Aug. 20th, 2024
Mokhoa o phahameng oa ts'ebetso oa chromatography (HPTC) ke mokhoa o sebelisoang haholo oa tlhahlobo o phethang karolo ea bohlokoa masimong, mahlale a tikoloho le polokeho ea lijo. Leha ho le joalo, katleho ea tlhahlobo ea HPSC e itšetlehile haholo ka boleng ba sampole. Ho hlophisoa ka mokhoa o nepahetseng oa mohlala ho etsa bonnete ba ho qotsa tse nepahetseng tsa sepheo ebile li eketsa litšitiso. Tataiso ena e felletseng e akaretsa ntho e ngoe le e ngoe eo u lokelang ho ithuta ka eona ka bohlokoa, ho kenyelletsa bohlokoa ba eona, mekhoa e metle, mekhoa e metle, e leng malebela a thata le ho rarolla mathata.
U batla ho tseba haholoanyane ka lits'ebetso tsa li-varomatography tsa chromatography, ka kopo sheba sengoloa sena: Likopo tse 15 tsa likhama tsa chromatography masimong a fapaneng
Bohlokoa ba ho lokisetsoa HPLC
Litokisetso tsa sampole ke mohato o sa sebetseng ho setsebi sa HPLC ka mabaka a 'maloa.
Fokotsa litšitiso:Hangata lisamona hangata li na le litšila le likarolo tsa matrix tse ka sitisang ho fumanoa ha li hlahlojoa. Mekhoa e sebetsang ea mohlala e ka thusa ho tlosa lintho tsena tse sa batleheng 'me li ntlafatse ho nepahala ha tlhahlobo.
Ntlafatsa ho hlaphoheloa.Ho itokisetsa ka nepo ho ntlafatsa ho hlaphoheloa 'me u netefatse hore ho bile le takatso ea mantlha ea sampole ea mantlha. Sena ke sa bohlokoa haholo ho tlhahlobo ea ho tjeka moo ho hlahlojoang e teng ka mahlomoleng a tlase.
Ntlafatsa sebopeho sa Peak:Lisalomo tse phepo li thusa ho theha litlhoro tsa sebopeho le tse hlalositsoeng hantle chromatogram. Sena se bohlokoa bakeng sa lipalo tse nepahetseng. Litokisetso tse fosahetseng li ka fella ka ho sisinyeha hoa tlholeho le ho atolosa, se lumellang tlhaloso ea data.
Sireletsa Sisteme ea hau ea HPST:Liponko tsa hau tsa sampole li ka senya li-collem le likarolo tse ling tsamaisong ea HPLC, e lebisang litšenyehelo tsa ho eketsa le phomolo. Litokisetso tse nepahetseng tsa sampole li fokotsa menyetla ea ho koaloa le ho roala.
Mehato ea Bohlokoa ho Plust sampole ea HPPC
1. Pokello ea mohlala
Mohato oa pele oa ho hlophisa mohlala ke ho bokella mohlala oa hau ka nepo. Sena se kenyeletsa:
Sebelisa lijana tse hloekileng:Sebelisa litloebele tse hloekileng, tse iketlileng ho qoba tšilafalo. Khalase ea khalase kapa lijana tsa polasetiki tse phahameng.
Qoba Ho Siona:Sebelisa liatlana le lisebelisoa tse hloekileng tsa ho thibela litšila ho tsoa ho Sebum le mehloli e meng.
Ho Ngola ka nepo:Ho hlakile hore mehlala ea ho qoba ho kopanya le ho netefatsa libolo.
2. Mohlala oa homogenization
Mohlala oa mohlala ho fellization ea mohlala o etsa bonnete ba homogeaity, e leng ntho ea bohlokoa bakeng sa litholoana tse ntle. Mekhoa ea ho fepegenizaniza e kenyelletsa:
Homogenization ea mochini: ho kopanya sampole e tiileng kapa e tiileng e sebelisang mohloekisi kapa homogenizer.
Homogezation ea Ultrasonic:Kopo ea ultrasound ho ea li-likaliba ka har'a sampole ea metsi.
