การเตรียมตัวอย่างเป็นขั้นตอนที่สำคัญในกระบวนการของเหลวโครมาโตกราฟี มวล (LC MS) ของเหลวซึ่งมีอิทธิพลต่อความแม่นยำและความน่าเชื่อถือของผลการวิเคราะห์ วัตถุประสงค์หลักของการเตรียมตัวอย่างคือการสกัดชำระล้างและสมาธิวิเคราะห์จากเมทริกซ์ที่ซับซ้อนเพื่อให้แน่ใจว่าพวกเขาเข้ากันได้กับการวิเคราะห์ LC MS ขั้นตอนนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการกำจัดการรบกวนที่อาจเกิดขึ้นซึ่งอาจส่งผลกระทบต่อคุณภาพข้อมูล การเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมช่วยเพิ่มความไวและความจำเพาะของการวิเคราะห์ซึ่งเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการใช้งานในสาขาต่าง ๆ เช่นโปรตีโอมิกส์เมแทบอลิซึมการวิเคราะห์ยาและการทดสอบด้านสิ่งแวดล้อม

วัตถุประสงค์หลักของการเตรียมตัวอย่าง:

การกำจัดการรบกวน: กำจัดสารที่อาจรบกวนการตรวจจับการวิเคราะห์เป้าหมาย

ความเข้มข้นของการวิเคราะห์: เพิ่มความเข้มข้นของการวิเคราะห์เพื่อปรับปรุงขีด จำกัด การตรวจจับ

ความเข้ากันได้: เตรียมตัวอย่างในลักษณะที่สามารถวิเคราะห์ได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยระบบ LC MS

ต้องการทราบข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่าง HPLC โปรดตรวจสอบบทความนี้: โซลูชั่นการเตรียมตัวอย่าง HPLC เพื่อผลลัพธ์ที่ดีที่สุด

เทคนิคทั่วไปในการเตรียมตัวอย่าง LC MS

เทคนิคหลายอย่างมักใช้ในการเตรียมตัวอย่าง LC MS แต่ละวิธีมีข้อได้เปรียบของตัวเองและถูกเลือกตามข้อกำหนดเฉพาะของการวิเคราะห์

1. การสกัดเฟสของแข็ง (SPE)

SPE ใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกวิเคราะห์จากตัวอย่างของเหลว เทคนิคนี้เกี่ยวข้องกับการส่งตัวอย่างผ่านเฟสคงที่ของแข็งที่เลือกรักษาเป้าหมายการวิเคราะห์ในขณะที่ช่วยให้ส่วนประกอบอื่น ๆ ผ่าน SPE มีประสิทธิภาพโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเมทริกซ์ที่ซับซ้อนเช่นเลือดหรือปัสสาวะและให้ประโยชน์หลายประการ:

อัตราการกู้คืนที่สูง: โดยทั่วไปแล้ว SPE จะให้อัตราการกู้คืนที่สูงขึ้นเมื่อเทียบกับการสกัดของเหลวของเหลว

ความเข้ากันได้ของระบบอัตโนมัติ: วิธีนี้สามารถเป็นไปโดยอัตโนมัติได้อย่างง่ายดายเพิ่มปริมาณงานและประสิทธิภาพ

2. การตกตะกอนโปรตีน

การตกตะกอนของโปรตีนเป็นวิธีที่ง่าย แต่มีประสิทธิภาพในการกำจัดโปรตีนออกจากตัวอย่างทางชีวภาพ เทคนิคนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างที่มีปริมาณโปรตีนสูงเช่นพลาสมาหรือซีรั่ม โดยการตกตะกอนโปรตีนวิธีนี้ทำให้เมทริกซ์ลดความซับซ้อนและลดการรบกวนในการวิเคราะห์ที่ตามมา

รวดเร็วและมีประสิทธิภาพ: ช่วยให้สามารถประมวลผลตัวอย่างได้อย่างรวดเร็วในขณะที่ยังคงอัตราการกู้คืนที่ดี

3. การสกัดของเหลวของเหลว (LLE)

LLE แยกการวิเคราะห์ตามความสามารถในการละลายของพวกเขาในของเหลวสองชนิดที่ไม่สามารถเข้าใจได้ โดยทั่วไปแล้วเฟสน้ำและตัวทำละลายอินทรีย์ เทคนิคนี้มีประโยชน์สำหรับการสกัดสารประกอบขั้วที่ไม่ใช่ขั้วหรือขั้วในระดับปานกลางจากเมทริกซ์น้ำที่ซับซ้อน

แอปพลิเคชั่นอเนกประสงค์: สามารถปรับให้เข้ากับปริมาณตัวอย่างและประเภทต่างๆทำให้เหมาะสำหรับการใช้งานที่หลากหลาย

