คุณรู้เกี่ยวกับกระดาษโครมาโตกราฟีหรือไม่?

Paper Chromatography เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายซึ่งแยกและระบุส่วนผสมของสารตามความสัมพันธ์ที่แตกต่างกันสำหรับเฟสคงที่ (กระดาษ) และเฟสเคลื่อนที่ (ตัวทำละลาย) มันมีประโยชน์อย่างยิ่งในวิชาเคมีและชีวเคมีสำหรับการวิเคราะห์สารในปริมาณเล็กน้อยเช่นเม็ดสีกรดอะมิโนและสารประกอบอินทรีย์อื่น ๆ

กระดาษโครมาโตกราฟีคืออะไร?

Paper Chromatography เป็นโครมาโตกราฟีของเหลวชนิดหนึ่งซึ่งเฟสคงที่เป็นแผ่นกระดาษกรองและเฟสเคลื่อนที่เป็นตัวทำละลายที่ไหลผ่านกระดาษกรอง เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับการแบ่งพาร์ติชันที่แตกต่างกันของสารประกอบระหว่างเฟสคงที่ (กระดาษกรอง) และเฟสเคลื่อนที่ (ตัวทำละลาย) ในขณะที่ตัวทำละลายเลื่อนกระดาษกรองโดยการกระทำของเส้นเลือดฝอยมันจะดำเนินการส่วนประกอบของส่วนผสมในอัตราที่แตกต่างกันตามความสัมพันธ์ของพวกเขาสำหรับทั้งสองเฟส

หลักการพื้นฐานที่อยู่เบื้องหลังโครมาโตกราฟีกระดาษสามารถเข้าใจได้ผ่านแนวคิดหลักสองประการ: พาร์ติชันโครมาโตกราฟีและโครมาโตกราฟีการดูดซับ

พาร์ติชันโครมาโตกราฟี: ในประเภทนี้สารจะถูกกระจายระหว่างสองเฟสของเหลว เฟสคงที่ประกอบด้วยน้ำในรูขุมขนของกระดาษกรองในขณะที่เฟสเคลื่อนที่เป็นตัวทำละลายที่เคลื่อนที่ผ่านรูขุมขนเหล่านี้ การแยกเกิดขึ้นเนื่องจากสารประกอบที่แตกต่างกันมีความสัมพันธ์ที่แตกต่างกันสำหรับเฟสที่อยู่กับที่และมือถือ

การดูดซับโครมาโตกราฟี: ที่นี่พื้นผิวที่เป็นของแข็งของกระดาษทำหน้าที่เป็นเฟสที่อยู่กับที่และตัวทำละลายของเหลวทำหน้าที่เป็นเฟสเคลื่อนที่ ส่วนประกอบในส่วนผสมจะถูกแยกออกจากการดูดซับไปยังพื้นผิวที่เป็นของแข็งและความสามารถในการละลายในเฟสของเหลว

ส่วนประกอบ

เฟสคงที่: กระดาษโครมาโตกราฟีมักจะทำจากเซลลูโลส มันให้พื้นผิวสำหรับส่วนประกอบที่จะปฏิบัติตาม

เฟสมือถือ: ตัวทำละลายหรือส่วนผสมของตัวทำละลายที่เคลื่อนที่บนกระดาษโดยการกระทำของเส้นเลือดฝอย ทางเลือกของตัวทำละลายอาจส่งผลกระทบต่อกระบวนการแยกอย่างมีนัยสำคัญ

ตัวอย่าง: ส่วนผสมที่จะวิเคราะห์มักจะพบที่จุดเริ่มต้นที่กำหนดบนกระดาษ

ต้องการทราบข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่าง HPLC โปรดตรวจสอบบทความนี้: โซลูชั่นการเตรียมตัวอย่าง HPLC เพื่อผลลัพธ์ที่ดีที่สุด

กระบวนการโครมาโตกราฟีกระดาษ

การเตรียมการ: เลือกกระดาษกรองคุณภาพสูงที่มีความพรุนบางอย่างเพื่อให้แน่ใจว่ามีการแยกที่มีประสิทธิภาพ ใช้ส่วนผสมตัวอย่างเล็ก ๆ น้อย ๆ กับพื้นฐานของกระดาษโครมาโตกราฟี

การเตรียมตัวอย่าง: ละลายส่วนผสมตัวอย่างในตัวทำละลายที่เหมาะสมซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของเฟสมือถือ

การพบ: ใช้เส้นเลือดฝอยหรือ micropipette เพื่อวางสารละลายตัวอย่างจำนวนเล็กน้อยบนพื้นฐานบนกระดาษกรอง

การพัฒนา: จุ่มขอบด้านล่างของกระดาษทดสอบลงในตัวทำละลายที่กำลังพัฒนา (เฟสมือถือ) เมื่อการกระทำของเส้นเลือดฝอยเกิดขึ้นตัวทำละลายจะเพิ่มขึ้นผ่านกระดาษทดสอบซึ่งมีส่วนประกอบตัวอย่างด้วย