3. Bolulo kapa khatello ea maikutlo
Ho latela tlhokomelo e lebelletsoeng ea lihlahlobo, mehlala e ka hloka ho hlasimoloha kapa ho tsepamisa mohopolo. Sena se ka fumaneha ka:
Tšebeliso:Qoba mohlala molemong oa ho tsepamisa mohopolo o tsebahalang ka mokhoa o ts'oanang mohato oa mobile.
TLHOKOMELISO:Lithethefatsi li ka tsepamisa mohopolo o sebelisa makhoaba a kang mouoane kapa tlhahiso e tiileng ea ho fetoha.
4. Ho fafatsa
Ho bohlokoa ho hlokahala hore u tlose thepa ea litaba e kanang likholomo tsa clog hpl. Mekhoa e fapa-fapaneng e kenyeletsa:
Filtal ea Membrane:Sebelisa0.2μm kapa 0.45μm Filtersho tlosa likaroloana. Ka tloaelo poly mathersulforfone (pes) kapa li-filthara tsa Nylon li sebelisoa.
Prefitation:Bakeng sa disampole tse nang le likarolo tse phahameng, lijalo ka sefako se seholo sa sere se seholo se ka thibela ho koaloa.
50 LIHLOOHO TSE BOTSOANG HANGATA KA LIHLOOHO TSE LING TSA SYRYRES, etsa bonnete ba ho hlahloba sengoloa sena se bulehileng: Sebopeho sa "Syringe Filter" 50 ea botsoa khafetsa
5. Mohlala o tsitsitseng
Nahana ka ho tsitsisa sampole ea hau ho thibela ho nyonyeha ha sekaseka.
Phetoho ea PH:Ho fetola PH ho ka thusa ho tsitsisa bahlonehi ba itseng. Mohlala, metsoako ea acidic e kanna ea hloka khethollo ho thibela ho senyeha.
LITLHAKISO:Ho eketsa ba nang le likhakanyo kapa baitlami ba ka thusa ho boloka botšepehi ba sampole nakong ea polokelo le ho hlahlojoa.
6. Khetho ea Solvent
Ho bohlokoa ho khetha lebala le nepahetseng ho qhibiliha sampole ea hau le ho netefatsa ho ikopanya le sistimi ea hau. Nahana ka se latelang:
Solven Polarity Polarity:Ho fihlela phetisetso e felletseng, solvent e lokela ho tsamaisana le polaight ea thekeng.
Khokahano ea Mohala oa Mobile Phase: Sebelisa solvent e lumellanang le karolo ea mobile ho fokotsa litšitiso tse ka bang teng.
7. Ho hlophisoa hoa litekanyetso
Ho hlophisoa ha litekanyetso ho bohlokoa ho bala sekaseka sampole. Sena se kenyeletsa:
Ho hlophisoa ha li-curve tsa khalase tsa calibration:Lokisetsa letoto la ho tseba lintho tse tsebahalang tsa sekaseka ho theha koluoa ea calibration bakeng sa palo.
Sebelisa solvent e tšoanang:Ho boloka nako, lokisa litekanyetso tsa hau u sebelisa matla le maemo a hau a sampole.
Mekhoa e metle bakeng sa boitokisetso ba li-hipc
Latela lits'ebetso tse tloaelehileng tsa ts'ebetso (sops):Theha le ho khomarela li-sops bakeng sa ho lokisoa ha mehlala ea mohlala ho netefatsa hore ho na le mokhoa oa ho feto-fetoha le maemo.
Sebelisa litlatsetso tsa boleng bo holimo le li-solven:Kamehla sebelisa li-solves tsa hipst li lula li sebelisa li-solvet tsa hipst le reagents tse phahameng haholo ho fokotsa litšila.
Boloka mosebetsi oa hau oa pele o hloekile:Boloka sebaka sa hau sa ho itokisa se hloekile ebile se hlophisehile ho fokotsa kotsi ea tšilafalo.
Ngola tsohle:Boloka litlaleho tse qaqileng tsa lits'ebetso tsa hau tsa mohlala tsa puisano, ho kenyelletsa le lifofane tse sebelisoang ho li-protocols tse tloaelehileng.
Mekhoa e netefatsang:Mekhoa e netefatsang ea mohlala kamehla ho netefatsa hore e fana ka sephetho se tšepahalang le se hlahisoang.
