HPLC proti LCMS: Kaj izbrati? 5 ključnih točk, ki jih je treba upoštevati
Novice
kategorije
Poizvedovanje

HPLC proti LCMS: Katerega izbrati? 5 točk

22. avgusta 2024
Visokozmogljiva tekoča kromatografija (HPLC) in tekoča kromatografija-masna spektrometrija (LCMS) sta dve močni analitični tehniki, ki se uporabljata na različnih področjih, vključno s farmacevtskimi izdelki, okoljskimi vedami in znanostmi o življenju. Medtem ko obe metodi vključujeta ločitev in analizo spojin, so njihova načela, funkcije in aplikacije zelo različni. Ta objava na spletnem dnevniku bo primerjala HPLC in LCM, s poudarkom na njihovih ključnih razlikah in prednosti vsake tehnike.

Načelo delovanja


HPLC


HPLC je kromatografska tehnika, ki ločuje spojine na podlagi njihovih interakcij s stacionarnimi in mobilnimi fazami. V HPLC se tekoča mobilna faza črpa skozi stolpec, napolnjen s stacionarno fazo, ki je običajno sestavljena iz majhnih delcev silicijevega dioksida ali polimerov. Ko se v sistem vnese vzorčna zmes, se komponente ločijo na podlagi njihove afinitete do stacionarne faze. Spojine, ki močneje delujejo s stacionarnim faznim elutom počasneje, medtem ko spojine, ki medsebojno delujejo manj močno, hitreje eluirajo. Ločene spojine se nato odkrijejo z uporabo različnih detektorjev, kot so UV-vis, fluorescenca ali detektorji indeksa refrakcije.

Želite vedeti več o aplikacijah kromatografskih vialov, preverite ta članek:15 Uporaba kromatografskih vialov na različnih poljih


LCMS


LCMS združuje zmogljivosti ločevanja HPLC z zmogljivostmi masne analize masne spektrometrije. V LCM se vzorci najprej ločijo z uporabo HPLC, tako kot v običajnem HPLC. Vendar pa se eluirane spojine, namesto da bi jih zaznali običajni detektor, vnesejo v masni spektrometer. Masni spektrometer ionizira spojine in meri njihovo razmerje med maso in nabojem, kar zagotavlja podrobne informacije o molekulski masi in strukturi analita. Ta kombinacija ločevanja in masne spektrometrije zagotavlja večjo občutljivost in specifičnost kot samo HPLC.


Mehanizem ločevanja


HPLC:HPLC uporablja visok tlak za potiskanje tekoče mobilne faze skozi pakirano stolpec, ki vsebuje stacionarno fazo. Spojine so ločene na podlagi njihovih diferencialnih interakcij s stacionarno fazo, kar ima za posledico natančne in učinkovite ločitve.

LCMS:LCMS združuje fizične zmogljivosti HPLC z zmogljivostmi masne spektrometrije masne spektrometrije (MS). Tekoči kromatografija loči spojine, masni spektrometer pa meri razmerje med masami in nabojem pri ioniziranih vrstah.

Občutljivost in selektivnost

HPLC:HPLC ima dobro občutljivost in selektivnost, zlasti v kombinaciji z naprednimi detektorji, kot so UV-vis, fluorescenca ali detektorji matrike diode. Vendar samo HPLC morda ne bo zagotovil ustrezne specifičnosti za zapletene vzorce.

LCMS:LCMS ima vrhunsko občutljivost in selektivnost v primerjavi s HPLC. Masni spektrometri lahko natančno prepoznajo in količinsko opredelijo spojine na podlagi njihovih edinstvenih razmerij med masami in nabojem, tudi v zapletenih matricah. Zaradi tega so LCM -ji še posebej koristni za analizo spojin v sledovih in potrditev identitete neznanih snovi.


Priprava vzorca


HPLC:Priprava vzorca za HPLC običajno vključuje redčenje, filtracijo ali preproste tehnike ekstrakcije. Vzorcev ni treba izhlapevati, zato je HPLC primeren za širok razpon spojin, vključno s polarnimi in nehlapnimi snovmi.


LCMS:Priprava vzorca za LCM je podobna kot pri HPLC, vendar bodo morda potrebni dodatni koraki, da se zagotovi združljivost z masnim spektrometrom. Na primer, za izboljšanje ionizacije in preprečevanje zatiranja ionov bodo morda potrebni hlapni puferji ali dodatki.

Prijave


HPLC:HPLC se pogosto uporablja za analizo farmacevtskih izdelkov, hrane in okoljskih vzorcev. Posebej je učinkovit za ločevanje in količinsko določanje spojin v zapletenih mešanicah, kot so nečistoče v drogah, aditivi za hrano in ostanki pesticidov.

LCMS:LCMS ima široko paleto aplikacij, vključno z:

Farmacevtska analiza: Uporablja se pri odkrivanju, razvoju in nadzoru kakovosti zdravil.

Proteomika in presnova: Uporablja se za prepoznavanje in količinsko določitev beljakovin in presnovkov v bioloških vzorcih.

Analiza okolja: Uporablja se za odkrivanje onesnaževal v sledovih v vzorcih vode, tal in zraka.

Zanimivo o vlogi certificiranih viale HPLC pri zagotavljanju natančne analize vzorcev? Preberite ta članek: Pomen certificiranih viale HPLC za natančno analizo vzorca

Zaključek

HPLC in LCMS sta močna analitična tehnika z lastnimi močmi in omejitvami. Izbira med obema je odvisna od posebnih zahtev analize, kot so občutljivost, selektivnost, zapletenost vzorca in razpoložljivi viri.

HPLC je dobra izbira za rutinsko analizo znanih spojin v razmeroma preprostih matrikah, kjer sta stroški in enostavnost uporabe pomembni dejavniki. LCMS je na drugi strani najprimernejša tehnika za analizo kompleksnih vzorcev, prepoznavanje neznanih spojin in doseganje odkrivanja ravni ultra sledenja.

Ker tehnologija še naprej napreduje, bo integracija HPLC in LCM igrala vse pomembnejšo vlogo pri zadovoljevanju razvijajočih se potreb analitične kemije in zagotavljanju kakovostnih rezultatov v različnih aplikacijah.

Povpraševanje