การแยก: เมื่อตัวทำละลายเคลื่อนที่ส่วนประกอบที่แตกต่างกันของตัวอย่างจะเคลื่อนที่ในอัตราที่แตกต่างกันเนื่องจากการมีปฏิสัมพันธ์กับเฟสคงที่และความสามารถในการละลายที่แตกต่างกันในเฟสมือถือ

การสร้างภาพ: หลังจากที่ตัวทำละลายด้านหน้าขยับระยะทางที่เพียงพอกระดาษจะถูกลบออกจากตัวทำละลายและปล่อยให้แห้ง ส่วนประกอบสามารถมองเห็นได้โดยใช้แสง UV, รีเอเจนต์เคมีหรือโดยการสังเกตการเปลี่ยนแปลงสี

การวิเคราะห์: ระยะทางที่เดินทางโดยแต่ละองค์ประกอบที่สัมพันธ์กับด้านหน้าของตัวทำละลายถูกวัดเพื่อคำนวณค่า RF (ปัจจัยการเก็บรักษา) สำหรับการระบุ

การประยุกต์ใช้กระดาษโครมาโตกราฟี

กระดาษโครมาโตกราฟีมีการใช้งานที่หลากหลายในสาขาต่าง ๆ :

ชีวเคมี: การวิเคราะห์กรดอะมิโนน้ำตาลและชีวโมเลกุลอื่น ๆ

ยา: การระบุส่วนผสมที่ใช้งานและสิ่งสกปรกในสูตรยา ใช้ในการระบุสารประกอบที่ใช้งานและสิ่งสกปรกในสูตรยาในระหว่างการพัฒนาและการควบคุมคุณภาพ

วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม: กระดาษโครมาโตกราฟีใช้ในการตรวจจับสิ่งปนเปื้อนในตัวอย่างน้ำและวิเคราะห์สารปนเปื้อนในสารสกัดจากดิน

อุตสาหกรรมอาหาร: เทคนิคนี้ช่วยในการวิเคราะห์สารเติมแต่งสารปนเปื้อนและสีในอาหารเพื่อให้แน่ใจว่าสอดคล้องกับกฎระเบียบด้านความปลอดภัย

ข้อดีของกระดาษโครมาโตกราฟี

ประสิทธิผลของต้นทุน: ต้องใช้อุปกรณ์และวัสดุน้อยที่สุดเมื่อเทียบกับเทคนิคการโครมาโตกราฟีอื่น ๆ เช่น HPLC (โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง) ความเรียบง่าย: กระบวนการนี้ง่ายมากและสามารถทำได้ด้วยเครื่องมือในห้องปฏิบัติการขั้นพื้นฐานดังนั้นจึงสามารถใช้เพื่อการศึกษา

ความต้องการปริมาณตัวอย่างต่ำ: จำเป็นต้องมีตัวอย่างเพียงเล็กน้อยสำหรับการวิเคราะห์ทำให้เหมาะสำหรับตัวอย่างที่มีค่าหรือ จำกัด

ความเก่งกาจ: สามารถแยกสารที่หลากหลายขึ้นอยู่กับคุณสมบัติทางเคมีรวมถึงสารประกอบขั้วและไม่ใช่ขั้วโลก

ข้อ จำกัด ของกระดาษโครมาโตกราฟี

แม้จะมีข้อได้เปรียบ แต่โครมาโตกราฟีกระดาษมีข้อ จำกัด บางประการ:

ความจุที่ จำกัด : โดยทั่วไปเหมาะสำหรับปริมาณตัวอย่างขนาดเล็ก

ความละเอียด: ความละเอียดอาจไม่สูงเท่าที่ทำได้โดยเทคนิคขั้นสูงเช่น HPLC หรือแก๊สโครมาโตกราฟี (GC)

การใช้เวลานาน: เนื่องจากอัตราการย้ายถิ่นที่ช้าลงกระบวนการอาจใช้เวลานานกว่าเมื่อเทียบกับวิธีการโครมาโตกราฟีอื่น ๆ

การวิเคราะห์เชิงปริมาณที่ จำกัด : ในขณะที่สามารถรับผลลัพธ์เชิงคุณภาพได้อย่างง่ายดายอาจต้องใช้วิธีการสอบเทียบเพิ่มเติมเพื่อหาปริมาณความเข้มข้น

กระดาษโครมาโตกราฟียังคงเป็นเทคนิคที่มีค่าสำหรับการแยกและวิเคราะห์สารผสมในสาขาวิทยาศาสตร์ที่หลากหลาย ความเรียบง่ายความคุ้มค่าและความสามารถในการให้ผลลัพธ์ที่ใช้งานง่ายทำให้เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับนักเคมีและนักวิจัย แม้จะมีข้อ จำกัด เมื่อเทียบกับเทคนิคการโครมาโตกราฟีขั้นสูง แต่ก็ยังคงใช้กันอย่างแพร่หลายเพื่อวัตถุประสงค์ทางการศึกษาและการวิเคราะห์เบื้องต้นในห้องปฏิบัติการ

ต้องการทราบ 50 คำตอบเกี่ยวกับขวด HPLC โปรดตรวจสอบบทความนี้: 50 คำถามที่พบบ่อยที่สุดเกี่ยวกับขวด HPLC