Ho rarolla mathata a tloaelehileng a mohlala
Sebopeho sa Peak sa Peak:Haeba litlhoro li pharalletse kapa li tsamaea, sena se ka bontša ho felisoa ha a sa felloe kapa ho ba teng hoa menyetla. Etsa bonnete ba hore sampole ea hau e tsoakoa ka botlalo ebile e fatliloe.
Ghost Plaks:Litlhōrō tsa Ghost li ka bakoa ke litšila ka lehare kapa sampole, sebelisa li-solvent tse phahameng tsa bohloeki le ho netefatsa hore lisebelisoa tsohle li hloekile.
Sensitivity e tlase:Haeba kutloelo-bohloko e le tlase, nahana ka ho ntlafatsa mokhoa oa hau oa ho tlosa kapa ho eketsa mahloriso a sengoli sa hau.
COLUME CROGGAR:Hangata ho koala khafetsa ho ka supa hore sampole ea hau e na le lintho tse ngata haholo kapa ha li na ho tšoasoa ka nepo. Lekola bocha ts'ebetso ea hau ea lifilimi ebe u nahana ka "
Liphetho tse sa lumellaneng:Ho fapana ha liphetho ho ka bakoa ke ho iphuthumatsa ho sa lumellane. Eleha Ts'ebetso kaofela le ho netefatsa hore basebetsi ba kolotoang sampole ba koetlisitsoe hantle.
Mekhoa e tsoetseng pele e lokiselitsoeng
Joalo ka ha ho eketseha ha tlhahlobo, li-laboratori li amohela mekhoa ea sampole e tsoelang pele e lokiselitsoeng ho ntlafatsa ts'ebetso le ho nepahala:
1. Exection e tiileng (SPE)
Spe ke mokhoa o sebelisoang haholo o lumellang ho khethoa chelete ho tsoa ho li-mattrice tse rarahaneng. Ho kenyelletsa ho feta sampole e nang le metsi ka thepa e tiileng ea Assorbent e bolokang sengoli se hlahlobang ha u ntse u lumella litšila ho feta.
2. Extlollo ea metsi (ly)
Lle ke mokhoa o arohanyang lingoloa tse thehiloeng ho litsi tsa bona lijana tse peli tse makatsang. Mokhoa ona o sebetsa ho arola metsoako e nang le lithaelese tse fapaneng 'me hangata e sebelisoa tlhahlobong ea tikoloho le phamarical.
3. Quechers (e potlakileng, e bonolo, e theko e tlaase, e theko e tlase, e ruiloeng le e bolokehileng)
Quechers ke mokhoa o tummeng oa ho hlophisa mehato ea tikoloho e kopanyang mehato e le 'ngoe le ho hloekisa e le hore e sebetse hantle' me e theko e boima.
4. TLHOKOMELISO
Ts'ebetso le tlhahiso e ka ntlafatsoa haholo ke lits'ebetso tsa mohlala, tse ka ho itokisa lijo, ka ho etsa joalo ka kotsi ea kotsi.
U batla ho tseba haholoanyane ka ho itokisa ha samc, ka kopo sheba sengoloa sena: HPTC sampole ea boitokiso ba litokisetso tse ntlehali
Sephetho
Litokisetso tsa HPTC li ikhotsofatsa ke bohato bo bobe bo ka ama haholo ho ama haholo ho nepahala le ho ts'epahala ha liphetho tsa tlhahlobo ea tlhahlobo. Ka ho latela mekhoa e metle, sebelisa mekhoa e nepahetseng, le ho sebetsana le mathata a tloaelehileng ka ho amohela mekhoa le mahlale a khalemeleng ka lebaka la tlhahlobo ea tlhahlobo. Maqhubu a tla ntlafatsa ts'ebetso le katleho ea lihlahlobo tsa HPLC. Boitokisetso bo nepahetseng ba mohlala bo ke ke ba ntlafala feela ho etsa hore boleng ba boleng, empa bo sireletsa tsamaiso ea HPPS, ba netefatsa ho tšepahala nako e telele le ts'ebetso.
Senyesemane
Sechaena
