mzteng.title.15.title
Novice
kategorije
Poizvedovanje

Vse, kar morate vedeti o pripravi vzorcev LCMS

20. septembra 2024
Priprava vzorca je kritičen korak v procesu spektrometrije tekočine s kromatografijo (LC-MS), ki vpliva na natančnost in zanesljivost analitičnih rezultatov. Glavni namen priprave vzorca je izvlečenje, čiščenje in koncentriranje analitov iz kompleksnih matric, s čimer je zagotoviti, da so združljivi z analizo LC-MS. Ta korak je ključnega pomena za odpravo morebitnih motenj, ki bi lahko vplivale na kakovost podatkov. Pravilna priprava vzorca izboljša občutljivost in specifičnost analize, ki je ključnega pomena za aplikacije na različnih področjih, kot so proteomika, presnova, farmacevtska analiza in okoljsko testiranje.

Ključni cilji priprave vzorca:

Odstranjevanje motenj: Odpravite snovi, ki lahko ovirajo odkrivanje ciljnih analitov.
Koncentracija analitov: povečajte koncentracijo analitov, da izboljšate meje odkrivanja.
Združljivost: vzorce pripravite na način, da jih lahko učinkovito analizirajo sistemi LC-MS.

Želite vedeti več o pripravi vzorca HPLC, preverite ta članek: HPLC Rešitve za pripravo vzorcev za najboljše rezultate


Skupne tehnike pri pripravi vzorcev LC-MS

Pri pripravi vzorcev LC-MS se običajno uporablja več tehnik. Vsaka metoda ima svoje prednosti in je izbrana na podlagi posebnih zahtev analize.

1. Trdna fazna ekstrakcija (SPE)

SPE se pogosto uporablja za izolacijo analitov iz tekočih vzorcev. Ta tehnika vključuje prehod vzorca skozi trdno stacionarno fazo, ki selektivno ohrani ciljne analize, hkrati pa omogoča, da se skozi druge komponente prehajajo. SPE je še posebej učinkovit za zapletene matrike, kot sta kri ali urin, in ponuja več koristi:
Visoke stopnje okrevanja: SPE običajno daje višje stopnje okrevanja v primerjavi s črpanjem tekočine-tekočine.
Združljivost avtomatizacije: metodo je mogoče enostavno avtomatizirati, izboljšati pretok in učinkovitost.

2. padavine za beljakovine

Padavine za beljakovine so preprosta, a učinkovita metoda za odstranjevanje beljakovin iz bioloških vzorcev. Ta tehnika je še posebej pomembna pri analizi vzorcev z visoko vsebnostjo beljakovin, kot sta plazma ali serum. Ta metoda z oborinimi beljakovinami poenostavi matrico in zmanjša motnje v nadaljnjih analizah.
Hitro in učinkovito: Omogoča hitro obdelavo vzorcev in hkrati ohranjanje dobrih stopenj okrevanja.

3. Ekstrakcija tekočine-tekočine (LLE)

LLE loči analize, ki temeljijo na njihovi topnosti v dveh nemisnih tekočinah - tipično vodno fazo in organsko topilo. Ta tehnika je uporabna za pridobivanje nepolarnih ali zmerno polarnih spojin iz zapletenih vodnih matric.
Vsestranska uporaba: LLE lahko prilagodimo za različne količine in vrste vzorcev, zaradi česar je primeren za široko paleto aplikacij.

4. derivatizacija

Derivatizacija vključuje kemično spreminjanje analitov za izboljšanje njihove zaznavnosti v analizi LC-MS. Ta proces izboljšuje lastnosti, kot sta nestanovitnost in učinkovitost ionizacije, zaradi česar je še posebej uporaben za spojine z nizko inherentno zaznavnostjo.
Izboljšana občutljivost: derivatizacija lahko znatno poveča občutljivost in selektivnost analiz za določene sestavljene razrede, kot so aminokisline ali steroidi.

Želite vedeti več o aplikacijah kromatografskih vialov, preverite ta članek: 15 Uporaba kromatografskih vialov na različnih poljih

Dejavniki, ki vplivajo na izbiro metode priprave vzorcev


Izbira ustrezne tehnike priprave vzorcev zahteva upoštevanje več dejavnikov:
Kemija analita: Razumevanje polarnosti, naboja in stabilnosti analitov je ključnega pomena.
Volumen vzorca in kompleksnost: Omejitve prostornine in kompleksnost vzorčne matrice lahko narekujejo, katere metode so izvedljive.
Zahteve za občutljivost: Različne aplikacije imajo lahko različne potrebe po občutljivosti, ki vplivajo na izbiro metod.
Laboratorijski viri: Razpoložljivost opreme za avtomatizacijo ali ročno obdelavo lahko vpliva na izbiro tehnike.

Najboljše prakse za učinkovito pripravo vzorcev


Za doseganje optimalnih rezultatov pri analizi LC-MS je bistveno spoštovanje najboljših praks med pripravo vzorcev:
Standardizacija: Razviti standardizirane protokole, da se zagotovi doslednost med analizami.
Validacija: Redno potrdite metode za potrditev njihove zanesljivosti in natančnosti.
Zmanjšajte ravnanje z vzorci: Zmanjšajte število manipulacij, da preprečite izgubo ali kontaminacijo.
Uporabite kakovostne reagente: Uporabite visokokakovostne reagente, da se izognete uvajanju nečistoč v vzorce.
Postopki dokumentov: Podrobne zapise o vseh postopkih za lažjo odpravljanje težav in optimizacijo metod.

Zaključek

Učinkovita priprava vzorca je temeljna za uspešno analizo LC-MS. Z razumevanjem različnih tehnik, kot so SPE, padavine beljakovin, LLE in derivatizacija, lahko analitiki izberejo najprimernejšo metodo za svoje posebne zahteve. Poleg tega bo sledenje najboljših prakse izboljšalo kakovost podatkov in zagotovilo zanesljive rezultate za različne aplikacije v raziskovalnih in industrijskih nastavitvah.
Na koncu obvladovanje tehnik priprave vzorcev ne more samo izboljšati analitične zmogljivosti, ampak tudi pomembno prispevati k napredku na področjih, kot so klinična diagnostika, razvoj zdravil in spremljanje okolja.

Odklenite skrivnosti pravilne kromatografije Priprave viale za natančno in zanesljivo analizo v samo 6 preprostih korakih.Preberite si, da obvladate tehniko! 6 korakov za pripravo kromatografskih vialov za analizo
Povpraševanje