4. การ derivatization

Derivatization เกี่ยวข้องกับการปรับเปลี่ยนการวิเคราะห์ทางเคมีเพื่อเพิ่มความสามารถในการตรวจจับในการวิเคราะห์ LC MS กระบวนการนี้ปรับปรุงคุณสมบัติเช่นความผันผวนและประสิทธิภาพการแตกตัวเป็นไอออนทำให้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับสารประกอบที่มีการตรวจจับโดยธรรมชาติต่ำ

ความไวที่เพิ่มขึ้น: การสร้างอนุพันธ์สามารถเพิ่มความไวและการเลือกสรรของการวิเคราะห์สำหรับคลาสผสมเฉพาะเช่นกรดอะมิโนหรือสเตียรอยด์

ต้องการทราบข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับแอปพลิเคชันของขวดโครมาโตกราฟีโปรดตรวจสอบบทความนี้: 15 แอปพลิเคชันของขวดโครมาโตกราฟีในสาขาต่าง ๆ

ปัจจัยที่มีผลต่อการเลือกวิธีการเตรียมตัวอย่าง

การเลือกเทคนิคการเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมต้องพิจารณาปัจจัยหลายประการ:

เคมีวิเคราะห์: การทำความเข้าใจขั้ว, ประจุและความเสถียรของการวิเคราะห์เป็นสิ่งสำคัญ

ปริมาณตัวอย่างและความซับซ้อน: ข้อ จำกัด ระดับเสียงและความซับซ้อนของเมทริกซ์ตัวอย่างสามารถกำหนดวิธีการที่เป็นไปได้

ข้อกำหนดด้านความไว: แอปพลิเคชันที่แตกต่างกันอาจมีความต้องการความไวที่แตกต่างกันซึ่งมีอิทธิพลต่อการเลือกวิธีการ

ทรัพยากรห้องปฏิบัติการ: ความพร้อมใช้งานของอุปกรณ์สำหรับระบบอัตโนมัติหรือการประมวลผลด้วยตนเองอาจส่งผลกระทบต่อการเลือกใช้เทคนิค

แนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดสำหรับการเตรียมตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพ

เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดในการวิเคราะห์ LC MS การยึดติดกับแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดในระหว่างการเตรียมตัวอย่างเป็นสิ่งจำเป็น:

มาตรฐาน: พัฒนาโปรโตคอลมาตรฐานเพื่อให้แน่ใจว่ามีความสอดคล้องในการวิเคราะห์

การตรวจสอบ: ตรวจสอบวิธีการอย่างสม่ำเสมอเพื่อยืนยันความน่าเชื่อถือและความแม่นยำ

ลดการจัดการตัวอย่าง: ลดจำนวนการจัดการเพื่อป้องกันการสูญเสียหรือการปนเปื้อน

ใช้รีเอเจนต์ที่มีคุณภาพ: ใช้รีเอเจนต์คุณภาพสูงเพื่อหลีกเลี่ยงการแนะนำสิ่งสกปรกในตัวอย่าง

ขั้นตอนเอกสาร: เก็บบันทึกโดยละเอียดของขั้นตอนทั้งหมดเพื่ออำนวยความสะดวกในการแก้ไขปัญหาและการเพิ่มประสิทธิภาพวิธีการ

บทสรุป

การเตรียมตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพเป็นพื้นฐานของการวิเคราะห์ LC MS ที่ประสบความสำเร็จ โดยการทำความเข้าใจเทคนิคต่าง ๆ เช่น SPE, การตกตะกอนโปรตีน, LLE และการ derivatization นักวิเคราะห์สามารถเลือกวิธีที่เหมาะสมที่สุดสำหรับข้อกำหนดเฉพาะของพวกเขา นอกจากนี้การปฏิบัติตามแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดจะปรับปรุงคุณภาพข้อมูลและให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้สำหรับแอพพลิเคชั่นที่แตกต่างกันในการวิจัยและการตั้งค่าอุตสาหกรรม

โดยสรุปเทคนิคการเตรียมตัวอย่างการเรียนรู้ไม่เพียง แต่สามารถปรับปรุงประสิทธิภาพการวิเคราะห์ แต่ยังมีส่วนร่วมอย่างมีนัยสำคัญต่อความก้าวหน้าในด้านต่าง ๆ เช่นการวินิจฉัยทางคลินิกการพัฒนายาและการตรวจสอบด้านสิ่งแวดล้อม

ปลดล็อกความลับของการเตรียมขวดโครมาโตกราฟีที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ที่ถูกต้องและเชื่อถือได้ในเพียง 6 ขั้นตอนง่ายๆอ่านเพื่อฝึกฝนเทคนิค! 6 ขั้นตอนในการเตรียมขวดโครมาโตกราฟีสำหรับการวิเคราะห์

LCMS vs GCMS: เทคนิคใดที่ดีที่สุดสำหรับการวิจัยของคุณ?

ต่อไป:

TOC Vial และความสำคัญของโครมาโตกราฟีคืออะไร?