Vet du om papperskromatografi?

Papperskromatografi är en allmänt använt analytisk teknik som separerar och identifierar blandningar av ämnen baserat på deras olika affiniteter för en stationär fas (papper) och en mobil fas (lösningsmedel). Det är särskilt användbart vid kemi och biokemi för att analysera små mängder ämnen som pigment, aminosyror och andra organiska föreningar.

Vad är papperskromatografi?

Papperskromatografi är en typ av vätskekromatografi där den stationära fasen är ett ark med filterpapper och den mobila fasen är lösningsmedlet som rinner genom filterpapperet. Tekniken förlitar sig på differentiell partitionering av föreningar mellan den stationära fasen (filterpapper) och mobilfasen (lösningsmedel). När lösningsmedlet rör sig upp filterpapperet genom kapillärverkan, bär det komponenterna i blandningen i olika hastigheter baserat på deras affinitet för de två faserna.

De grundläggande principerna bakom papperskromatografi kan förstås genom två huvudbegrepp: partitionskromatografi och adsorptionskromatografi.

Partitionskromatografi: I denna typ fördelas ämnen mellan två flytande faser. Den stationära fasen består av vatten i porerna i filterpapperet, medan det mobila fasen är lösningsmedlet som rör sig genom dessa porer. Separationen sker eftersom olika föreningar har olika affiniteter för de stationära och mobila faserna.

Adsorptionskromatografi: Här fungerar den fasta ytan på papperet som den stationära fasen och vätskelösningsmedlet fungerar som den mobila fasen. Komponenterna i blandningen separeras baserat på deras adsorption till den fasta ytan och deras löslighet i vätskefasen.

Komponenter

Stationär fas: Kromatografiskt papper, vanligtvis tillverkat av cellulosa. Det ger en yta för komponenterna att följa.

Mobilfas: lösningsmedlet eller blandningen av lösningsmedel som rör sig på papperet genom kapillärverkan. Valet av lösningsmedel kan påverka separationsprocessen avsevärt.

Prov: Blandningen som ska analyseras, vanligtvis upptäckt vid en angiven utgångspunkt på papperet.

Vill du veta mer om HPLC -provberedning, kontrollera den här artikeln: HPLC -provberedningslösningar för bästa resultat

Papperskromatografi

Förberedelse: Välj ett högkvalitativt filterpapper med en viss porositet för att säkerställa effektiv separering. Applicera en liten del av provblandningen på baslinjen i kromatografidokumentet.

Provberedning: Lös upp provblandningen i ett lämpligt lösningsmedel som en del av den mobila fasen.

Spotting: Använd en kapillär eller mikropipett för att släppa en liten mängd av provlösningen på baslinjen på filterpapperet.

Utveckling: Doppa testpapperets nedre kant i det utvecklande lösningsmedlet (mobilfas). När kapillärverkan inträffar stiger lösningsmedlet genom testpapperet och bär provkomponenterna med det.

Separation: När lösningsmedlet rör sig kommer olika komponenter i provet att röra sig i olika hastigheter på grund av deras interaktion med den stationära fasen och olika löslighet i den mobila fasen.

Visualisering: Efter att lösningsmedelsfronten har rört sig ett tillräckligt avstånd, avlägsnas papperet från lösningsmedlet och lämnas för att torka. Komponenterna kan visualiseras med UV -ljus, kemiska reagens eller genom att observera färgförändringar.

Analys: Avståndet som körs av varje komponent relativt lösningsmedelsfronten mäts för att beräkna RF -värdet (retentionsfaktor) för identifiering.

Applikationer av papperskromatografi

Papperskromatografi har ett brett utbud av applikationer inom olika områden:

Biokemi: Analys av aminosyror, sockerarter och andra biomolekyler.

Läkemedel: Identifiering av aktiva ingredienser och föroreningar i läkemedelsformuleringar. Används för att identifiera aktiva föreningar och föroreningar i läkemedelsformuleringar under utveckling och kvalitetskontroll.

Miljövetenskap: Papperskromatografi används för att upptäcka föroreningar i vattenprover och analysera föroreningar i jordekstrakt.

Livsmedelsindustrin: Tekniken hjälper till att analysera tillsatser, föroreningar och färgämnen i livsmedel för att säkerställa att säkerhetsbestämmelserna följs.

Fördelar med papperskromatografi

Kostnadseffektivitet: Det kräver minimal utrustning och material jämfört med andra kromatografiska tekniker såsom HPLC (högpresterande vätskekromatografi). Enkelhet: Processen är mycket enkel och kan utföras med grundläggande laboratorieverktyg, så den kan användas för utbildningsändamål.

Låg provvolymkrav: Endast en liten mängd prov krävs för analys, vilket gör det idealiskt för värdefulla eller begränsade prover.

Mångsidighet: Det kan separera ett brett spektrum av ämnen baserade på kemiska egenskaper, inklusive polära och icke-polära föreningar

Begränsningar av papperskromatografi

Trots sina fördelar har papperskromatografi vissa begränsningar:

Begränsad kapacitet: Generellt lämplig för små provvolymer.

Upplösning: Upplösningen kanske inte är så hög som den uppnås med mer avancerade tekniker som HPLC eller gaskromatografi (GC).

Tidskrävande: På grund av den långsammare migreringshastigheten kan processen ta längre tid jämfört med andra kromatografiska metoder.

Begränsad kvantitativ analys: Även om kvalitativa resultat enkelt kan erhållas kan ytterligare kalibreringsmetoder krävas för att kvantifiera koncentrationer.

Papperskromatografi är fortfarande en värdefull teknik för att separera och analysera blandningar inom olika vetenskapliga områden. Dess enkelhet, kostnadseffektivitet och förmåga att ge intuitiva resultat gör det till ett viktigt verktyg för kemister och forskare. Trots dess begränsningar jämfört med mer avancerade kromatografiska tekniker används den fortfarande allmänt för utbildningsändamål och preliminär analys i laboratorier.

Vill du veta 50 svar om HPLC -injektionsflaskor, kontrollera den här artikeln: 50 vanligaste frågor om HPLC -injektionsflaskor