systémy často používajú detektory, ktoré sú schopné zbierať frakcie na základe elučného profilu. To umožňuje izolovanie konkrétnych zlúčenín, keď sa eluujú zo stĺpca.

Chcete sa dozvedieť viac o aplikácii chromatografických liekoviek, pozrite si tento článok:Päť metód čistenia pre injekčné liekovky HPLC


Kľúčové rozdiely medzi analytickými a prípravnými HPLC

Funkcia

Analytický HPLC

Prípravný HPLC

Účel

Kvalitatívna a kvantitatívna analýza

Izolácia a čistenie zlúčenín

Činnosť

Malý rozsah (ul objemy)

Objemy rozsiahleho (ML až L)

Rozmery

Menší priemer (4,6 mm)

Väčší priemer (20-100 mm)

Veľkosť častíc

Menšie častice (3-5 µm)

Väčšie častice (10-20 um)

Prietok

Nižšie prietoky (0,1-5 ml \ / min)

Vyššie prietoky (10-200 ml \ / min)

Detekčné metódy

Nedeštruktívne detektory (UV, MS)

Zbierka frakcií založená na elučných profiloch


Výber medzi analytickými a prípravnými HPLC


Pri výbere medzi analytickými a prípravnými HPLC zvážte tieto faktory:

Účel analýzy: Určite, či je hlavným cieľom kvalitatívne a kvantitatívne analyzovať zlúčeniny alebo izolovať konkrétne zlúčeniny na ďalšie použitie.


Množstvo vzorky: Vyhodnoťte množstvo dostupnej vzorky. Ak je k dispozícii malé množstvo vzorky, môže byť vhodnejšia analytická HPLC. Naopak, ak sa vyžaduje veľké množstvo vzorky, preparatívna HPLC je lepšou voľbou.


Požadovaná čistota a výnos: Zvážte požadovanú čistotu a výťažok cieľovej zlúčeniny. Cieľom prípravy HPLC je maximalizovať obnovenie špecifickej zlúčeniny, zatiaľ čo analytický HPLC sa zameriava na poskytovanie podrobných informácií o zložení vzorky.


Zdroje a vybavenie: Vyhodnoťte dostupné zdroje vrátane vybavenia a rozpočtu. Preparatívne systémy HPLC majú tendenciu byť drahšie a vyžadujú viac investícií do zariadení a prevádzkových nákladov.


Máte záujem o zvládnutie prípravy vzorky HPLC? Pozrite sa na tento článok:Riešenia prípravy vzorky HPLC pre najlepšie výsledky.


Záver

Analytické aj prípravné HPLC sú cennými technikami v oblasti chromatografie a každá z nich má rôzne využitie v závislosti od potrieb výskumných pracovníkov a priemyslu. Zatiaľ čo analytický HPLC je ideálny na podrobnú analýzu a kvantifikáciu zlúčenín, prípravný HPLC je nevyhnutný na izoláciu a čistenie špecifických zlúčenín pre ďalšie aplikácie. Pochopenie rozdielov medzi týmito dvoma technikami pomôže výskumným pracovníkom robiť informované rozhodnutia, optimalizovať ich pracovné postupy a získať presné a spoľahlivé výsledky v ich analýze. Keďže technológia HPLC pokračuje v pokroku, analytické aj prípravné metódy zostanú neoddeliteľnou súčasťou úspešného vedeckého výskumu všetkého druhu.

Dopyt